Vaccinazione con cellule dendritiche maturate con ligando del recettore Toll-like (TLR) in pazienti affetti da melanoma

1. Fondamento logico

   L'immunoterapia che applica cellule dendritiche (DC) generate ex vivo e caricate con antigeni tumorali è stata ora introdotta con successo nella clinica. È stato osservato un numero limitato, ma consistente, di risposte immunologiche e cliniche oggettive. Finora non è chiaro perché alcuni pazienti rispondano e altri no, ma vi è un consenso generale sul fatto che gli attuali protocolli applicati per generare DC potrebbero non portare all'induzione di risposte Th1 ottimali. Noi e altri abbiamo dimostrato che la maturazione delle DC è uno dei fattori cruciali, non solo per un'efficace migrazione delle DC, ma anche per indurre risposte immunitarie antitumorali efficaci nei pazienti oncologici. Attualmente, il "gold standard" utilizzato per far maturare le DC è costituito da un cocktail di citochine pro-infiammatorie (IL-1beta, IL-6, TNFalfa) e prostaglandina E2 (PGE2). Dati recenti sui topi hanno dimostrato, tuttavia, che la maturazione delle DC da parte esclusivamente di citochine pro-infiammatorie produceva DC che supportavano l'espansione clonale delle cellule T, ma non riuscivano a dirigere in modo efficiente la differenziazione delle cellule T effettrici. È interessante notare che le DC maturate in presenza di ligandi del recettore Toll like (TLR) sono state in grado di indurre la piena funzione effettrice delle cellule T e scatenare risposte immunitarie più potenti. Abbiamo recentemente identificato vaccini contro malattie infettive che contengono ligandi TLR e sono in grado di indurre la maturazione delle DC. Questa conoscenza fornisce una nuova applicazione per questi agenti clinici applicabili: stimolatori DC di grado clinico. È stato sviluppato un protocollo di maturazione DC di grado clinico in cui i ligandi TLR (vaccini preventivi) e PGE2 sono combinati, il che ha portato alla generazione di DC mature che secernono alti livelli della citochina chiave IL-12. Inoltre, queste cellule T indotte da DC maturate con ligando TLR secernono livelli almeno 20 volte superiori delle citochine effettrici IFNalpha e TNFalpha rispetto alle DC maturate in assenza di ligandi TLR. In conclusione, questi dati in vitro dimostrano che le DC maturate con ligando TLR sono candidati promettenti per migliorare le risposte immunologiche e cliniche nell'immunoterapia del cancro.

2. Obiettivi

   Questo è uno studio esplorativo, composto da due parti. Nella parte I viene eseguita un'escalation della dose e l'obiettivo primario è la sicurezza di diverse dosi di TLR-DC. Nella parte II la vaccinazione TLR-DC sarà confrontata con la vaccinazione DC maturata con citochine e l'obiettivo primario di questa parte è la risposta immunologica alla vaccinazione TLR-DC, con la tossicità e l'efficacia clinica come obiettivi secondari. Questi studi forniranno dati importanti sulla sicurezza e sugli effetti immunologici delle DC maturate con TLR.

3. Progettazione dello studio

   Questo studio è uno studio di intervento esplorativo prospettico in aperto.

4. Popolazione di studio

   La nostra popolazione di studio è composta da pazienti affetti da melanoma HLA-A2.1 positivi, con comprovata espressione di antigeni tumorali associati al melanoma gp100 e tirosinasi. I pazienti con melanoma con metastasi linfonodali regionali in cui è pianificata o eseguita una dissezione linfonodale radicale entro 2 mesi dall'inclusione in questo studio (di seguito denominato stadio III) e i pazienti con melanoma con metastasi a distanza misurabili (di seguito denominato stadio IV) lo faranno essere incluso.

5. Principali endpoint dello studio

Gli obiettivi primari dello studio sono indagare la tossicità di TLR-DC mediante aumento della dose dei numeri di DC nella parte I e indagare le risposte immunologiche alla vaccinazione TLR-DC nella parte II dello studio.

Le risposte immunologiche sono:

1. La capacità migratoria del ligando TLR è maturata DC in vivo.
2. L'attivazione delle cellule immunitarie in vivo.
3. La risposta immunologica indotta con il ligando TLR è maturata DC caricata con mRNA che codifica antigeni tumorali associati al melanoma (gp100 e tirosinasi).

La sicurezza e l'efficacia clinica sono obiettivi secondari.