Инфузия мезенхимальных стволовых клеток у пациентов с аутоиммунными заболеваниями (MSCs in AD)

Аутоиммунные расстройства представляют собой спектр заболеваний, начиная от органа-специфических, при которых антитела и Т-клетки реагируют на самоантигены, локализованные в определенной ткани, до системных, которые характеризуются реакционной способностью против специфического антигена (S), распространяющихся по различным тканям в организме. Частота различных аутоиммунных заболеваний является переменной, согласно Центрам контроля и профилактики заболеваний, 22,7% имеют ревматические заболевания. Хотя в Пакистане не было проведено эпидемиологическое исследование, основанное на населении, исключительно при аутоиммунных заболеваниях; Исследование Mohsin Z et al. Сообщает, что комбинированная распространенность ревматических заболеваний в третичной больнице в Карачи составляет 17,3%. Аутоиммунные заболевания и их методы лечения являются основной причиной инвалидности в развивающихся странах и имеют самые высокие показатели переноса в качестве связанного со здоровьем качества жизни (HRQOL) и ежедневного функционирования.

В 21 -м веке быстрое достижение в лечении заболеваний иммунной дисфункции. Одним из таких методов лечения является терапия стволовыми клетками, которая, как полагают, восстанавливает и восстанавливает ткани. В частности, мезенхимальные стволовые клетки (MSC) были применены для лечения заболеваний, связанных с возрастом, изменением образа жизни, иммунной дисфункции и инсульта. Терапия MSC обещает лечить различные аутоиммунные расстройства, такие как рефрактерная системная волчанка (SLE), болезнь Крона, системный склероз (SS), ревматоидный артрит (RA), рассеянный склероз (MS), заболевание трансплантата по сравнению с болезнью -хозяином, диабет -блист, тигодеоодезит и даже различные типы неврологических дезирсов. В настоящее время почти тысяча клинических испытаний использовали методы лечения на основе MSC. Среди тех, кто был проведен около ста испытаний для лечения иммуноопосредованных расстройств, первый из которых составлял более пятнадцати лет назад (Таблица 1).

Интерес, окружающая поля MSC, первоначально основывалось на их присущей самооценке самообновления и регенерации с потенциалом образования клеток мезодермального происхождения (адипоциты, остеоцитов, хондроцитов, гепатоцитов, нейронов, мышечных клеток и эпителиальных клеток) в зависимости от окружающей среды. Позже, из -за их способностей к дому в воспаленных районах и оказывает иммуномодулирующее воздействие, терапия с MSC распространялась на лечение аутоиммунных и хронических воспалительных процессов. Многочисленные исследования также продемонстрировали, что МСК обладают внутренними иммуномодулирующими и противовоспалительными свойствами.

Таблица 1: Клинические испытания, в которых мезенхимальные стволовые клетки используются в качестве терапевтического модальности.

Immune mediated disorder Number of Clinical trials Year of first Clinical trial Reference Graft vs. host disease 49 2004 Inflammatory bowel disease 23 2006 Multiple sclerosis 29 2006 Systemic lupus erythematosus 10 2007 Type I diabetes 26 2008 Primary Sjögren syndrome 1 2009 Type II diabetes 13 2010 Autoimmune hepatitis 2 2011 Ankylosing spondylitis 2 2011 Chronic urticarial 1 2017 Refractory Аутоиммунная тромбоцитопения 1 2019

Источник MSCS MSC был первоначально идентифицирован в BM и обычно выделяется градиентным центрифугированием для отдельных зарожденных клеток, за которыми следуют культура in vitro и серийные пассажи. Мезенхимальный и тканевый комитет стволовых клеток Международного общества клеточной терапии (ISCT) определил термин «мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки» для пластиковых клеток, обнаруженных в стандартных условиях культивирования. Иммунофенотип этих клеток в соответствии с критериями ISCT является положительным для маркеров клеточной поверхности CD73, CD90 и CD105 и отрицательными для поверхностных CD14 или CD11B, CD45, CD34, CD79 или CD19 и HLA-DR. МСК также были получены из жировой ткани, плаценты, амниотической жидкости, пуповинной крови (UCB), соединительных тканей скелетных мышц и дермы, зубной ткани и тканей плода, таких как легкие и кровь. Мобилизованные периферические клетки крови также сообщались в качестве источника MSC. Хотя исследования экспрессии генов демонстрируют, что популяции MSC, полученные из разных источников тканей, являются очень гетерогенными, их способность обновлять, дифференцировать и основные функциональные свойства, такие как регуляция иммунологической толерантности, заживление ран, воспаление и фиброз, являются общими для всех МСК.

1. Влияние на клетки МСК иммунной системы подавляют пролиферацию Т-клеток, индуцированную аллоантигенами или митогенами, посредством увеличения числа регуляторных Т-клеток и уменьшают осложнения ГВПХ после HSCT и иммунопосредованного заболевания. Кроме того, МСК ингибируют функцию В -клеток, природных клеток -киллеров и дендритных клеток. Основная иммуносупрессивная функция MSCS заключается в производстве индуцированных растворимых факторов; Тем не менее, эти клетки также могут оказывать иммуносупрессивное действие путем прямого взаимодействия клеток к клеткам. Иммуносупрессивная способность MSCs повышается в воспалительных условиях в присутствии провоспалительного цитокинов интерферона (IFN) -G, фактора некроза опухоли и межлевного кокина (IL) -6. При иммунологически условиях, MSC, способствуют выживаемости T-клеток и могут информировать активацию и пролиферации CD4-положительных.
2. Производство иммуномодулирующих растворимых факторов МСК конститутивно вызывают индуцируемые растворимые факторы, такие как трансформирующий фактор роста-β (TGF-β), фактор роста гепатоцитов, оксид азота, HLA-G59 и индолия 2,3-диоксигеназа, которые опосредуют их влияние. Большие количества IL-6 Andil-8 и хемокин CCL-2 также производятся. MSC, обработанные IFN-γ, секретируют ICAM-1, CXCL-10 и CCL-8, тогда как продукция IL-8 снижается. Это явление предполагает, что МСК нацелены на нейтрофилы и моноциты в невоспалительных условиях, но притягивают моноциты, дендритные клетки, Т-клетки и природные клетки-убийцы в условиях воспаления. В ряде исследований сообщалось, что TGF-βAS является ключевым медиатором иммуномодуляции MSC.
3. Провоспалительное «лицензирование» MSCS MSCs было названо «умными» иммунными модуляторами, поскольку их подавляющие эффекты требуют предыдущей стадии лицензирования, которая возникает в присутствии воспалительной среды. Если MSC пересаживаются во время острого воспаления, микросреда, содержащая поляризованные лицензии MSC -макрофагов M1 для ингибирования эффекторных, B, естественных и дендритных клеток. Напротив, если MSC лицензируются после поляризации макрофагов M2 цитокинами Th2, как это происходит во время хронического воспаления, микроокружение обеспечивает альтернативное лицензирование и рекрутирует MSC для процесса фиброза.
4. Паракринные факторы MSC в механизме восстановления клеточной регенерации ишемической ткани требуют массового снабжения клеток, например, по порядку миллиарда для инфарктного сердца. Экспериментальные исследования и клинические испытания показали, что MSC-опосредованная терапевтическая польза может в значительной степени основываться на вкладе секретируемых количеств факторов роста и цитокинов, а не на их потенциал для дифференцировки в кардиомиоциты, сосудистые или почечные клетки, как показано в предыдущем исследовании. Группа регуляторных и трофических факторов, секретируемых MSC, включает в себя большое количество факторов роста, цитокинов и хемокинов.

Перевод знаний MSC в клиническую клеточную терапию, по -видимому, является применимой трансляционной стратегией для аутоиммунных заболеваний.

1. Заболевание трансплантата по сравнению с болезнью хозяина (GVHD) У людей наиболее изученным применением MSCS является GVHD, осложнение гемопоэтической трансплантации стволовых клеток. В 2004 году 9-летний мальчик с тяжелой устойчивой к лечению острого GVHD кишечника и печени лечился сторонним гаплоистентным MSC, полученным из матери. Клинические испытания фазы II у пациентов с стероид-резистентным тяжелым острого острой GVHD показали начальный уровень ответа на 70%, который не был связан с возрастом или соответствием HLA. Тем не менее, прочные полные ответы или другие первичные конечные точки в этих исследованиях все еще отсутствуют.
2. Болезнь Крона (CD) Первый отчет о клиническом испытании фазы I клеточной терапии с использованием аутологичных MSC, полученных из жировой, был опубликован в CD был опубликован в 2005 году. Локальная инъекция привела к заживлению фистулов (6/8) без побочных эффектов. Эти результаты были подтверждены одной и той же группой в 2009 году в многоцентроре фазы II в рандомизированном контролируемом исследовании [24]. В настоящее время проводится фаза III, многоцентровое, плацебо-контролируемое, рандомизированное и слепое исследование, чтобы оценить безопасность и эффективность аллогенных BM-MSC, проведенных Osiris Therapeutics. (http: //www.clinicaltrials. Gov/CT2/Show/NCT00482092).
3. Исследования фазы I/II рассеянного склероза (MS) у пациентов с рефрактерным РС подтвердили отсутствие побочных эффектов во время наблюдения (6-28 месяцев). Увеличение доли регуляторных Т -клеток CD4+ CD25+ с уменьшенными пролиферативными реакциями лимфоцитов и маркеров активации на дендритных клетках было обнаружено через несколько часов после трансплантации MSC. Пациенты улучшились по показателям визуальной функции, без признаков значительных побочных эффектов. Прогрессирование общей инвалидности также было снижено после лечения.
4. Системная волчанка Erythematosus (SLE), возможно, самые замечательные результаты терапии MSC человека в настоящее время возникают из клинических испытаний, предназначенных для тяжелых, лечебных рефрактерных SLE. Пациенты с активным заболеванием и нефритом волчанки, которые не реагировали на ежемесячный I.V. Циклофосфамид и пероральный преднизон (≥ 20 мг/день) показали улучшенные результаты при обработке MSC. Индекс активности заболевания (SLEDAI) у этих пациентов значительно улучшился при наблюдении за одним, шестью и двенадцатью месяцами, как и белок мочи. В некоторых исследованиях пациенты с высоким содержанием SLEDAI получали одну инфузию аллогенных BM-MSC от прохода 3-5 от не HLA, соответствующих здоровым членам семьи. Их последующее наблюдение достигло среднего уровня 17,2 (3-36) месяцев, без побочных эффектов, смерти или последовавших за GVHD. Удивительно, что 24-часовая протеинурия значительно снизилась уже через неделю после терапии MSC, даже предшествуя изменениям антител против DSDNA, что значительно снизилось через один месяц и три месяца после MSC. Т -регуляторные (TREG) клетки, которые были обнаружены количественно и качественно дефицитом в активном СКВ, были восстановлены на первой неделе, как оценивается по проценту клеток CD4+ FOXP3+ среди мононуклеарных клеток периферической крови. Другие испытания, хотя и с более коротким наблюдением, также демонстрируют значительное улучшение, подтвержденные для оценки SLEDAI, сывороточного альбумина, 24-часового белка, сывороточного креатинина, сывороточного комплемента и антител против DSDNA. Несомненно, терапия MSC должна быть дополнительно изучена в SLE.
5. Системный склероз (SS) SS представляет собой иммунное опосредованное заболевание с выдающимся сосудистым и микрососудистым компонентом, часто приводящим к ишемическим осложнениям. Поскольку MSC могут дифференцироваться в эндотелиальных клетках in vitro, а также участвовать в образовании кровеносных сосудов в тканях взрослых, сообщается о терапии как с аутологичными, так и с гаплоистенциальными донорами сторонних доноров, что приводит к достижению улучшения двух отдельных отчетов о случаях.
6. Поиск литературы по ревматоидным артриту (RA) показывает, что более чем ста доклинических исследований по модели животных RA и девять клинических испытаний пациентов с людьми были завершены при использовании терапии на основе MSC в RA и установлении ее безопасности и эффективности. Принимая во внимание, что девять клинических испытаний все еще продолжаются. У двух третей этих пациентов была использована одна доза аллогенных МСК в дозе между 1-10 x106/кг. Считается, что MSC нацелены на Т -клетки патогенных памяти и останавливают прогрессирование курса заболевания у пациентов с РА.
7. Полимиозит/дерматомиозит (PM/DM) Полимиозит/дерматомиозит (PM/DM) представляет собой аутоиммунное заболевание, характеризующееся слабостью проксимальных скелетных мышц и очевидных проявлений кожи, и, как известно, влияет на множественные органы, такие как мышцы, легкие и дети. В настоящее время этиология не известна. Несколько исследований показали, что клетки T-Helper (TH) участвуют в патогенезе PM/DM, поскольку клеточная дисфункция, связанная с TH, играет важную роль в возникновении и развитии PM или DM. Следовательно, MSCT может предоставить новую терапевтическую стратегию для лечения PM и DM. Несколько исследований показали, что этот подход имеет многообещающие клинические результаты. В другом исследовании 32 вечера и DM пациентам вводили внутривенно с MSC 1 × 106/кг. Результаты 9-летнего последующего исследования показали, что симптомы и серологические показатели пациентов улучшились, демонстрируя эффективность и безопасность MSCT в PM и DM, в то время как 11 пациентов погибли по причинам, не связанным с трансплантацией.

В другом исследовании 81 пациент с PM/DM были случайным образом разделены на две группы: 44 пациента в контрольной группе были индивидуально лечили глюкокортикоидами и иммуносупрессантами в течение 6 месяцев, в то время как 37 пациентов в группе трансплантации вводили внутривенно с 3,5-5,222,2. × 107 UC-MSCS. Результаты этого исследования показали, что значения креатин киназы в обеих группах были значительно снижены; Тем не менее, группа трансплантации имела лучшие результаты, чем контрольная группа в несколько временных точек, и функция легких была значительно улучшена в группе трансплантации. Один пациент умер после трансплантации, и никаких осложнений, связанных с трансплантацией, не произошло. В настоящее время существует только несколько исследований, изучающих PM/DM, и необходимы крупномасштабные и рандомизированные клинические исследования для оценки долгосрочной эффективности и безопасности MSCT у пациентов с PM/DM, включая риски опухолей и инфекций, а также оптимальную дозу и график трансплантации.

Поскольку клинический результат в случае отчетов и испытаний I-II фазы иногда поразительно поражает, существует острая необходимость для выполнения структурированных и предпочтительно контролируемых многоцентровых испытаний и результатов документов в нашей собственной популяции.