Descoberta de Biomarcadores Salivares por Espectroscopia Raman em ELA (SalivALS) (SalivALS)

JUSTIFICATIVA: A escassez de biomarcadores para o diagnóstico e monitoramento de pacientes afetados pela Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA) é uma das maiores preocupações nas clínicas e pesquisas de ELA. Sinais fenotípicos, testes eletrofisiológicos e escalas clínicas são atualmente utilizados para o diagnóstico de ELA e acompanhamento antes e após tratamentos. Hoje em dia, o diagnóstico e o diagnóstico diferencial usados ​​para discriminar a ELA de outras doenças neurodegenerativas comparáveis ​​são processos demorados e complexos que reduzem o tempo para uma intervenção imediata. Assim, pede-se à comunidade científica que se esforce por novos biomarcadores mensuráveis, rápidos e objetivos para o diagnóstico e estratificação de pacientes. A saliva é um biofluido complexo composto por moléculas bioativas que podem ser coletadas por meio de um procedimento não invasivo. A possibilidade de monitorar simultaneamente todas as variações nos mensageiros endócrinos, eletrolíticos e metabólicos na saliva recentemente sugeriu seu uso para o diagnóstico de doenças complexas, como doenças neurodegenerativas, mas apenas informações limitadas estão disponíveis sobre o potencial da saliva como portador alternativo de ELA biomarcadores.

OBJETIVOS: O objetivo do presente projeto é otimizar um procedimento inovador, não invasivo e rápido para o início da ELA e para a estratificação de pacientes com ELA, aproveitando a sensibilidade da Espectroscopia Raman (RS) e da saliva acessível. Os resultados preliminares da Fondazione Don Gnocchi (FDG) em uma pequena coorte de indivíduos demonstraram a viabilidade da metodologia e a capacidade do protocolo LABION de obter uma impressão digital Raman reproduzível da saliva que pode ser usada para a discriminação de indivíduos saudáveis, pacientes com ELA e indivíduos afetados por outros tipos de doenças neurológicas.

MÉTODOS: A partir dos resultados preliminares do FDG, a composição bioquímica da saliva em pacientes com diagnóstico de ELA será avaliada e comparada estatisticamente com a obtida de indivíduos saudáveis ​​pareados por idade e sexo e de pacientes afetados por outras doenças neurológicas (doenças de Parkinson e Alzheimer). . Além disso, um agrupamento de ELA intragrupo será analisado para verificar uma impressão digital Raman diferente obtida de pacientes com ELA com início bulbar ou espinhal. Os dados Raman coletados serão processados ​​usando uma abordagem de análise multivariada por meio da Análise de Componentes Principais - Análise Discriminante Linear (PCA-LDA). O modelo de classificação será criado usando validação cruzada e validação de subconjunto. Graças ao RS, a composição geral da saliva será estabelecida com o mínimo de preparação da amostra, fornecendo uma impressão digital bioquímica abrangente da amostra. Paralelamente, serão medidos parâmetros salivares de rotina, incluindo viscosidade, pH, concentração total de proteínas e carboidratos, amilase e pepsina, cortisol e cromogranina A.

RESULTADOS ESPERADOS: No final deste estudo, os investigadores esperavam verificar a possibilidade de usar o padrão salivar de Raman como novo biomarcador promissor para o diagnóstico e progressão da ELA a ser relacionado com escalas clínicas para personalização e afinação da abordagem terapêutica. A intenção deste projeto é criar um modelo de classificação capaz de:

1. Determinar o início da ELA
2. Discriminar o sinal obtido de pacientes com ELA daquele coletado de outras doenças neurodegenerativas
3. Estratificar pacientes com ELA em início bulbar e espinhal
4. Correlacione os dados de Raman com escalas clínicas e paraclínicas usadas atualmente para diagnóstico e monitoramento de ELA