Zkouška Bezafibrátu při nedostatku CPT2

Mastné kyseliny jsou hlavním zdrojem energie pro neglukodependentní tkáně během půstu a dlouhodobého cvičení. Karnitin palmitoyltransferáza (CPT) 1 a 2 jsou klíčové enzymy v regulaci mitochondriální FAO tím, že řídí vstup mastných kyselin s dlouhým řetězcem do mitochondriální matrice. Nedostatek CPT2 patří mezi nejčastější dědičné poruchy mitochondriální oxidace mastných kyselin (FAO). Novorozenecké a kojenecké formy deficitu CPT2 jsou život ohrožující onemocnění s hepatokardiomuskulární prezentací. Dospělá forma se projevuje jako opakující se záchvaty rhabdomyolýzy, většinou spouštěné dlouhodobým cvičením, půstem a infekcemi, a je obvykle považována za „mírnou“ nemoc. Pacienti však běžně trpí trvalou svalovou slabostí a/nebo častými (týdně a někdy denně) atakami rhabdomyolýzy, které příležitostně vedou k těžkým epizodám akutní renální insuficience a vzácně k náhlé smrti.

Rozdíl v klinické závažnosti různých forem deficitu CPT2 do určité míry koreluje s údaji in vitro. Při měření ve fibroblastech nebo lymfocytech je tedy zbytková aktivita CPT2 a oxidace mastných kyselin s dlouhým řetězcem (LCFAO) obvykle nižší než 10 % kontrolních hodnot u novorozenecké a infantilní formy, zatímco nejčastěji jsou nad 20 % kontrolních hodnot. v dospělé podobě.

Klinický management pacientů s deficitem CPT2 zůstává špatný a většinou se mu nedaří významně zlepšit jejich klinický stav. Léčba zatím většinou spoléhá na omezení příjmu lipidů a omezení hladovění a cvičení. Před několika lety jsme se rozhodli vytvořit projekt farmakologické terapie tohoto onemocnění, založeného na in vitro testování farmakologických látek potenciálně schopných zvýšit reziduální enzymatickou aktivitu v CPT2-deficientních buněčných liniích. Některé z nejlepších „kandidátských“ léků byly agonisté PPAR, používané již více než dvě desetiletí jako hypolipidemické léky. PPAR alfa je transkripční faktor patřící do nadrodiny steroidních tyreoidálních jaderných receptorů, u kterého bylo prokázáno, že reguluje konstitutivní expresi genu CPT2 a proteinu v srdci a játrech dospělých myší a zprostředkovává up-regulaci genu CPT2 v reakce na fibráty v myších játrech. Nedávno jsme ukázali, že bezafibrát, agonista PPAR alfa, byl schopen obnovit téměř normální zjevnou aktivitu CPT2 a LCFAO jak ve fibroblastech, tak v kultivovaných myoblastech od několika pacientů s dospělou formou deficitu CPT2. Účelem této přihlášky je proto in vivo testovat potenciálně prospěšný účinek terapie bezafibrátem na kohortě 12 pacientů s dospělou formou tohoto onemocnění. Všichni pacienti jsou klinicky řízeni některou ze 2 výzkumných skupin zapojených do tohoto projektu, jmenovitě neurologickým oddělením nemocnice l'hospital Pitié-Salpétrière a oddělením genetiky nemocnice l'necker-Enfants Malades. Pacienti splňující kritéria pro zařazení budou nejprve podrobeni 6měsíčnímu klinickému a biologickému průzkumu s písemnou registrací všech klinických příznaků a měřením aktivity CK jednou měsíčně. Úvodní vyšetření bude zahrnovat i) svalové testování, ii) měření aktivity CPT2, LCFAO a kvantifikaci transkriptů CPT2 jak v lymfocytech, tak v čerstvém malém vzorku kosterního svalu, a iii) stanovení acylkarnitinů, sloučeniny akumulované před metabolický blok v krvi. Bezafibrát bude poté podáván denně v dávce 400 až 600 mg, podle funkce ledvin, po dobu 6 měsíců. Sledování bude zaměřeno na svalovou symptomatologii a na jaterní, svalovou a renální toleranci léčby. Na konci klinické studie bude každý pacient podroben vyšetření podobnému prvnímu, včetně druhé svalové biopsie použité pro měření aktivity CPT2, LCFAO a množství transkriptů CPT2. Je třeba zdůraznit, že poprvé by taková terapie měla mít přímý dopad na příčinu onemocnění (defektní enzymatickou aktivitu), nikoli pouze na její důsledky (akumulace buněčných lipidů a porucha tvorby energie).