Die Wirkung einer Vitamin-D-Ergänzung auf die HIV-assoziierte Blutplättchen-Hyperreaktivität

Methoden Studienparameter/Endpunkte

In dieser Studie werden zwei Studienparameter angewendet:

1. Die Thrombozytenreaktivität, ausgedrückt als Membranexpression der Thrombozytenaktivierungsmarker CD62P (P-Selectin) und Fibrinogenbindung an Integrin αIIbβ3, zur Stimulation mit steigender Konzentration des Thrombozytenagonisten ADP.
2. Plättchen-Monozyten-Komplexe.

Studienablauf

A. Aufnahme von Patienten Während eines geplanten Routinebesuchs in der Poliklinik wird der behandelnde Internist die Patienten identifizieren, die die Einschlusskriterien erfüllen. Er/sie wird dem Patienten den Hintergrund und die Ziele der Studie erläutern. Falls sich Patienten für eine Teilnahme entscheiden, wird der Patient dann gebeten, die Einwilligungserklärung zu lesen und zu unterschreiben.

Venöses Blut (drei Röhrchen mit je 3 ml) wird dann zu Studienzwecken bei der Einschreibung und nach drei Monaten zur Ergänzung entnommen für:

1. 25-Hydroxyvitamin D-Spiegel (3 ml Serum)
2. Thrombozytenassays wie oben angegeben (3 ml CTAD)
3. Vollständiges Blutbild und CD4-Zellen (3 ml EDTA) In vielen Fällen ist hierfür keine zusätzliche Venenpunktion erforderlich, da Blut normalerweise für geplante Blutanalysen für die routinemäßige klinische Versorgung während regelmäßiger Besuche in der Poliklinik entnommen wird.

Messungen und Analysen bestehen aus dem 25-Hydroxyvitamin-D-Spiegel, der Thrombozytenreaktivität und den Thrombozyten-Monozyten-Komplexen, wenn die Patienten an der Studie teilnehmen. Die Studienteilnehmer erhalten 180 Weichgel-Cholecalciferol-Kapseln, die 90 Tage lang wie oben angegeben einmal täglich 2 Kapseln einzunehmen sind.

Wie bereits erwähnt, findet die zweite Blutanalyse drei Monate später nach Abschluss der Vitamin-D-Supplementierung statt.

B. Entnahme von Blutproben für die Analyse des Vitamin-D-Spiegels Während der Venenpunktion zur routinemäßigen CD4+-Messung werden bis zu 3 ml zusätzliches Blut entnommen. Das gesammelte Blut wird in einem Serumröhrchen mit rotem Deckel ohne Antikoagulans aufbewahrt. Dies erfolgt bei der Einschreibung (Tag 0) und nach 3 Monaten Vitamin-D-Supplementierung. An jedem Tag der Blutentnahme werden die entnommenen Röhrchen vorübergehend in einer Nasseisbox gelagert, bevor sie zur Vitamin-D-Analyse ins Labor gebracht werden. Am Ende des Tages in der Poliklinik werden alle Röhrchen zur Serumtrennung ins Labor gebracht. Anschließend wird das abgetrennte Serum aufbewahrt, damit später 25-Hydroxyvitamin-D-Messungen durchgeführt werden können. Alle Proben werden auf 25-Hydroxyvitamin-D-Messungen sowie auf andere Vitamin-D-Metaboliten wie freies 25-Hydroxyvitamin-D-Messungen analysiert. Eine solche Analyse kann in Indonesien nicht durchgeführt werden und daher werden Proben zu diesem Zweck in die Niederlande versandt.

C. Entnahme von Blutproben für die Thrombozytenfunktionsanalyse Wie oben unter den Studienparametern angegeben, kann die Thrombozytenfunktionsanalyse aus einem mit Citrat antikoagulierten 3-ml-Blutröhrchen durchgeführt werden. Dies erfolgt bei der Einschreibung (Tag 0) und nach 3 Monaten Vitamin-D-Supplementierung. Bei jeder Blutentnahme des Patienten wird das Röhrchen innerhalb von 30 Minuten direkt ins Labor zur Thrombozytenfunktion überführt.

D. Vollblutbild und CD4-Zellmessungen Diese Messungen gehören zur Routineversorgung und werden im hämatologischen Routinelabor mit 3 ml EDTA-Blut durchgeführt.