Objev slinných biomarkerů pomocí Ramanovy spektroskopie u ALS (SalivALS) (SalivALS)

POZADÍ/ODŮVODNĚNÍ: Nedostatek biomarkerů pro diagnostiku a monitorování pacientů postižených amyotrofickou laterální sklerózou (ALS) je jedním z největších problémů klinik a výzkumu ALS. Pro diagnostiku ALS a sledování před a po léčbě se v současnosti používají fenotypové příznaky, elektrofyziologické testy a klinické škály. V dnešní době jsou diagnostika a diferenciální diagnostika používaná k rozlišení ALS od jiných srovnatelných neurodegenerativních onemocnění časově náročné a složité procesy, které zkracují čas pro rychlou intervenci. Vědecká komunita je tedy žádána, aby usilovala o nové, měřitelné, rychlé a objektivní biomarkery pro diagnostiku a stratifikaci pacientů. Sliny jsou komplexní biotekutina složená z bioaktivních molekul, které lze sbírat pomocí neinvazivního postupu. Možnost simultánně sledovat všechny variace endokrinních, elektrolytických a metabolických mediátorů ve slinách nedávno navrhla jeho použití pro diagnostiku komplexních onemocnění, jako jsou neurodegenerativní onemocnění, ale o potenciálu slin jako alternativního přenašeče ALS jsou k dispozici pouze omezené informace. biomarkery.

CÍLE: Cílem tohoto projektu je optimalizovat inovativní, neinvazivní a rychlý postup pro nástup ALS a pro stratifikaci pacientů s ALS s využitím citlivosti Ramanovy spektroskopie (RS) a dostupných slin. Předběžné výsledky Fondazione Don Gnocchi (FDG) na malé skupině subjektů prokázaly proveditelnost metodologie a schopnost protokolu LABION získat reprodukovatelný Ramanův otisk slin, který lze použít k rozlišení zdravých subjektů, pacientů s ALS a postižených subjektů jinými typy neurologických onemocnění.

METODY: Na základě předběžných výsledků FDG bude vyhodnoceno biochemické složení slin u pacientů s diagnostikovanou ALS a statisticky porovnáno se složením získaným od zdravých jedinců stejného věku a pohlaví a od pacientů postižených jinými neurologickými onemocněními (Parkinsonova a Alzheimerova choroba). . Kromě toho bude analyzováno shlukování ALS v rámci skupiny, aby se ověřil odlišný Ramanův otisk získaný od pacientů s ALS s bulbárním nebo spinálním začátkem. Shromážděná Ramanova data budou zpracována pomocí přístupu vícerozměrné analýzy prostřednictvím analýzy hlavních složek – lineární diskriminační analýzy (PCA-LDA). Klasifikační model bude vytvořen pomocí křížové validace a validace podmnožin. Díky RS bude celkové složení slin stanoveno s minimální přípravou vzorku, což poskytuje komplexní biochemický otisk vzorku. Paralelně budou měřeny rutinní parametry slin včetně viskozity, pH, koncentrace celkových bílkovin a sacharidů, amylázy a pepsinu, kortizolu a chromograninu A.

OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY: Na konci této studie výzkumníci očekávali, že ověří možnost použít Ramanův vzor slin jako nový slibný biomarker pro diagnostiku a progresi ALS, který bude souviset s klinickými stupnicemi pro personalizované a jemné doladění terapeutického přístupu. Záměrem tohoto projektu je vytvořit klasifikační model schopný:

1. Určete nástup ALS
2. Rozlišit signál získaný od pacientů s ALS od signálu získaného od jiných neurodegenerativních onemocnění
3. Stratifikujte pacienty s ALS na bulbární a spinální začátek
4. Porovnejte Ramanova data s klinickými a paraklinickými stupnicemi, které se v současnosti používají pro diagnostiku a monitorování ALS