Vliv suplementace vitaminu D na hyperreaktivitu krevních destiček související s HIV

Metody Parametry studie/koncové body

V této studii jsou použity dva parametry studie:

1. Reaktivita krevních destiček, vyjádřená jako membránová exprese aktivačních markerů krevních destiček CD62P (P-selektin) a vazba fibrinogenu na integrin aIIbp3, na stimulaci se zvyšující se koncentrací agonistů krevních destiček ADP.
2. Komplexy krevních destiček a monocytů.

Studijní postupy

A. Zařazování pacientů Během plánované rutinní návštěvy polikliniky ošetřující internista identifikuje pacienty splňující kritéria pro zařazení. Pacientovi vysvětlí pozadí a cíle studie. V případě, že se pacienti rozhodnou zúčastnit se, bude pak požádán, aby si přečetl a podepsal formulář informovaného souhlasu.

Žilní krev (tři zkumavky po 3 ml) se poté odebere pro účely studie při zápisu a po třech měsících doplnění pro:

1. Hladina 25-hydroxyvitamínu D (3 ml séra)
2. Destičkové testy, jak je specifikováno výše (3 ml CTAD)
3. Úplný krevní obraz a buňky CD4 (3 ml EDTA) V mnoha případech to nebude vyžadovat extra venepunkci, protože krev se obvykle odebírá pro plánovanou analýzu krve pro rutinní klinickou péči během pravidelných návštěv na poliklinice.

Měření a analýza sestávají z hladiny 25-hydroxyvitamínu D, reaktivity krevních destiček a komplexů krevních destiček a monocytů, když se pacienti účastní studie. Účastníci studie obdrží 180 měkkých gelových tobolek cholekalciferolu, které se užívají 2 tobolky jednou denně po dobu 90 dnů, jak je uvedeno výše.

Jak je uvedeno výše, druhý krevní rozbor proběhne o tři měsíce později po dokončení suplementace vitaminem D.

b. Odběr vzorků krve pro analýzu hladiny vitaminu D Při aplikaci venepunkce pro rutinní měření CD4+ se odeberou až 3 ml další krve. Odebraná krev se skladuje pomocí zkumavky na sérum s červeným vrchem bez antikoagulantu. K tomu dojde při zápisu (den 0) a po 3 měsících suplementace vitaminem D. Každý den odběru krve jsou odebrané zkumavky dočasně skladovány v boxu s mokrým ledem před přenesením do laboratoře k analýze vitaminu D. Na konci dne polikliniky jsou všechny zkumavky přeneseny do laboratoře k separaci séra. Poté se separované sérum uloží, takže měření 25-hydroxyvitamínu D lze provést později. Všechny vzorky jsou analyzovány na měření 25-hydroxyvitamínu D a také na měření dalších metabolitů vitaminu D, jako je měření volného 25-hydroxyvitamínu D. Takovou analýzu nelze provést v Indonésii, a proto budou vzorky za tímto účelem odeslány do Nizozemska.

C. Odběr vzorků krve pro analýzu funkce krevních destiček Jak je specifikováno v parametrech studie výše, analýza funkce krevních destiček může být provedena z jedné 3ml zkumavky s citrátem antikoagulovanou krví. K tomu dojde při zápisu (den 0) a po 3 měsících suplementace vitaminem D. Každá odebraná krev od pacienta je zkumavka přímo přenesena do laboratoře pro funkci krevních destiček do 30 minut.

d. Kompletní krevní obraz a měření buněk CD4 Tato měření jsou součástí rutinní péče a budou prováděna v běžné hematologické laboratoři s použitím 3 ml krve EDTA.