自身免疫性疾病患者的间充质干细胞输注 (MSCs in AD)

自身免疫性疾病是从器官特异性的一系列疾病，其中抗体和T细胞与特定组织中的自我抗原反应，到全身性的自我抗原，其特征是针对特定的抗原（S）在体内各种组织中传播的特定抗原。 根据疾病控制与预防中心的数据，不同自身免疫性疾病的发生率可变，有22.7％的人患有风湿性疾病。 尽管在巴基斯坦没有纯粹针对自身免疫性疾病进行基于人群的流行病学研究。 Mohsin Z等人的研究。报告说，卡拉奇一家三级医院的风湿病患病率为17.3％。 自身免疫性疾病及其治疗方式是发展中国家残疾的主要原因，并且与健康相关的生活质量（HRQOL）和日常功能的丧失能力最高。

21世纪在治疗免疫功能障碍疾病方面取得了迅速的进步。 一种这样的治疗方式是干细胞疗法，据信可以修复和再生组织。 特别是，间充质干细胞（MSC）已应用于治疗与年龄相关的疾病，生活方式改变，免疫功能障碍和中风。 MSC therapy has promise to treat various autoimmune disorders like refractory systemic lupus erythematosus (SLE), Crohn's disease, systemic sclerosis (SS), rheumatoid arthritis (RA), multiple sclerosis (MS), graft versus host disease, diabetes mellitus, thyroiditis and even different types of neurological disorders. 目前，将近一千个临床试验使用了基于MSC的疗法。 在大约一百次试验中，已经进行了用于治疗免疫介导的疾病的试验，第一次是15年前的第一个试验（表1）。

最初，围绕MSC的兴趣是基于其固有的自我更新和再生能力，并有可能形成中胚层的细胞（脂肪细胞，骨细胞，软骨细胞，软骨细胞，肝细胞，神经元，肌肉细胞和上皮细胞和上皮细胞）。 后来，由于它们能够进入发炎区域并发挥免疫调节作用，因此使用MSC的疗法扩展到自身免疫性和慢性炎症过程的治疗。 多项研究还表明，MSC具有内在的免疫调节和抗炎特性。

表1：将间充质干细胞用作治疗方式的临床试验。

Immune mediated disorder Number of Clinical trials Year of first Clinical trial Reference Graft vs. host disease 49 2004 Inflammatory bowel disease 23 2006 Multiple sclerosis 29 2006 Systemic lupus erythematosus 10 2007 Type I diabetes 26 2008 Primary Sjögren syndrome 1 2009 Type II diabetes 13 2010 Autoimmune hepatitis 2 2011 Ankylosing spondylitis 2 2011 Chronic urticarial 1 2017年难治性自身免疫性血小板减少症1 2019

最初在BM中鉴定出MSC的MSC来源，通常通过梯度离心分离以分离成核细胞，然后是体外培养和串行通道。 国际细胞治疗学会（ISCT）的间充质和组织干细胞委员会已指定了在标准培养条件下发现的塑料粘附细胞的“多能间充质基质细胞”一词。 根据ISCT标准，这些细胞的免疫表型对细胞表面标记CD73，CD90和CD105呈阳性，并且表面CD14或CD14或CD11B，CD45，CD34，CD34，CD79或CD19和HLA-DR为阴性。 还从脂肪组织，胎盘，羊水，脐带血（UCB），骨骼肌和真皮，牙科组织以及肺组织（例如肺和血液）中获得了MSC。 还报道了动员的外周血细胞作为MSC的来源。 尽管基因表达研究表明，从不同组织来源获得的MSC种群高度异质，但它们具有更新，分化和主要功能性能的能力，例如免疫耐受性，伤口愈合，炎症和纤维化的调节，都是所有MSC的常见。

1. 对免疫系统细胞MSC细胞的影响抑制了同种抗菌素或有丝分裂剂诱导的T细胞增殖，从而增加了调节性T细胞的数量，并减少了HSCT和免疫介导的疾病后GVHD的并发症。 另外，MSC抑制B细胞，天然杀伤细胞和树突状细胞的功能。 MSC的主要免疫抑制功能是产生诱导的可溶性因子。但是，这些细胞还可以通过直接细胞对细胞相互作用发挥免疫抑制作用。 在促炎性细胞因子干扰素（IFN）-G，肿瘤坏死因子 - α和介入核酸酯（IL）-6。在免疫学上的免疫学上，MSC可以促进T-Cell存活和促进cd4 properativation CD4的阳性，在炎症条件下，MSC的免疫抑制能力增强了。
2. 产生免疫调节可溶性因子MSC组成部产生可诱导的可溶性因子，例如转化生长因子-β（TGF-β），肝细胞生长因子，一氧化氮，HLA-G59和吲哚胺2,3-二氧酶介导其作用。 还产生了大量的IL-6和al-8，以及趋化因子CCL-2。 用IFN-γ，分泌ICAM-1，CXCL-10和CCL-8处理的MSC，而IL-8产生降低。 这种现象表明，在非炎症条件下，MSC靶向中性粒细胞和单核细胞，但在炎症条件下吸引单核细胞，树突细胞，T细胞和天然杀伤细胞。 许多研究报道了TGF-βAS是MSC免疫调节的关键介质。
3. MSC的促炎性“许可”被称为“智能”免疫调节器，因为它们的抑制作用需要以前的许可步骤，该步骤在存在炎症环境的情况下发生。 如果在急性炎症期间移植MSC，则含有极化M1巨噬细胞“许可” MSC的微环境抑制效应效果T，B，天然杀伤和树突状细胞。 相反，如果在慢性炎症期间发生的Th2型细胞因子在M2巨噬细胞极化后获得许可，则微环境提供了替代许可，并将MSC招募到纤维化过程。
4. 例如，缺血组织的细胞再生中的MSC旁分泌因子需要大量细胞供应，例如，梗塞心脏的数十亿。 实验研究和临床试验表明，MSC介导的治疗益处可能在很大程度上依赖于分泌量的生长因子和细胞因子的贡献，而不是将其分化为心肌细胞，血管或肾细胞的潜力，如先前研究所示。 MSC分泌的调节和营养因子面板包括大量生长因子，细胞因子和趋化因子。

将MSC知识转化为临床应用细胞疗法确实是自身免疫性疾病的适用转化策略。

1. 人类的移植物与宿主疾病（GVHD），研究最多的MSC申请是GVHD，这是造血干细胞移植的并发症。 2004年，一名9岁男孩患有严重的肠道和肝脏急性GVHD，并用第三方单倍的母亲衍生的MSC治疗。 抗类固醇严重急性GVHD患者的II期临床试验显示出70％的初始缓解率与年龄或HLA匹配无关。 但是，在这些试验中仍缺乏持久的完整响应或其他主要终点。
2. 克罗恩病（CD）在2005年发表了使用自体脂肪衍生的MSC进行I期临床疗法的第一阶段报告。 局部注射导致瘘管的愈合（6/8），没有不良影响，这些结果在2009年在一项随机对照试验中证实了2009年的II期多中心[24]。 目前，有一个III期，多中心，安慰剂对照，随机和盲目的研究，以评估Osiris Therapeutics进行的同种异体BM-MSC的安全性和功效。 （http：//www.clinicalthicals。 gov/ct2/show/nct00482092）。
3. 对难治性MS患者的多发性硬化症（MS）I/II期研究证实，随访期间没有不良反应（6-28个月）。 在MSC移植后数小时，检测到CD4+ CD25+调节T细胞的比例随淋巴细胞的增殖反应减少和树突状细胞上的激活标记的比例增加。 患者对视觉功能的度量进行了改进，没有明显的不良事件的证据。 治疗后，普通残疾的进展也降低了。
4. 全身性红斑狼疮（SLE）可能是人类MSC治疗的最显着结果，目前来自针对严重治疗难治性SLE的临床试验。 患有活性疾病和狼疮性肾炎的患者对每月静脉注射无反应 用MSC治疗时，环磷酰胺和口服泼尼松（≥20mg/天）已显示出改善的预后。 这些患者的疾病活性指数（SLEDAI）在一个，六和十二个月的随访中明显改善，尿蛋白也是如此。 在某些试验中，史莱泰高的患者从非HLA匹配的健康家庭成员中从3-5段落中输注了一种同种异体BM-MSC。 他们的后续行动的中位数为17.2（3-36）个月，没有不利影响，死亡或随之而来的GVHD。 令人惊讶的是，在MSC治疗后一周，即使在抗DSDNA抗体变化之前，24小时的蛋白尿早在一个月之前就显着降低，该抗体在一个月和MSC剂量后一个月和三个月后显着降低。 发现在活性SLE中发现定量和质量缺陷的T调节性（Treg）细胞在第一周恢复，这是由外周血单核细胞中CD4+ FOXP3+细胞百分比所判断的。 其他试验虽然随访较短，也显示出明显的改进，可以验证SLEDAI评分，血清白蛋白，24小时尿蛋白，血清肌酐，血清补体和抗DSDNA抗体。 毫无疑问，必须在SLE中进一步探索MSC治疗。
5. 全身性硬化症（SS）SS是一种免疫介导的疾病，具有突出的血管和微血管成分通常导致缺血性并发症。 由于MSC可以在体外区分到内皮细胞，还可以参与成人组织中的血管形成，因此据报道，具有自体和单倍体第三方供体MSC的治疗，从而在两份单独的病例报告中有所改善。
6. 类风湿关节炎（RA）文献搜索表明，关于RA动物模型的一百多个临床前研究和关于人类患者的九项临床试验已经完成了在RA中使用基于MSC的治疗，并确立了其安全性和功效。 而九项临床试验仍在进行中。 在这些患者中，有三分之二的同种异体MSC以约1-10 x106/kg的剂量。 据认为，MSC靶向致病记忆T细胞并停止RA患者疾病病程的进展。
7. 多聚肌炎/皮肤肌炎（PM/DM）多聚肌炎/皮肌炎（PM/DM）是一种自身免疫性疾病，其特征是近端骨骼肌和明显的皮肤表现，并且已知会影响多个器官，例如肌肉，肺部和小子。 目前，病因尚不清楚。 几项研究表明，T助手（Th）细胞参与PM/DM的发病机理，因为TH与细胞相关的细胞功能障碍在PM或DM的发生和发育中起重要作用。 因此，MSCT可以为PM和DM的治疗提供新的治疗策略。 几项研究表明，这种方法具有有希望的临床结果。 在另一项研究中，将32 pm和DM患者用1×106/kg MSC静脉注射。 9年的随访研究结果表明，患者的症状和血清学指标得到了改善，显示了MSCT在PM和DM中的有效性和安全性，而11例患者由于与移植无关的原因而死亡。

在另一项研究中，将81例PM/DM患者随机分为两组：对照组中的44例患者用糖皮质激素和免疫抑制剂单独治疗6个月，而移植组的37例患者则以3.5-5.2静脉注射。 ×107 UC-MSC。 该研究的结果表明，两组的肌酸激酶值均显着下降。但是，移植组的结果比对照组在几个时间点上具有更好的结果，并且移植组的肺功能显着改善。 一名患者在移植后死亡，没有发生与移植有关的并发症。 目前，只有少数研究调查PM/DM，需要进行大规模和随机临床研究来评估MSCT在PM/DM患者中的长期有效性和安全性，包括肿瘤和感染的风险，以及最佳的移植剂量和时间表。

由于在案例报告和I-II期试验中的临床结果似乎有时会引人注目，因此存在迫切需要进行结构化的，优选控制的多中心试验，并记录我们自己人群中的结果。