Influenza degli SNP WNT4 VEZT FSHB e SIRT1 nell'endometriosi: uno studio caso-controllo della popolazione sarda

L'endometriosi è una malattia benigna estrogeno-dipendente caratterizzata dalla presenza di tessuto endometriale nelle sue componenti ghiandolari e stromali in sedi diverse dalla cavità uterina. Rappresenta una delle malattie infiammatorie croniche ginecologiche più comuni delle donne in età riproduttiva, interessando circa il 10% della popolazione femminile, anche se questa stima può essere inferiore ai dati reali considerando l'eterogeneità delle manifestazioni cliniche della malattia e la tendenza a quindi essere sottodiagnosticato. L'endometriosi è spesso associata a infertilità e sintomatologia dolorosa grave, tra cui dolore pelvico cronico, dispareunia e dismenorrea. Nonostante numerosi studi, la patogenesi della malattia è ancora sconosciuta. Gli studi sull'aggregazione familiare e sui gemelli hanno dato risalto alla componente genetica, dimostrando come la struttura genetica ereditata da un individuo influenzi il 51% della predisposizione a sviluppare l'endometriosi nella vita. Un grande lavoro ha comportato l'identificazione di diversi polimorfismi genici in grado di aiutare a spiegare la suscettibilità allo sviluppo dell'endometriosi, spesso con risultati contrastanti. Gli studi di associazione sull'intero genoma (GWAS) e le relative meta-analisi hanno portato all'identificazione dei loci di rischio di malattia fornendo nuove informazioni sui potenziali percorsi molecolari coinvolti nell'endometriosi. Attualmente, 19 polimorfismi a singolo nucleotide (SNP) indipendenti sono stati validamente associati all'endometriosi, spiegando il 5,19% della varianza della malattia. , mappati rispettivamente sui geni WNT4, VEZT e FSHB, evidenziando una significativa associazione con l'endometriosi. Il gene WNT4, localizzato sul cromosoma 1, codifica per una proteina fondamentale nello sviluppo del sistema riproduttivo femminile. L'espressione di WNT4 è stata dimostrata anche a livello del peritoneo normale suggerendo una possibile ipotesi metaplastica nel promuovere la trasformazione delle cellule peritoneali in cellule endometriosiche utilizzando vie coinvolte nello sviluppo delle vie genitali femminili. Inoltre WNT4 è ugualmente espresso nell'endometrio eutopico durante le fasi proliferativa e secretoria; varianti di questo gene potrebbero ipoteticamente contribuire alla crescita anormale delle cellule endometriali nei siti ectopici. VEZT è un gene localizzato sul cromosoma 12 e codificante per la vezatina, un componente importante del complesso caderina-catenina, essenziale per la formazione e il mantenimento delle articolazioni aderenti. La proteina è espressa nella maggior parte delle cellule epiteliali ed è cruciale per la formazione delle giunzioni di contatto cellula-cellula. L'espressione di VEZT è alterata nell'endometrio di pazienti con endometriosi ed è un ottimo candidato per avere un ruolo causale nell'endometriosi. In particolare, il polimorfismo rs10859871 è stato associato ad un aumento dell'espressione di questo gene. Il gene FSHB, localizzato sul cromosoma 11, codifica per la subunità ormono-specifica b dell'ormone follicolo stimolante (FSH), un promotore chiave del follicolo ovarico crescita e produzione di estrogeni. Il GWAS esteso del gruppo Sapkota identifica un'associazione significativa tra il polimorfismo rs11031006 e il rischio di endometriosi.

Il profilo metabolomico nelle pazienti affette da endometriosi ha identificato il beta-idrossibutirrato (bOHB) come un metabolita significativamente aumentato nelle pazienti affette. Il bOHB è un corpo chetonico che funge da vettore energetico dagli adipociti ai tessuti periferici. Tuttavia, svolge un ruolo eterogeneo nella segnalazione cellulare e nella regolazione dell'espressione genica. Diversi enzimi coinvolti nella generazione di corpi chetonici dai lipidi sono sia acetilati che succinilati e prendono di mira un gruppo di proteine ​​ad attività enzimatica che agiscono come deacilasi NAD-dipendenti: le sirtuine. Le sirtuine sono state recentemente studiate per il loro coinvolgimento nel campo della funzione riproduttiva femminile. Tra queste, la sirtuina 1, SIRT1, agisce come istone-deacetilasi ed è implicata in innumerevoli fenomeni come la regolazione della trascrizione genica, l'invecchiamento, la resistenza allo stress, l'apoptosi, l'efficienza energetica. Inoltre, SIRT1 svolge un ruolo importante nella regolazione dell'espressione delle citochine infiammatorie nelle cellule stromali endometriosiche. Il gene SIRT1, localizzato sul cromosoma 10, è sovraespresso nell'endometrio eutopico delle donne con endometriosi ed è probabilmente coinvolto nella patogenesi dell'endometriosi. SIRT1 controlla tra l'altro l'acetilazione di un fattore di trascrizione fork coinvolto nella via metabolica di sintesi dei corpi chetonici, FOXA2, a sua volta coinvolto nei fenomeni di proliferazione e migrazione delle cellule endometriosiche. Alcuni SSP del gene SIRT1 sono associati a insulti da stress ossidativo in grado di indurre una proliferazione anomala delle cellule endometriali (k endometrio).

Lo studio si propone di verificare la possibile associazione tra la presenza di alcuni polimorfismi di geni noti per avere un ipotetico ruolo nella patogenesi dell'endometriosi e lo sviluppo di questa malattia nella popolazione di origine sarda.

Lo studio sarà condotto mediante tipizzazione molecolare dei seguenti polimorfismi a singola sostituzione (SNPs): rs7521902, rs10859871, rs11031006, rs2273773, mappati rispettivamente nei geni WNT4, VEZT, FSHB e SIRT1.

In questo lavoro verrà descritta la frequenza di alleli, genotipi e aplotipi di questi SNP tra le donne sarde e verrà valutato il loro impatto sulla suscettibilità allo sviluppo dell'endometriosi.

Le analisi biologico-molecolari dei polimorfismi a singola sostituzione verranno effettuate partendo da sangue intero, prelevato, previo consenso informato, a pazienti esclusivamente sardi.

I ricercatori hanno scelto di limitare lo studio ai soli pazienti originari della Sardegna, sfruttando la particolarità di questo terreno, che può essere considerato un macroisolato genetico. L'analisi genetica dei tratti complessi è infatti semplificata in popolazioni isolate come quella sarda, in cui la consanguineità e l'"effetto fondante" riducono la diversità genetica di malattie complesse e poligeniche come l'endometriosi che possono, in questo modo, essere studiate più facilmente. L'obiettivo è identificare una caratterizzazione genetica che possa essere utilizzata per la diagnosi non invasiva della malattia