Vakcinace zralými dendritickými buňkami ligandem Toll-like Receptor (TLR) u pacientů s melanomem

1. Odůvodnění

   Imunoterapie využívající ex vivo generované a tumor-antigenem nabité dendritické buňky (DC) byla nyní úspěšně zavedena na kliniku. Byl pozorován omezený, ale konzistentní počet objektivních imunologických a klinických odpovědí. Dosud zůstává nejasné, proč někteří pacienti reagují a jiní ne, ale panuje všeobecná shoda, že současné protokoly aplikované ke generování DC nemusí vést k indukci optimální Th1 odpovědí. My a další jsme prokázali, že zrání DC je jedním z klíčových faktorů nejen pro účinnou migraci DC, ale také pro indukci účinných protinádorových imunitních reakcí u pacientů s rakovinou. V současnosti se „zlatý standard“ používaný ke zrání DC skládá z koktejlu prozánětlivých cytokinů (IL-1beta, IL-6, TNFalfa) a prostaglandinu E2 (PGE2). Nedávná data myší však ukázala, že zrání DC pouze prozánětlivými cytokiny poskytlo DC, které podporovalo klonální expanzi T buněk, ale nedokázalo účinně řídit diferenciaci efektorových T buněk. Je zajímavé, že DC zralé v přítomnosti ligandů Toll like receptor (TLR) byly schopny indukovat plnou funkci efektoru T buněk a rozpoutat silnější imunitní reakce. Nedávno jsme identifikovali vakcíny proti infekčním onemocněním, které obsahují TLR ligandy a jsou schopné vyvolat zrání DC. Tyto znalosti poskytují novou aplikaci pro tyto klinicky použitelné látky: klinické stimulátory DC. Je vyvinut protokol klinického zrání DC, ve kterém jsou kombinovány ligandy TLR (preventivní vakcíny) a PGE2, což vedlo ke vzniku zralých DC, které vylučují vysoké hladiny klíčového cytokinu IL-12. Navíc tyto TLR-ligandy zralé DC indukované T buňky secernující alespoň 20krát vyšší hladiny efektorových cytokinů IFNalfa a TNFalfa ve srovnání s DC zralými v nepřítomnosti TLR ligandů. Závěrem lze říci, že tato data in vitro ukazují, že zralé DC s TLR-ligandem jsou slibnými kandidáty na zlepšení imunologických a klinických odpovědí v imunoterapii rakoviny.

2. Cíle

   Jedná se o průzkumnou studii, která se skládá ze dvou částí. V části I se provádí eskalace dávky a primárním cílem je bezpečnost různých dávek TLR-DC. V části II bude vakcinace TLR-DC srovnávána s vakcinací DC zralými cytokiny a primárním cílem této části je imunologická odpověď na vakcinaci TLR-DC, přičemž toxicita a klinická účinnost jsou sekundárními cíli. Tyto studie poskytnou důležitá data o bezpečnosti a imunologických účincích DC zralých TLR.

3. Studovat design

   Tato studie je otevřená prospektivní explorativní intervenční studie.

4. Studijní populace

   Naše studijní populace se skládá z HLA-A2.1 pozitivních pacientů s melanomem, s prokázanou expresí nádorových antigenů spojených s melanomem gp100 a tyrosinázy. Pacienti s melanomem s metastázami do regionálních lymfatických uzlin, u kterých je plánována nebo provedena radikální disekce lymfatických uzlin do 2 měsíců od zařazení do této studie (dále označované jako stadium III) a pacienti s melanomem s měřitelnými vzdálenými metastázami (dále označovaní jako stadium IV), budou být zahrnut.

5. Hlavní cíle studie

Primárními cíli studie je prozkoumat toxicitu TLR-DC eskalací dávky čísel DC v části I a prozkoumat imunologické reakce na vakcinaci TLR-DC v části II studie.

Imunologické odpovědi jsou:

1. Migrační kapacita TLR-ligandu vyzrála DC in vivo.
2. Aktivace imunitních buněk in vivo.
3. Imunologická odpověď indukovaná TLR-ligandem zralých DC naložených mRNA kódující nádorové antigeny spojené s melanomem (gp100 a tyrosináza).

Bezpečnost a klinická účinnost jsou sekundárními cíli.