Effekter av blyeksponering på ferroptose

Bakgrunn:

Bly (Pb) er et utbredt og svært giftig tungmetall. Menneskelige aktiviteter har vært den primære årsaken til blyforurensning i miljøet det siste århundret. Blyeksponering utgjør en global bekymring, spesielt for barn, og enkeltpersoner kan bli utsatt for bly på forskjellige måter, for eksempel forurenset jord, støv, mat, vann eller fremmedlegemer. Sentralnervesystemet (CNS) er spesielt sårbart for toksiske effekter av bly (Pb), spesielt hos barn, først og fremst på grunn av umodenhet i blod-hjerne-barrieren.

Ferroptose er en nylig definert form for regulert celledød preget av jernavhengig celledød som følge av akkumulering av lipidhydroperoksider. En fersk studie har vist at bly(II)acetat, en vanlig løselig blyforbindelse som finnes i forurenset jord, kan indusere ferroptose i nerveceller og forårsake nerveskade gjennom MiR-378a-3p/SLC7A11-aksen. Imidlertid er den nøyaktige mekanismen som ligger til grunn for de nevrotoksiske effektene av kronisk lav-nivå blyeksponering-indusert ferroptose på nevronal skade ennå ikke fullt ut forstått. Derfor, basert på tidligere studier, antar vi at kronisk lav-nivå blyeksponering-indusert ferroptose kan forårsake nevrotoksisitet ved å dysregulere jernmetabolismen og den Nrf2-avhengige ferroptoseveien.

Metoder:

Etterforskerne analyserer først forskjellen i blodets blynivå ved hjelp av atomabsorpsjonsspektrometri.

Etterforskerne registrerte 20 arbeidere med kronisk blyeksponering fra en blybatterifabrikk og en alderstilpasset kontrollgruppe av ikke-blyeksponerte arbeidere.

TNF-α ELISA KIT ble brukt til å sammenligne proinflammatoriske cytokiner i to grupper. Kvantitativ revers transkripsjon PCR (Polymerase Chain Reaction) ble brukt til å sammenligne messenger ribonukleinsyre (mRNA) uttrykk for jernmetabolisme (FTH1, FPN1, DMT1) og Nrf2-avhengig ferroptosevei (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Protokoll for detaljerte metoder

1. Kriteriene for deltakere med kronisk blyeksponering var som følger: Inkludering: arbeid for denne blybatterifabrikken i mer enn 10 år; Ekskludering: eksponering for kjemiforurensning før; nevrologiske lidelser; endokrine sykdommer; kreft
2. Prøveinnsamling: Ved slutten av rekrutteringen i denne studien vil alle de registrerte deltakerne komme til sykehuset for å samle perifert blod (Northern Jiangsu People's Hospital, tilknyttet Yangzhou University), og blodprøvene vil bli samlet inn i EDTA (ethyleneDiamine tetraacetic) acid) vacutainer-rør og deretter delt inn i leukocytter og plasma for videre eksperimenter
3. TNF-α ELISA KIT: Plasma-TNF-α-konsentrasjoner ble påvist med den konkurrerende ELISA-metoden
4. primersekvens: h-DMT1 fremover: 5'-CTAGACTGGGAGTGGTTACTGG-3' h-DMT1 revers: 5'-AGGATGACTCGTGGGACCTT-3' h-FTH1 fremover: 5'-CTGGTGGCCGAATCTTCCTTCA-3' h-FTH1 bakover: 5'-GCCTTAGTTAGTG3-CCGTTAGTTTGTG ' h-FPN1 fremover: 5'-CTACTTGGGGAGATCGGATGT-3' h-FPN1 bakover: 5'-CTGGGCCACTTTAAGTCTAGC-3' h-GPX4 fremover: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 bakover: 5'-CCGAAGGTTACACGGGA -SLC7A11 forover: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 bakover: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 fremover 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 bakover 5'- CACTTGCTCAHCG3G forover 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH omvendt: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'