Az ólomnak való kitettség hatása a ferroptózisra

Háttér:

Az ólom (Pb) egy elterjedt és nagyon mérgező nehézfém. Az emberi tevékenység volt a környezet ólomszennyezésének elsődleges oka az elmúlt évszázad során. Az ólomnak való kitettség globális aggodalomra ad okot, különösen a gyermekek számára, és az egyének különféle módokon, például szennyezett talajon, poron, élelmiszeren, vízen vagy idegen tárgyakon keresztül is ki lehetnek téve az ólomnak. A központi idegrendszer (CNS) különösen érzékeny az ólom (Pb) toxikus hatásaira, különösen gyermekeknél, elsősorban a vér-agy gát éretlensége miatt.

A ferroptózis a szabályozott sejthalál egy nemrégiben meghatározott formája, amelyet a lipid-hidroperoxidok felhalmozódásából eredő vasfüggő sejthalál jellemez. Egy közelmúltban végzett tanulmány kimutatta, hogy az ólom(II)-acetát, a szennyezett talajban található gyakori oldható ólomvegyület, ferroptózist indukálhat az idegsejtekben, és idegsérülést okozhat a MiR-378a-3p/SLC7A11 tengelyen keresztül. A krónikus, alacsony szintű ólomexpozíció által kiváltott ferroptózis neuronális sérülésekre gyakorolt ​​neurotoxikus hatásai mögött meghúzódó pontos mechanizmus azonban még nem teljesen ismert. Ezért korábbi tanulmányok alapján azt feltételezzük, hogy a krónikus, alacsony szintű ólomexpozíció által kiváltott ferroptózis neurotoxicitást okozhat a vasanyagcsere és az Nrf2-függő ferroptózis út szabályozásának zavara révén.

Mód:

A kutatók először atomabszorpciós spektrometriával elemzik a vér ólomszintjének különbségét.

A nyomozók 20 krónikus ólomexpozíciónak kitett munkavállalót vontak be egy ólomsavas akkumulátorgyárból, valamint egy korosztályos, ólomnak nem kitett munkavállalók kontrollcsoportját.

TNF-α ELISA KIT-et használtunk a proinflammatorikus citokinek összehasonlítására két csoportban. Kvantitatív reverz transzkripciós PCR-t (Polymerase Chain Reaction) alkalmaztunk a vasanyagcsere (FTH1, FPN1, DMT1) és a Nrf2-függő messenger ribonukleinsav (mRNS) expressziójának összehasonlítására. ferroptosis útvonal (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Részletes Methods protokoll

1. A beiratkozott krónikus ólomexpozícióban részt vevők kritériumai a következők voltak: Bevétel: több mint 10 éve az ólom-savas akkumulátorgyárban végzett munka; Kizárás: korábban bármilyen kémiai szennyezésnek való kitettség; Neurológiai rendellenességek; endokrin betegségek; rák
2. Mintavétel: A vizsgálat végén az összes beiratkozott résztvevő a kórházba érkezik, hogy perifériás vért gyűjtsön (Northern Jiangsu People's Hospital, kapcsolatban áll a Yangzhou Egyetemmel), és a vérmintákat EDTA-ba (etilén-Diamin-tetraecetsav) gyűjtik. acid) vacutainer csövek, majd leukocitákra és plazmára osztják a további kísérletekhez
3. TNF-α ELISA KIT: A plazma TNF-α koncentrációit kompetitív ELISA módszerrel detektáltuk
4. primerszekvencia: h-DMT1 előre: 5'-CTAGACTGGGAGTGGTTACTGG-3' h-DMT1 fordított: 5'-AGGATGACTCGTGGGACCTT-3' h-FTH1 előre: 5'-CTGGTGGCCGAATCTTCCTTCA-3' h-FTH1 ' h-FPN1 előre: 5'-CTACTTGGGGAGATCGGATGT-3' h-FPN1 hátra: 5'-CTGGGCCACTTTAAGTCTAGC-3' h-GPX4 előre: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 hátrafelé: 5'-CCGAACGG 5'-CCGAACGG -SLC7A11 előre: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 hátra: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 előre 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 hátramenet 5'-Nrf2 hátramenet 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH fordított: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'