Влияние воздействия свинца на ферроптоз

Фон:

Свинец (Pb) является распространенным и высокотоксичным тяжелым металлом. Человеческая деятельность была основной причиной загрязнения окружающей среды свинцом за последнее столетие. Воздействие свинца представляет собой глобальную проблему, особенно для детей, и люди могут подвергаться воздействию свинца различными путями, такими как загрязненная почва, пыль, продукты питания, вода или посторонние предметы. Центральная нервная система (ЦНС) особенно уязвима к токсическому действию свинца (Pb), особенно у детей, в первую очередь из-за незрелости гематоэнцефалического барьера.

Ферроптоз — недавно определенная форма регулируемой гибели клеток, характеризующаяся железозависимой гибелью клеток в результате накопления гидропероксидов липидов. Недавнее исследование показало, что ацетат свинца (II), обычное растворимое соединение свинца, обнаруженное в загрязненной почве, может вызывать ферроптоз в нервных клетках и вызывать повреждение нервов через ось MiR-378a-3p/SLC7A11. Однако точный механизм, лежащий в основе нейротоксических эффектов хронического ферроптоза, вызванного низким уровнем воздействия свинца, на повреждение нейронов, еще полностью не изучен. Поэтому, основываясь на предыдущих исследованиях, мы предполагаем, что хронический ферроптоз, вызванный низким уровнем воздействия свинца, может вызывать нейротоксичность за счет нарушения регуляции метаболизма железа и Nrf2-зависимого пути ферроптоза.

Методы:

Исследователи сначала анализируют разницу уровней свинца в крови с помощью атомно-абсорбционной спектрометрии.

Исследователи привлекли 20 рабочих, постоянно подвергающихся воздействию свинца, с завода по производству свинцово-кислотных аккумуляторов и контрольную группу того же возраста, состоящую из рабочих, не подвергавшихся воздействию свинца.

TNF-α ELISA KIT использовали для сравнения провоспалительных цитокинов в двух группах. Количественную ПЦР с обратной транскрипцией (полимеразную цепную реакцию) использовали для сравнения экспрессии матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК) метаболизма железа (FTH1, FPN1, DMT1) и Nrf2-зависимого путь ферроптоза (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Подробный протокол методов

1. Критерии зарегистрированных участников хронического воздействия свинца были следующими: Включение: работа на этом заводе по производству свинцово-кислотных аккумуляторов более 10 лет; Исключение: воздействие любых химических загрязнений ранее; неврологические расстройства; эндокринные заболевания; рак
2. Сбор образцов: в конце набора в этом исследовании все зарегистрированные участники придут в больницу для сбора периферической крови (Народная больница Северной Цзянсу, связанная с Университетом Янчжоу), и образцы крови будут собраны в ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота). кислоты) вакутайнерные пробирки, а затем разделяли на лейкоциты и плазму для дальнейших экспериментов
3. НАБОР TNF-α ELISA: Концентрации TNF-α в плазме определяли методом конкурентного ELISA.
4. последовательность праймеров: h-DMT1 прямой: 5'-CTAGACTGGGAGTGGTTACTGG-3' h-DMT1 обратный: 5'-AGGATGACTCGTGGGACCTT-3' h-FTH1 прямой: 5'-CTGGTGGCCGAATCTTCCTTCA-3' h-FTH1 обратный: 5'-GCCAGTTTGTGCAGTTCCAG-3 'h-FPN1 прямой: 5'-CTACTTGGGGAGATCGGATGT-3' h-FPN1 обратный: 5'-CTGGGCCACTTTAAGTCTAGC-3' h-GPX4 прямой: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 обратный: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h -SLC7A11 прямой: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 обратный: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 прямой 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 обратный 5'-CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH прямой: 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH обратный: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'