Syljen biomarkkerin löytö Raman-spektroskopialla ALS:ssä (SalivALS) (SalivALS)

TAUSTA/PERUSTELUT: Biomarkkerien niukkuus amyotrofisesta lateraaliskleroosista (ALS) kärsivien potilaiden diagnosoinnissa ja seurannassa on yksi suurimmista huolenaiheista ALS-klinikoissa ja -tutkimuksessa. Fenotyyppisiä merkkejä, elektrofysiologista testiä ja kliinisiä asteikkoja käytetään tällä hetkellä ALS-diagnoosissa ja seurannassa ennen ja jälkeen hoitoja. Nykyään diagnoosi ja erotusdiagnoosi, jota käytetään erottamaan ALS muista vastaavista neurodegeneratiivisista sairauksista, ovat aikaa vieviä ja monimutkaisia ​​prosesseja, jotka vähentävät nopeaan toimenpiteeseen kuluvaa aikaa. Siksi tiedeyhteisöä pyydetään pyrkimään uusiin, mitattavissa oleviin, nopeisiin ja objektiivisiin biomarkkereihin potilaiden diagnosointiin ja kerrostumiseen. Sylki on monimutkainen bioneste, joka koostuu bioaktiivisista molekyyleistä, jotka voidaan kerätä ei-invasiivisen toimenpiteen avulla. Mahdollisuus seurata samanaikaisesti kaikkia syljen endokriinisten, elektrolyyttisten ja aineenvaihdunnan välittäjien vaihteluita on äskettäin ehdottanut sen käyttöä monimutkaisten sairauksien, kuten neurodegeneratiivisten sairauksien, diagnosointiin, mutta syljen mahdollisuudesta ALS:n vaihtoehtoisena kantajana on saatavilla vain vähän tietoa. biomarkkerit.

TAVOITTEET: Tämän projektin tavoitteena on optimoida innovatiivinen, ei-invasiivinen ja nopea toimenpide ALS-potilaiden alkamiseen ja ALS-potilaiden kerrostukseen hyödyntäen Raman-spektroskopian (RS) herkkyyttä ja saatavilla olevaa sylkeä. Fondazione Don Gnocchin (FDG) alustavat tulokset pienestä kohortista kohorttia osoittivat menetelmän toteutettavuuden ja LABION-protokollan kyvyn saada toistettavissa oleva syljen Raman-sormenjälki, jota voidaan käyttää terveiden, ALS-potilaiden ja sairastuneiden henkilöiden erottamiseen. muiden neurologisten sairauksien vuoksi.

MENETELMÄT: FDG:n alustavista tuloksista alkaen syljen biokemiallinen koostumus potilailla, joilla on diagnosoitu ALS, arvioidaan ja verrataan tilastollisesti ikään ja sukupuoleen vastaavilta terveiltä koehenkilöiltä ja potilailta, joilla on muita neurologisia sairauksia (Parkinsonin ja Alzheimerin tauti) . Lisäksi analysoidaan ryhmän sisäinen ALS-klusteri, jotta voidaan varmistaa erilainen Raman-sormenjälki, joka on saatu ALS-potilailta, joilla on bulbaari- tai selkäydinsairaus. Kerätyt Raman-tiedot käsitellään monimuuttujaanalyysimenetelmällä pääkomponenttianalyysin - lineaarisen erotteluanalyysin (PCA-LDA) kautta. Luokittelumalli luodaan ristiinvalidoinnin ja osajoukon validoinnin avulla. RS:n ansiosta syljen kokonaiskoostumus määritetään minimaalisella näytteen valmistelulla, mikä tarjoaa kattavan näytteen biokemiallisen sormenjäljen. Samanaikaisesti mitataan rutiininomaisia ​​syljen parametreja, mukaan lukien viskositeetti, pH, kokonaisproteiini- ja hiilihydraattipitoisuus, amylaasi ja pepsiini, kortisoli ja kromograniini A.

ODOTETUT TULOKSET: Tämän tutkimuksen loppuun mennessä tutkijat odottivat vahvistavansa mahdollisuuden käyttää Ramanin sylkikuviota uutena lupaavana biomarkkerina ALS-diagnoosissa ja etenemisessä, joka liittyy kliinisiin asteikoihin terapeuttisen lähestymistavan personoimiseksi ja hienosäätämiseksi. Tämän projektin tarkoituksena on luoda luokitusmalli, joka pystyy:

1. Määritä ALS:n puhkeaminen
2. Erottele ALS-potilailta saatu signaali muista neurodegeneratiivisista sairauksista saadusta signaalista
3. Stratifioi ALS-potilaat bulbar- ja selkärangan alkamiseen
4. Korreloi Raman-tiedot kliinisten ja parakliinisten asteikkojen kanssa, joita käytetään nykyään ALS-diagnoosissa ja -valvonnassa