Effekten av vitamin D-tillskott på HIV-associerad blodplättshyperreaktivitet

Metoder Studieparametrar/endpoints

Det finns två studieparametrar som tillämpas i denna studie:

1. Trombocytreaktivitet, uttryckt som membranuttrycket av trombocytaktiveringsmarkörerna CD62P (P-selektin) och fibrinogenbindning till integrin αIIbβ3, till stimulering med ökande koncentration av trombocytagonister ADP.
2. Trombocyt-monocytkomplex.

Studieprocedurer

a. Inskrivning av patienter Under ett schemalagt rutinbesök på polikliniken kommer den behandlande internläkaren att identifiera patienter som uppfyller inklusionskriterierna. Han/hon kommer att förklara bakgrunden och syftet med studien för patienten. Om patienter väljer att delta kommer patienten att bli ombedd att läsa och underteckna formuläret för informerat samtycke.

Venöst blod (tre rör på 3 ml vardera) kommer sedan att tas i studiesyfte vid inskrivning och efter tre månaders tillskott för:

1. 25-hydroxivitamin D nivå (3 ml serum)
2. Trombocytanalyser enligt ovan (3 ml CTAD)
3. Fullt blodantal och CD4-celler (3 ml EDTA) I många fall kommer detta inte att kräva en extra venpunktion eftersom blod vanligtvis samlas in för planerad blodanalys för rutinmässig klinisk vård vid regelbundna poliklinikbesök.

Mätningar och analys består av 25-hydroxivitamin D-nivå, trombocytreaktivitet och trombocyt-monocytkomplex kommer att göras när patienterna deltar i studien. Studiedeltagarna kommer att få 180 mjuka gelkolekalciferolkapslar, som ska tas 2 kapslar en gång om dagen i 90 dagar enligt ovan.

Som nämnts ovan kommer den andra blodanalysen att ske tre månader senare efter att D-vitamintillskottet är avslutat.

b. Samling av blodprover för analys av vitamin D-nivå Så mycket som 3 ml extra blod tas ut medan venpunktion appliceras för rutinmässig CD4+-mätning. Uppsamlat blod lagras med röd toppserumrör utan antikoagulant. Detta kommer att ske vid inskrivning (dag 0) och efter 3 månaders D-vitamintillskott. Varje dag av bloduttag förvaras de uppsamlade rören tillfälligt i våt-isad låda innan de överförs till laboratoriet för D-vitaminanalys. I slutet av poliklinikdagen överförs alla rör till laboratoriet för serumseparation. Sedan lagras separerat serum så att 25-hydroxivitamin D-mätningar kan göras senare. Alla prover analyseras för 25-hydroxivitamin D-mätningar samt andra vitamin D-metaboliter som fria 25-hydroxivitamin D-mätningar. Sådan analys kan inte göras i Indonesien och därför kommer prover att skickas till Nederländerna för detta ändamål.

c. Samling av blodprover för blodplättsfunktionsanalys Som specificerats under studieparametrarna ovan kan blodplättsfunktionsanalys utföras från ett 3 ml citrat-antikoagulerat blodrör. Detta kommer att ske vid inskrivning (dag 0) och efter 3 månaders D-vitamintillskott. Varje uttaget blod från patienten överförs röret direkt till laboratoriet för trombocytfunktion inom 30 minuter.

d. Fullt blodantal och CD4-cellsmätningar Dessa mätningar är en del av rutinvården och kommer att göras i det rutinmässiga hematologiska laboratoriet med 3 ml EDTA-blod.