Badanie bezafibratu w niedoborze CPT2

Kwasy tłuszczowe są głównym źródłem energii dla tkanek nieglukozależnych podczas postu i długotrwałego wysiłku fizycznego. Palmitoilotransferaza karnityny (CPT) 1 i 2 są kluczowymi enzymami w regulacji mitochondrialnego FAO, regulując wejście długołańcuchowych kwasów tłuszczowych do macierzy mitochondrialnej. Niedobór CPT2 należy do najczęstszych dziedzicznych zaburzeń mitochondrialnego utleniania kwasów tłuszczowych (FAO). Noworodkowe i niemowlęce formy niedoboru CPT2 są chorobami zagrażającymi życiu z objawami wątrobowo-sercowo-mięśniowymi. Postać dorosła objawia się nawracającymi atakami rabdomiolizy, najczęściej wywoływanymi długotrwałym wysiłkiem fizycznym, postem i infekcjami, i jest zwykle uważana za chorobę „łagodną”. Jednak pacjenci często cierpią na trwałe osłabienie mięśni i/lub częste (cotygodniowe, a czasami codzienne) napady rabdomiolizy, które czasami prowadzą do ciężkich epizodów ostrej niewydolności nerek, a rzadko do nagłej śmierci.

Różnica w ciężkości klinicznej różnych postaci niedoboru CPT2 koreluje w pewnym stopniu z danymi in vitro. Tak więc, mierzone w fibroblastach lub limfocytach, resztkowa aktywność CPT2 i oksydacja długołańcuchowych kwasów tłuszczowych (LCFAO) są zwykle mniejsze niż 10% wartości kontrolnych u noworodków i niemowląt, podczas gdy najczęściej przekraczają 20% wartości kontrolnych w postaci dorosłej.

Postępowanie kliniczne z pacjentami z niedoborem CPT2 pozostaje złe i najczęściej nie prowadzi do znaczącej poprawy ich stanu klinicznego. Dotychczasowe leczenie polega głównie na ograniczeniu spożycia lipidów oraz ograniczeniu postu i wysiłku fizycznego. Kilka lat temu zdecydowaliśmy się rozpocząć projekt terapii farmakologicznej tej choroby, opartej na testach in vitro środków farmakologicznych potencjalnie zdolnych do zwiększenia resztkowej aktywności enzymatycznej w liniach komórkowych z niedoborem CPT2. Jednymi z najlepszych leków „kandydatów” byli agoniści PPAR, stosowani od ponad dwóch dekad jako leki hipolipidemiczne. PPAR alfa jest czynnikiem transkrypcyjnym należącym do nadrodziny steroidowo-tarczycowych receptorów jądrowych, który, jak wykazano, reguluje konstytutywną ekspresję genu i białka CPT2 w sercu i wątrobie dorosłej myszy oraz pośredniczy w regulacji w górę genu CPT2 w odpowiedź na fibraty w wątrobie myszy. Niedawno wykazaliśmy, że bezafibrat, agonista PPAR alfa, był w stanie przywrócić blisko normalnej pozorną aktywność CPT2 i LCFAO zarówno w fibroblastach, jak i hodowanych mioblastach od kilku pacjentów z dorosłą postacią niedoboru CPT2. Dlatego celem obecnego wniosku jest przetestowanie in vivo potencjalnie korzystnego efektu terapii bezafibratem w kohorcie 12 pacjentów z dorosłą postacią tej choroby. Wszyscy pacjenci są klinicznie zarządzani przez jedną z 2 grup badawczych zaangażowanych w ten projekt, a mianowicie oddział neurologii l'hospital Pitié-Salpétrière i oddział genetyki l'hospital Necker-Enfants Malades. Pacjenci spełniający kryteria włączenia zostaną najpierw poddani 6-miesięcznemu okresowi badania klinicznego i biologicznego, z pisemną rejestracją każdego objawu klinicznego i pomiarem aktywności CK raz w miesiącu. Wstępne badanie będzie obejmowało i) badanie mięśni, ii) pomiar aktywności CPT2, LCFAO oraz oznaczenie ilościowe transkryptów CPT2 zarówno w limfocytach, jak iw świeżej małej próbce mięśnia szkieletowego, oraz iii) oznaczenie acylokarnityn, związku gromadzącego się przed blok metaboliczny we krwi. Następnie bezafibrat będzie podawany codziennie w dawce od 400 do 600 mg, w zależności od czynności nerek, przez 6 miesięcy. Obserwacja będzie koncentrować się na objawach mięśniowych oraz wątrobowej, mięśniowej i nerkowej tolerancji leczenia. Na koniec badania klinicznego każdy pacjent zostanie poddany badaniu podobnemu do pierwszego, w tym drugiej biopsji mięśnia służącej do pomiaru aktywności CPT2, LCFAO oraz ilości transkryptów CPT2. Należy podkreślić, że po raz pierwszy taka terapia powinna oddziaływać bezpośrednio na przyczynę choroby (nieprawidłową aktywność enzymatyczną), a nie tylko jej skutki (nagromadzenie lipidów komórkowych i wadliwe wytwarzanie energii).