Ferroptosis에 대한 납 노출의 영향

배경:

납(Pb)은 만연하고 독성이 강한 중금속입니다. 인간 활동은 지난 세기 동안 환경에서 납 오염의 주요 원인이었습니다. 납 노출은 특히 어린이들에게 전 세계적으로 우려되는 사항이며 개인은 오염된 토양, 먼지, 음식, 물 또는 이물질과 같은 다양한 수단을 통해 납에 노출될 수 있습니다. 중추신경계(CNS)는 주로 혈액-뇌 장벽의 미성숙으로 인해 특히 어린이의 경우 납(Pb)의 독성 영향에 특히 취약합니다.

Ferroptosis는 지질 하이드로퍼옥사이드의 축적으로 인한 철 의존성 세포 사멸을 특징으로 하는 조절된 세포 사멸의 최근 정의된 형태입니다. 최근 연구에 따르면 오염된 토양에서 발견되는 일반적인 용해성 납 화합물인 아세트산납(II)이 신경 세포에서 페롭토시스를 유발하고 MiR-378a-3p/SLC7A11 축을 통해 신경 손상을 일으킬 수 있는 것으로 나타났습니다. 그러나 신경 손상에 대한 만성 저농도 납 노출 유발 페롭토시스의 신경독성 효과의 기본이 되는 정확한 메커니즘은 아직 완전히 이해되지 않았습니다. 따라서 이전 연구를 바탕으로 우리는 철 대사 및 Nrf2 의존성 ferroptosis 경로를 조절하지 못하여 만성 저농도 납 노출 유발 ferroptosis가 신경 독성을 유발할 수 있다는 가설을 세웠습니다.

행동 양식:

연구자들은 먼저 원자 흡수 분광법을 사용하여 혈중 납 수치의 차이를 분석합니다.

조사관은 납 축전지 공장에서 만성적으로 납에 노출된 근로자 20명과 납에 노출되지 않은 근로자의 연령에 맞는 대조군을 등록했습니다.

TNF-α ELISA KIT를 사용하여 두 그룹의 전염증 사이토카인을 비교 정량적 역전사 PCR(Polymerase Chain Reaction)을 사용하여 철 대사(FTH1, FPN1, DMT1)와 Nrf2 의존성 메신저 리보핵산(mRNA) 발현을 비교했습니다. 페롭토시스 경로(Nrf2, SLC7A11, GPX4) 상세 방법 프로토콜

1. 등록된 만성 납 노출 참가자의 기준은 다음과 같습니다. 포함: 이 납산 배터리 공장에서 10년 이상 근무; 제외: 이전에 화학 오염에 대한 노출; 신경 장애; 내분비질환; 암
2. 샘플 수집: 이 연구의 모집이 끝나면 등록된 모든 참가자가 말초 혈액을 수집하기 위해 병원(Yangzhou 대학 부속 북부 장쑤 인민 병원)에 와서 혈액 샘플을 EDTA(ethyleneDiamine tetraacetic acid) vacutainer tube에 넣은 다음 추가 실험을 위해 백혈구와 혈장으로 나눕니다.
3. TNF-α ELISA KIT: 경쟁적 ELISA 방법으로 혈장 TNF-α 농도 검출
4. 프라이머 서열: h-DMT1 정방향: 5'-CTAGACTGGGAGTGGTTACTGG-3' h-DMT1 역방향: 5'-AGGATGACTCGTGGGACCTT-3' h-FTH1 정방향: 5'-CTGGTGGCCGAATCTTCCTTCA-3' h-FTH1 역방향: 5'-GCCAGTTTGTGCAGTTCCAG-3 ' h-FPN1 정방향: 5'-CTACTTGGGGAGATCGGATGT-3' h-FPN1 역방향: 5'-CTGGGCCACTTTAAGTCTAGC-3' h-GPX4 정방향: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 역방향: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h -SLC7A11 정방향: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 역방향: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 정방향 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 역방향 5'- CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH 정방향: 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH 역: 5'-GGCTTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'