Vliv WNT4 VEZT FSHB a SIRT1 SNP na endometriózu: případová kontrolní studie sardinské populace

Endometrióza je benigní estrogen-dependentní onemocnění charakterizované přítomností endometriální tkáně v jejích žlázových a stromálních složkách v jiných místech než v děložní dutině. Představuje jedno z nejčastějších gynekologických, chronických zánětlivých onemocnění žen v reprodukčním věku, které postihuje přibližně 10 % ženské populace, i když tento odhad může být nižší než skutečná data s ohledem na heterogenitu klinických projevů onemocnění a tendenci k proto být poddiagnostikován . Endometrióza je často spojena s neplodností a symptomatologií silné bolesti včetně chronické pánevní bolesti, dyspareunie a dysmenorey. Přes četné studie je patogeneze onemocnění stále neznámá. Studie o rodinné agregaci a dvojčatech daly do popředí genetickou složku a ukázaly, jak genetická struktura zděděná od jednotlivce ovlivňuje 51 % predispozice k rozvoji endometriózy v životě. Velké množství práce zahrnovalo identifikaci různých genových polymorfismů schopných pomoci vysvětlit náchylnost k rozvoji endometriózy, často s protichůdnými výsledky. Genomové asociační studie (GWAS) a související metaanalýzy vedly k identifikaci rizikových lokusů onemocnění tím, že poskytly nové poznatky o potenciálních molekulárních drahách zapojených do endometriózy. V současnosti je s endometriózou platně spojeno 19 nezávislých jednonukleotidových polymorfismů (SNP), které vysvětlují 5,19 % variance onemocnění. Zejména nedávná studie zkoumala tři z těchto SNP na řecké populaci: rs7521902, rs10859871 a rs11031006 , mapované v tomto pořadí na genech WNT4, VEZT a FSHB, zdůrazňující významnou souvislost s endometriózou. Gen WNT4, umístěný na chromozomu 1, kóduje základní protein ve vývoji ženského reprodukčního systému. Exprese WNT4 byla také prokázána na úrovni normální pobřišnice, což naznačuje možnou metaplastickou hypotézu při podpoře transformace peritoneálních buněk na endometriotické buňky pomocí drah zapojených do vývoje ženských pohlavních orgánů. Kromě toho je WNT4 rovnoměrně exprimován v eutopickém endometriu během proliferativní a sekreční fáze; varianty tohoto genu by mohly hypoteticky přispívat k abnormálnímu růstu endometriálních buněk v ektopických místech. VEZT je gen lokalizovaný na chromozomu 12 a kódující vezatin, důležitou složku kadherin-kateninového komplexu, který je nezbytný pro tvorbu a udržování adherentních kloubů. Protein je exprimován ve většině epiteliálních buněk a je rozhodující pro tvorbu kontaktních spojení buňka-buňka. Exprese VEZT je změněna v endometriu pacientek s endometriózou a je vynikajícím kandidátem na kauzální roli v endometrióze. Zejména polymorfismus rs10859871 byl spojen se zvýšením exprese tohoto genu. Gen FSHB, umístěný na chromozomu 11, kóduje pro hormon specifickou podjednotku b stimulujícího folikulárního hormonu (FSH), klíčový promotor ovariálního folikulu. růst a produkci estrogenu. Rozšířený GWAS skupiny Sapkota identifikuje významnou souvislost mezi polymorfismem rs11031006 a rizikem endometriózy.

Metabolomický profil u pacientek postižených endometriózou identifikoval beta-hydroxybutyrát (bOHB) jako významně zvýšený metabolit u postižených pacientek. bOHB je ketonické těleso, které funguje jako nosič energie z adipocytů do periferních tkání. Hraje však heterogenní roli v buněčné signalizaci a regulaci genové exprese. Několik enzymů zapojených do tvorby ketolátek z lipidů je jak acetylovaných, tak sukcinylovaných a cílí na skupinu proteinů enzymatické aktivity, které působí jako NAD-dependentní deacylázy: sirtuiny. Sirtuiny byly nedávno studovány pro jejich zapojení do oblasti ženských reprodukčních funkcí. Mezi nimi sirtuin 1, SIRT1, působí jako histon-deacetyláza a je zapojen do nesčetných jevů, jako je regulace genové transkripce, stárnutí, stresová odolnost, apoptóza, energetická účinnost. Kromě toho hraje SIRT1 důležitou roli při regulaci exprese zánětlivých cytokinů v endometriotických stromálních buňkách. Gen SIRT1, lokalizovaný na chromozomu 10, je nadměrně exprimován v eutopickém endometriu žen s endometriózou a pravděpodobně se podílí na patogenezi endometriózy. SIRT1 řídí mimo jiné acetylaci vidličkového transkripčního faktoru zapojeného do metabolické syntézy ketolátek, FOXA2, který se zase účastní jevů proliferace a migrace endometriotických buněk. Některé SSP genu SIRT1 jsou spojeny s poškozením oxidačního stresu schopným vyvolat abnormální proliferaci endometriálních buněk (k endometrium).

Cílem studie je ověřit možnou souvislost mezi přítomností určitých polymorfismů genů, o nichž je známo, že mají hypotetickou roli v patogenezi endometriózy, a rozvojem tohoto onemocnění v populaci sardinského původu.

Studie bude provedena molekulární typizací následujících jednoduchých substitučních polymorfismů (SNP): rs7521902, rs10859871, rs11031006, rs2273773, mapovaných v genech WNT4, VEZT, FSHB a SIRT1.

V této práci bude popsána frekvence alel, genotypů a haplotypů těchto SNP u sardinských žen a bude zhodnocen jejich vliv na náchylnost k rozvoji endometriózy.

Molekulárně-biologické analýzy polymorfismů s jednou substitucí budou prováděny počínaje plnou krví odebranou s informovaným souhlasem výhradně pacientům ze Sardinie.

Výzkumníci se rozhodli omezit studii pouze na pacienty pocházející ze Sardinie, přičemž využili zvláštnosti této země, kterou lze považovat za genetický makroizolát. Genetická analýza komplexních znaků je ve skutečnosti zjednodušená v izolovaných populacích, jako je ta sardinská, ve kterých inbreeding a "zakládající efekt" snižují genetickou rozmanitost komplexních a polygenních onemocnění, jako je endometrióza, které lze tímto způsobem snadněji studovat. Cílem je identifikovat genetickou charakteristiku, kterou lze použít pro neinvazivní diagnostiku onemocnění