Effekter av blyexponering på ferroptos

Bakgrund:

Bly (Pb) är en utbredd och mycket giftig tungmetall. Mänskliga aktiviteter har varit den främsta orsaken till blyförorening i miljön under det senaste århundradet. Blyexponering utgör ett globalt problem, särskilt för barn, och individer kan exponeras för bly på olika sätt, såsom förorenad jord, damm, mat, vatten eller främmande föremål. Det centrala nervsystemet (CNS) är särskilt känsligt för de toxiska effekterna av bly (Pb), särskilt hos barn, främst på grund av omognaden av blod-hjärnbarriären.

Ferroptos är en nyligen definierad form av reglerad celldöd som kännetecknas av järnberoende celldöd till följd av ackumulering av lipidhydroperoxider. En nyligen genomförd studie har visat att bly(II)acetat, en vanlig löslig blyförening som finns i förorenad jord, kan inducera ferroptos i nervceller och orsaka nervskada genom MiR-378a-3p/SLC7A11-axeln. Den exakta mekanismen som ligger bakom de neurotoxiska effekterna av kronisk lågnivå blyexponeringsinducerad ferroptos på neuronal skada är ännu inte helt klarlagd. Därför, baserat på tidigare studier, antar vi att kronisk lågnivå blyexponeringsinducerad ferroptos kan orsaka neurotoxicitet genom att dysregulera järnmetabolismen och den Nrf2-beroende ferroptosvägen.

Metoder:

Utredarna analyserar först skillnaden i blodblynivå med hjälp av atomabsorptionsspektrometri.

Utredarna registrerade 20 arbetare med kronisk blyexponering från en blybatterifabrik och en åldersmatchad kontrollgrupp av icke-blyexponerade arbetare.

TNF-α ELISA KIT användes för att jämföra de proinflammatoriska cytokinerna i två grupper Kvantitativ omvänd transkriptions-PCR (Polymerase Chain Reaction) användes för att jämföra budbärarribonukleinsyra (mRNA) uttryck av järnmetabolism (FTH1, FPN1, DMT1) och Nrf2-beroende ferroptosväg (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Protokoll för detaljerade metoder

1. Kriterierna för inskrivna deltagare med kronisk blyexponering var följande: Inkludering: arbeta för denna blysyrabatterifabrik i mer än 10 år; Uteslutning: exponering för någon kemisk förorening tidigare; neurologiska störningar; endokrina sjukdomar; cancer
2. Provinsamling: I slutet av rekryteringen i denna studie kommer alla de inskrivna deltagarna att komma till sjukhuset för att samla in perifert blod (Northern Jiangsu People's Hospital, anslutet till Yangzhou University), och blodproverna kommer att samlas in i EDTA (etylendiamintetraättiksyra) acid) vacutainerrör och delas sedan upp i leukocyter och plasma för ytterligare experiment
3. TNF-α ELISA KIT: TNF-α-koncentrationer i plasma detekterades med den kompetitiva ELISA-metoden
4. primersekvens: h-DMT1 framåt: 5'-CTAGACTGGGAGTGGTTACTGG-3' h-DMT1 bakåt: 5'-AGGATGACTCGTGGGACCTT-3' h-FTH1 framåt: 5'-CTGGTGGCCGAATCTTCCTTCA-3' h-FTH1 bakåt: 5'-GCCTTAGTTAGTG3-CCGTTAGTTAGTG ' h-FPN1 framåt: 5'-CTACTTGGGGAGATCGGATGT-3' h-FPN1 bakåt: 5'-CTGGGCCACTTTAAGTCTAGC-3' h-GPX4 framåt: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 bakåt: 5'-CCGAAGGTTACACGGGA -SLC7A11 framåt: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 bakåt: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 framåt 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 bakåt 5'- CACTGACTCAHCG3G framåt 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH omvänd: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'