Oxalát a citrát

Experimentální design a důsledky Podávání perorálního oxalátu bez citrátu určí příspěvek stravy k této asociaci. Změříme frakční vylučování oxalátu a citrátu. Oba jsou volně filtrovány glomerulem a buď secernovány nebo reabsorbovány (oxalát) nebo jen reabsorbovány (citrát). Pomocí frakční exkrece budeme schopni posoudit exkrece moči oddělené od příspěvku filtrované náplně a následné manipulace s tubuly.

Tato studie má velké důsledky jak pro péči o pacienty, tak pro budoucí studie. Pokud je asociace oxalát-citrát v moči primárně spojena s dietním oxalátem a citrátem, pak se frakční exkrece citrátu nezvýší po našem navrhovaném izolovaném dietním zátěžovém testu oxalátu u kontrol nebo u osob, které tvoří kameny. Toto pozorování umožní lékařům vzít to v úvahu při vývoji diet pro prevenci ledvinových kamenů a zvážit doporučení konzumace potravin s vysokým obsahem citrátu (nebo suplementace alkálií) současně s konzumací oxalátů. Kromě toho výsledky tohoto experimentu povedou k budoucím studiím zahrnujícím suplementaci alkálií před zátěžovým testem oxalátu, aby se zjistilo, zda lze obnovit rovnováhu oxalát-citrát v moči. Pokud asociace oxalát-citrát není řízena pouze stravou, očekáváme nárůst frakčního vylučování citrátu a rozdíl ve vztahu oxalát-citrát v moči mezi netvornými a tvory kamenů. Pokud ano, tato asociace může souviset s vazbou genu SLC26Ac/NaDC-1 a jejím potenciálním narušením u tvořivých kamenů. To může vést k budoucím genetickým a lékovým studiím souvisejícím s regulací těchto transportérů. A konečně, rozdíly v asociaci oxalát-citrát v moči mezi látkami, které netvorí kameny, mohou souviset s neuspořádaným zacházením s kyselinou a zásadou, které přispívá k otupené asociaci u látek vytvářejících kameny a dále pozorované u pacientů s Roux-en-Y Gastri Bypass . Velkou část práce na neuspořádaném acidobazickém zacházení ve formovačích kamene provedl Drs. Worcester a Coe. Budoucí studie poskytující doplňkové alkálie s potravinami obsahujícími oxalát proto může poskytnout další pohled na mechanismy rizika kamenů u těchto pacientů.

PŘÍSTUP Experimentální design: Studie budou prováděny v Centru klinického výzkumu (CRC) University of Chicago Medicine (UCM).

Proces informovaného souhlasu: Subjekty projdou procesem informovaného souhlasu mnou nebo studijním výzkumným asistentem. Subjektům bude poskytnut dostatek času na diskusi a kladení otázek. Žádné studijní aktivity nebudou probíhat, dokud subjekt nepodepíše formulář souhlasu.

U lidí, kteří netvorí kameny (N=12) a neobézních kalcium/oxalátových kamenů (N=12), podejte perorální dávku (360 mg) oxalátu sodného a měřte oxalát a citrát v moči i v séru po dobu šesti hodin. Primárním cílovým parametrem (hypotéza 1a) je změna oproti výchozí hodnotě ve frakčním vylučování citrátu upravená o změnu ve frakčním vylučování oxalátu po zátěži oxalátem. Sekundární cílový bod (hypotéza 1b) je porovnat změnu ve frakčním vylučování citrátu upraveného na frakční vylučování oxalátu u neobézních osob tvořících kameny oproti těm, kteří netvorí kameny.

Odůvodnění: Existuje souvislost mezi vylučováním oxalátu močí a vylučováním citrátu, která je větší u lidí, kteří netvorí kameny, než u lidí, kteří kameny tvoří. Pokud je to způsobeno specifickým účinkem transportu oxalátu v proximálním tubulu na reabsorpci citrátu, pak by podání perorální zátěže oxalátem mělo vést ke zvýšenému vylučování citrátu močí a toto zvýšení se může lišit u osob, které netvorí kameny, a u těch, kteří netvorí kameny. Proto 1a: perorální zátěž oxalátem sodným zvýší frakční vylučování citrátu; a 1b: zvýší částečné vylučování citrátu více u lidí, kteří netvorí kameny, než u lidí, kteří netvorí kameny. Pokud je to pravda, naznačuje to spojení na úrovni funkce transportéru proximálních tubulů (SLC26A6/NaDC1). Pokud je nepravdivá, musí být zodpovědné jiné mechanismy, jako je změna stravy

Studijní populace a nábor: Zapište celkem 24 subjektů (12 non-stone formers, 12 stone formers) se stejným počtem podle pohlaví během prvních dvou let nebo ocenění. Kontroly, které nevytvářejí kámen, budou získávány pomocí prostředků účastníků výzkumu Research Match a The New Normal Ústavu pro translační medicínu UCM. Research Match a The New Normal jsou zdroje pro vyhledávání jednotlivců, kteří mají zájem o účast ve výzkumných studiích. Dotazy lze použít k identifikaci vhodných ovládacích prvků. Vhodné kontroly netvořící kameny dokončí jeden domácí 24hodinový základní sběr moči doma pro screening jakýchkoli závažných acidobazických nebo oxalátových abnormalit. Účastníci tvorby kamenů (všichni mají k dispozici 24hodinová data) budou rekrutováni z kliniky UCM Kidney Stone Clinic (aktuální i úložiště předchozích pacientů). Klinika ledvinových kamenů UCM je velká klinika s více než 50 lety pacientů. Naše skupina má dlouhou historii úspěšného náboru účastníků výzkumu z tohoto zdroje.

Protokol: Tento protokol byl vyvinut a upraven na základě dříve publikovaných metodologií.40-42 Budeme vybírat pacienty tvořící kameny jak na suplementaci alkálií, tak i bez nich. Ti, kteří užívají alkálie, budou požádáni, aby přerušili léčbu na dva týdny před dnem studie. Všem pacientům bude týden před dnem studie podán veškerý vitamin C, multivitaminy, doplňky vápníku a diuretika. Držení diuretik a suplementace alkálií bude provedeno po diskusi s primárním nefrologem pacienta nebo lékařem primární péče za účelem projednání bezpečnosti při vysazování těchto léků po dobu studie. Jeden den před dnem studie účastníci doma vyplní 24hodinový sběr moči a dotazník o frekvenci jídla. V den studia budou účastníci přijati do CRC nalačno. Odeberou se základní (čas 0) vzorky moči a krve a změří se výška a hmotnost. Účastník zkonzumuje dávku 360 mg (4 mmol) perorálního oxalátu sodného rozpuštěného ve 250 ml destilované vody. Tento obsah oxalátu byl vybrán na základě předchozích studií, které podporují tuto hladinu jako dostatečnou pro pozorování signálu oxalátu v moči.43 Tento obsah oxalátu je pro pacienty bezpečný a pod rozsahem typické porce špenátu (>700 mg/100 g). Po dobu 6 hodin po perorálním zatížení oxalátem se budou odebírat vzorky moči (každé 1 hodinu) a krve (každé 2 hodiny). Odběr krve bude přibližně 8 ml krve na jeden odběr (celkem 4 odběry krve). Účastníci dostanou studijní snídani s nízkým obsahem oxalátu a citrátu, ale do dokončení studie nekonzumují žádné jiné jídlo. Příjem vody bude povolen ad lib.

Měření moči a séra: Dokončí se 24hodinový a časovaný sběr moči. Budou poskytnuty pokyny pro domácí 24hodinový sběr moči. Moč bude shromažďována pod olejem, aby bylo možné měřit všechny acidobazické parametry, včetně celkového oxidu uhličitého (CO2). Moč bude testována na přítomnost oxalátu a citrátu, jakož i dalších chemických faktorů ovlivňujících ledvinové kameny včetně objemu moči, vápníku, pH, kyseliny močové, sodíku, draslíku, chloridů, hořčíku, fosforu, močoviny, síranu, amonného a kreatininu. Přesycení šťavelanu vápenatého, fosforečnanu vápenatého a kyseliny močové bude vypočítáno pomocí EQUIL2 (počítačového programu používaného k odhadu rizika ledvinových kamenů). Tyto dodatečné testy poskytnou data pro budoucí studii. Měří se sérový sodík, draslík, chlorid, bikarbonát, vápník, fosfor, hořčík, kreatinin a ultrafiltrovatelný (UF) vápník, citrát a šťavelan. Všechna měření moči a séra budou provedena v laboratoři UCM Kidney Stone Laboratory kromě UF oxalátu, který bude měřen na University of Alabama-Birmingham (UAB). Sérum a moč budou zmraženy při -80 °C a uloženy pro případné pozdější testy.

Sběr klinických proměnných: Klinické proměnné budou zahrnovat věk, pohlaví, výšku, hmotnost, index tělesné hmotnosti, chronické zdravotní stavy a léky. Klinické proměnné budou shromážděny z elektronického zdravotního záznamu a ověřeny v rozhovoru mnou nebo výzkumným asistentem.

Statistická analýza: Pro každého účastníka bude vypočtena změna oxalátu v moči, citrátu v moči a frakční exkrece citrátu a oxalátu od výchozí hodnoty (čas 0) do 2-, 4- a 6-hodinových časových bodů. Deskriptivní statistika a t-testy budou použity k prokázání změny citrátu v moči a frakčního vylučování citrátu změnou oxalátu v každém časovém období u všech účastníků a mezi těmi, kteří tvoří kameny, a mezi těmi, kteří netvorí kameny. Hladiny oxalátu a citrátu v moči a frakční exkrece citrátu a oxalátu budou vyneseny do grafu v průběhu času. Pomocí longitudinálních metod bude provedeno regresní modelování asociace citrátu v moči s oxalátem v moči u všech pacientů a stratifikováno podle stavu tvůrců kamenů. Proměnné, které je třeba vzít v úvahu pro multivariační analýzu, zahrnují klinické (pohlaví, index tělesné hmotnosti) a močové (GI anion) proměnné.