Descubrimiento de biomarcadores salivales por espectroscopia Raman en ELA (SalivALS) (SalivALS)

ANTECEDENTES/FUNDAMENTO: La escasez de biomarcadores para el diagnóstico y seguimiento de pacientes afectados por esclerosis lateral amiotrófica (ELA) es una de las mayores preocupaciones en las clínicas y la investigación de ELA. Los signos fenotípicos, las pruebas electrofisiológicas y las escalas clínicas se utilizan actualmente para el diagnóstico de la ELA y el seguimiento antes y después de los tratamientos. Hoy en día, el diagnóstico y el diagnóstico diferencial que se utiliza para discriminar la ELA de otras enfermedades neurodegenerativas comparables, son procesos lentos y complejos que reducen el tiempo para una pronta intervención. Así, se pide a la comunidad científica que luche por nuevos biomarcadores medibles, rápidos y objetivos para el diagnóstico y estratificación de los pacientes. La saliva es un biofluido complejo compuesto por moléculas bioactivas que se pueden recolectar mediante un procedimiento no invasivo. La posibilidad de monitorear simultáneamente todas las variaciones en los mensajeros endocrinos, electrolíticos y metabólicos en la saliva ha sugerido recientemente su uso para el diagnóstico de enfermedades complejas, como las enfermedades neurodegenerativas, pero solo se dispone de información limitada sobre el potencial de la saliva como portador alternativo de la ELA. biomarcadores.

OBJETIVOS: El objetivo del presente proyecto es optimizar un procedimiento innovador, no invasivo y rápido para la aparición de ELA y para la estratificación de pacientes con ELA, aprovechando la sensibilidad de la Espectroscopía Raman (RS) y de la saliva accesible. Los resultados preliminares de la Fondazione Don Gnocchi (FDG) en una pequeña cohorte de sujetos demostraron la viabilidad de la metodología y la capacidad del protocolo LABION para obtener una huella Raman reproducible de la saliva que se puede utilizar para la discriminación de sujetos sanos, pacientes con ELA y sujetos afectados. por otro tipo de enfermedades neurológicas.

MÉTODOS: A partir de los resultados preliminares de la FDG, se evaluará la composición bioquímica de la saliva en pacientes con ELA diagnosticada y se comparará estadísticamente con la obtenida de sujetos sanos de la misma edad y sexo y de pacientes afectados por otras enfermedades neurológicas (enfermedades de Parkinson y Alzheimer) . Además, se analizará una agrupación de ELA intragrupo para verificar una huella dactilar Raman diferente obtenida de pacientes con ELA con un inicio bulbar o espinal. Los datos Raman recopilados se procesarán utilizando un enfoque de análisis multivariante a través del Análisis de componentes principales - Análisis discriminante lineal (PCA-LDA). El modelo de clasificación se creará mediante validación cruzada y validación de subconjuntos. Gracias a RS, la composición general de la saliva se establecerá con una preparación mínima de la muestra, proporcionando una huella bioquímica completa de la muestra. Paralelamente, se medirán los parámetros salivales de rutina, incluida la viscosidad, el pH, la concentración total de proteínas y carbohidratos, la amilasa y la pepsina, el cortisol y la cromogranina A.

RESULTADOS ESPERADOS: Al final de este estudio, los investigadores esperaban verificar la posibilidad de utilizar el patrón salival Raman como un nuevo biomarcador prometedor para el diagnóstico y la progresión de la ELA para relacionarlo con escalas clínicas para personalizar y ajustar el enfoque terapéutico. La intención de este proyecto es crear un modelo de clasificación capaz de:

1. Determinar el inicio de la ELA
2. Discriminar la señal obtenida de pacientes con ELA de la recogida de otras enfermedades neurodegenerativas
3. Estratificar a los pacientes con ELA en inicio bulbar y espinal
4. Correlacione los datos Raman con las escalas clínicas y paraclínicas utilizadas hoy en día para el diagnóstico y seguimiento de la ELA