Oxalato e Citrato

Desenho Experimental e Implicações A administração oral de oxalato sem citrato determinará a contribuição da dieta para esta associação. Mediremos a excreção fracionada de oxalato e citrato. Ambos são livremente filtrados pelo glomérulo e secretados ou reabsorvidos (oxalato) ou apenas reabsorvidos (citrato). Seremos capazes de avaliar as excreções de urina particionadas a partir da contribuição da carga filtrada e posterior manipulação dos túbulos usando a excreção fracionada.

Este estudo tem grandes implicações tanto para o atendimento ao paciente quanto para estudos futuros. Se a associação de oxalato-citrato na urina estiver principalmente relacionada ao oxalato e citrato da dieta, então a excreção fracionada de citrato não aumentará após nosso teste de carga isolada de oxalato na dieta proposto em controles ou formadores de cálculos. Essa observação permitirá que os profissionais considerem isso ao desenvolver dietas para prevenção de cálculos renais e considerem a recomendação do consumo de alimentos ricos em citrato (ou suplementação de álcali) simultaneamente ao consumo de oxalato. Além disso, os resultados deste experimento levarão a estudos futuros, incluindo suplementação alcalina antes do teste de carga de oxalato para verificar se o equilíbrio de oxalato-citrato na urina pode ser restaurado. Se a associação de oxalato-citrato não for apenas impulsionada pela dieta, prevemos um aumento na excreção fracionada de citrato e uma diferença na relação urinária de oxalato-citrato entre não formadores de cálculos e formadores de cálculos. Em caso afirmativo, essa associação pode estar relacionada à ligação do gene SLC26Ac/NaDC-1 e sua potencial interrupção nos formadores de cálculos. Isso pode levar a futuros estudos genéticos e de drogas relacionados à regulação desses transportadores. Finalmente, as diferenças na associação urinária de oxalato-citrato entre não formadores de cálculos e formadores de cálculos podem estar relacionadas ao manuseio ácido-base desordenado que contribui para a associação atenuada em formadores de cálculos e ainda mais observada naqueles com bypass gástrico em Y de Roux . Grande parte do trabalho sobre o manuseio de ácido-base desordenado em formadores de cálculos foi feito pelos Drs. Worcester e Coe. Portanto, um estudo futuro fornecendo álcali suplementar com alimentos contendo oxalato pode fornecer informações adicionais sobre os mecanismos de risco de cálculos para esses pacientes.

ABORDAGEM Desenho Experimental: Os estudos serão realizados no Centro de Pesquisa Clínica (CRC) da Universidade de Medicina de Chicago (UCM).

Processo de Consentimento Informado: Os participantes passarão pelo processo de consentimento informado por mim ou pelo assistente de pesquisa do estudo. Os participantes terão tempo suficiente para discutir e fazer perguntas. Nenhuma atividade de estudo ocorrerá até que o sujeito tenha assinado o formulário de consentimento.

Em não formadores de cálculos (N=12) e formadores de cálculos de cálcio/oxalato não obesos (N=12), administre uma carga de oxalato de sódio oral (360 mg) e meça tanto oxalato e citrato na urina quanto no soro durante seis horas. O ponto final primário (hipótese 1a) é a alteração da linha de base na excreção fracionada de citrato ajustada para alteração na excreção fracionada de oxalato após carga de oxalato. O objetivo secundário (hipótese 1b) é comparar a alteração na excreção fracionada de citrato ajustada à excreção fracionada de oxalato em formadores de cálculos não obesos versus não formadores de cálculos.

Justificativa: Existe uma associação entre a excreção urinária de oxalato e citrato que é maior em não formadores de cálculos do que em formadores de cálculos. Se isso for devido a um efeito específico do transporte de oxalato no túbulo proximal na reabsorção de citrato, a administração de uma carga oral de oxalato deve levar ao aumento da excreção de citrato na urina, e esse aumento pode diferir entre não formadores de cálculos e formadores de cálculos. Portanto, 1a: uma carga oral de oxalato de sódio aumentará a excreção fracionada de citrato; e 1b: aumentará a excreção fracionada de citrato mais em não formadores de cálculos do que em formadores de cálculos não obesos. Se for verdade, isso sugere uma ligação no nível da função do transportador do túbulo proximal (SLC26A6/NaDC1). Se falso, outros mecanismos, como variação alimentar, devem ser responsáveis

População do estudo e recrutamento: Inscreva um total de 24 indivíduos (12 não formadores de cálculos, 12 formadores de cálculos) com números iguais por sexo durante os primeiros dois anos ou o prêmio. os controles não formadores de cálculos serão recrutados usando os recursos de pesquisa Research Match e The New Normal do UCM Institute for Translational Medicine. Research Match e The New Normal são recursos para encontrar pessoas interessadas em participar de estudos de pesquisa. As consultas podem ser usadas para identificar controles elegíveis. Os controles não formadores de cálculos elegíveis completarão uma coleta domiciliar de urina de linha de base de 24 horas em casa para rastrear qualquer anormalidade ácido-base ou oxalato grave. Os participantes formadores de cálculos (todos com dados de 24 horas disponíveis) serão recrutados na UCM Kidney Stone Clinic (tanto atual como repositório de pacientes anteriores). A UCM Kidney Stone Clinic é uma grande clínica com mais de 50 anos de pacientes. Nosso grupo tem uma longa história de recrutamento bem-sucedido de participantes de pesquisa dessa fonte.

Protocolo: Este protocolo foi desenvolvido e adaptado com base em metodologias publicadas anteriormente.40-42 Selecionaremos pacientes formadores de cálculos com ou sem suplementação alcalina. Aqueles em suplementação alcalina serão solicitados a descontinuar por duas semanas antes do dia do estudo. Para todos os pacientes, uma semana antes do dia do estudo, todas as vitaminas C, multivitaminas, suplementos de cálcio e diuréticos serão mantidos. A manutenção de diuréticos e suplementação alcalina será feita em discussão com o nefrologista principal ou médico de cuidados primários do paciente para discutir a segurança de interromper esses medicamentos durante o período do estudo. Um dia antes do dia do estudo, os participantes completarão a coleta de urina de 24 horas e o questionário de frequência alimentar em casa. No dia do estudo, os participantes serão admitidos no CRC em jejum. Amostras de urina e sangue da linha de base (tempo 0) serão coletadas e a altura e o peso serão medidos. O participante consumirá uma carga oral de oxalato de sódio de 360mg (4mmol) dissolvida em 250ml de água destilada. Este conteúdo de oxalato foi selecionado com base em estudos anteriores que sustentam este nível como adequado para observar um sinal de oxalato na urina.43 Este conteúdo de oxalato é seguro para pacientes e está abaixo da faixa de uma porção típica de espinafre (>700mg/100g). Repetir urina cronometrada (a cada 1 hora) e amostras de sangue (a cada 2 horas) serão obtidas por 6 horas após a carga oral de oxalato. As coletas de sangue serão de aproximadamente 8 ml de sangue por coleta (total de 4 coletas de sangue). Os participantes receberão um café da manhã com baixo teor de oxalato e citrato, mas não consumirão nenhum outro alimento até a conclusão do estudo. A ingestão de água será permitida ad lib.

Medições de urina e soro: as coletas de urina de 24 horas e cronometradas serão concluídas. Serão fornecidas instruções para coletas domiciliares de urina de 24 horas. A urina será coletada sob óleo para que todos os parâmetros ácido-base possam ser medidos, incluindo o dióxido de carbono total (CO2). A urina será analisada para oxalato e citrato, bem como outros fatores químicos de risco de cálculos renais, incluindo volume de urina, cálcio, pH, ácido úrico, sódio, potássio, cloreto, magnésio, fósforo, uréia, sulfato, amônio e creatinina. A supersaturação de oxalato de cálcio, fosfato de cálcio e ácido úrico será calculada usando EQUIL2 (um programa de computador usado para estimar o risco de cálculos renais). Esses ensaios adicionais fornecerão dados para estudos futuros. Serão medidos sódio, potássio, cloreto, bicarbonato, cálcio, fósforo, magnésio, creatinina e cálcio ultrafiltrado (UF), citrato e oxalato séricos. Todas as medições de urina e soro serão realizadas no UCM Kidney Stone Laboratory, exceto o oxalato de UF, que será medido na University of Alabama-Birmingham (UAB). O soro e a urina serão congelados a -80° C e armazenados para possíveis ensaios posteriores.

Coleta de variáveis ​​clínicas: As variáveis ​​clínicas incluirão idade, sexo, altura, peso, índice de massa corporal, condições médicas crônicas e medicamentos. As variáveis ​​clínicas serão coletadas do prontuário eletrônico e verificadas em entrevista por mim ou pelo assistente de pesquisa.

Análise estatística: Mudança no oxalato urinário, citrato urinário e excreções fracionais de citrato e oxalato desde a linha de base (tempo 0) até 2, 4 e 6 horas serão calculadas para cada participante. Estatísticas descritivas e testes t serão usados ​​para demonstrar a alteração no citrato urinário e a excreção fracionada de citrato por alteração no oxalato em cada período de tempo para todos os participantes e entre formadores e não formadores de cálculos. Os níveis de oxalato e citrato na urina e as excreções fracionadas de citrato e oxalato serão representados graficamente ao longo do tempo. Métodos longitudinais serão usados ​​para realizar modelagem de regressão da associação de citrato de urina por oxalato de urina para todos os pacientes e estratificados por status de formadores de cálculos. As variáveis ​​a serem consideradas para análise multivariada incluem variáveis ​​clínicas (sexo, índice de massa corporal) e urinárias (ânion GI).