Oksalaatti ja sitraatti

Kokeen suunnittelu ja vaikutukset Suun kautta otettavan oksalaatin antaminen ilman sitraattia määrittää ruokavalion osuuden tähän yhteyteen. Mittaamme oksalaatin ja sitraatin erittymisen. Molempia suodatetaan vapaasti glomerulus ja ne joko erittyvät tai imeytyvät uudelleen (oksalaatti) tai vain reabsorboivat (sitraatti). Pystymme arvioimaan suodatetun kuorman vaikutuksesta jakautuneita virtsan eritteitä ja sitä seuraavaa tubulusten käsittelyä käyttämällä fraktioeritystä.

Tällä tutkimuksella on suuri merkitys sekä potilaiden hoitoon että tuleviin tutkimuksiin. Jos virtsan oksalaatti-sitraatti-yhteys liittyy ensisijaisesti ravinnon oksalaattiin ja sitraattiin, sitraatin fraktionaalinen erittyminen ei lisäänny ehdotetun eristetyn ravinnon oksalaattikuormitustestin jälkeen kontrolleissa tai kivenmuodostajissa. Tämän havainnon avulla lääkärit voivat harkita tätä, kun he kehittävät ruokavalioita munuaiskivien ehkäisyyn ja harkitsevat runsaasti sitraattia sisältävien elintarvikkeiden (tai emäksisten lisäravinteiden) nauttimista samanaikaisesti oksalaattien käytön kanssa. Lisäksi tämän kokeen tulokset johtavat tuleviin tutkimuksiin, joihin kuuluu alkalilisäys ennen oksalaattikuormitustestiä, jotta nähdään, voidaanko virtsan oksalaatti-sitraattitasapaino palauttaa. Jos oksalaatti-sitraatti-yhteys ei johdu pelkästään ruokavaliosta, odotamme sitraatin fraktionaalisen erittymisen lisääntyvän ja eron virtsan oksalaatti-sitraattisuhteessa ei-kivenmuodostajien ja kivenmuodostajien välillä. Jos näin on, tämä assosiaatio voi liittyä SLC26Ac/NaDC-1-geenin sidokseen ja sen mahdolliseen häiriöön kivenmuodostajissa. Tämä voi johtaa tuleviin geneettisiin ja lääketutkimuksiin, jotka liittyvät näiden kuljettajien säätelyyn. Lopuksi erot virtsan oksalaatti-sitraatti-yhteydessä muiden kuin kivenmuodostajien ja kivenmuodostajien välillä voivat liittyä epävakaaseen happo-emäskäsittelyyn, joka edistää kivenmuodostajien tylsistynyttä assosiaatiota ja jota havaitaan edelleen potilailla, joilla on Roux-en-Y mahalaukun ohitus. . Suuren osan työstä, joka koskee häiriintynyttä happo-emäskäsittelyä kivenmuodostajissa, on tehnyt Dr. Worcester ja Coe. Siksi tuleva tutkimus, joka tarjoaa lisäemästä oksalaattia sisältävien elintarvikkeiden kanssa, voi tarjota lisätietoa kiviriskimekanismeista näille potilaille.

LÄHESTYMISTAPA Kokeellinen suunnittelu: Tutkimukset suoritetaan Chicagon yliopiston lääketieteen (UCM) kliinisessä tutkimuskeskuksessa (CRC).

Tietoisen suostumuksen prosessi: Minä tai tutkimusavustaja hyväksyn koehenkilöt tietoisen suostumuksen prosessin kautta. Aineistoon jää runsaasti aikaa keskustella ja esittää kysymyksiä. Opintotoimintaa ei tapahdu ennen kuin tutkittava on allekirjoittanut suostumuslomakkeen.

Muille kuin kivenmuodostajille (N=12) ja ei-lihaville kalsium/oksalaattikiven muodostajille (N=12), anna oraalinen (360 mg) natriumoksalaattikuorma ja mittaa sekä virtsa että seerumin oksalaatti ja sitraatti kuuden tunnin aikana. Ensisijainen päätepiste (hypoteesi 1a) on muutos perustasosta sitraatin fraktionaalisessa erittymisessä, joka on mukautettu oksalaattikuormituksen jälkeiseen oksalaattierityksen muutokseen. Toissijainen päätepiste (hypoteesi 1b) on verrata muutosta sitraatin fraktionaalisessa erittymisessä, joka on sovitettu fraktionaaliseen erittymiseen oksalaattiin ei-lihavilla kivenmuodostajilla verrattuna ei-kivenmuodostajiin.

Perustelut: Virtsan oksalaatin ja sitraatin erittymisen välillä on yhteys, joka on suurempi ei-kivenmuodostajilla kuin kivenmuodostajilla. Jos tämä johtuu oksalaattikuljetuksen erityisestä vaikutuksesta proksimaalisessa tubuluksessa sitraatin reabsorptioon, oraalisen oksalaattikuorman antamisen pitäisi johtaa lisääntyneeseen virtsasitraatin erittymiseen, ja tämä lisääntyminen voi vaihdella muiden kuin kivenmuodostajien ja kivenmuodostajien välillä. Siksi 1a: suun kautta otettava natriumoksalaattikuorma lisää sitraatin fraktionaalista erittymistä; ja 1b: lisää sitraatin fraktionaalista erittymistä enemmän ei-kivenmuodostajissa kuin ei-lihavilla kivenmuodostajissa. Jos totta, tämä viittaa yhteyteen proksimaalisen tubuluskuljettajan (SLC26A6/NaDC1) tasolla. Jos se on väärä, muiden mekanismien, kuten ruokavalion vaihtelun, on oltava vastuussa

Tutkimuspopulaatio ja rekrytointi: Ilmoittaudu yhteensä 24 kohdetta (12 ei-kivenmuodostajaa, 12 kivenmuodostajaa) sukupuolen mukaan yhtä suurella määrällä kahden ensimmäisen vuoden tai palkinnon aikana. ei-kiven muodostavat kontrollit rekrytoidaan käyttämällä Research Matchin ja The New Normal -tutkimuksen osallistujaresursseja UCM Institute for Translational Medicine -instituutista. Research Match ja The New Normal ovat resursseja löytää henkilöitä, jotka ovat kiinnostuneita osallistumaan tutkimustutkimuksiin. Kyselyjen avulla voidaan tunnistaa kelvolliset ohjausobjektit. Tukikelpoiset kiveä muodostamattomat kontrollit suorittavat yhden 24 tunnin kotivirtsan peruskeräyksen kotona vakavien happo-emäs- tai oksalaattipoikkeavuuksien seulomiseksi. Kiviä muodostavat osallistujat (joilla kaikilla on saatavilla 24 tunnin tiedot) rekrytoidaan UCM Kidney Stone Clinicistä (sekä nykyisestä että aikaisempien potilaiden varastosta). UCM Kidney Stone Clinic on suuri klinikka, jossa on yli 50 vuotta potilaita. Ryhmällämme on pitkä historia menestyksekkäästi tutkimushenkilöiden rekrytoinnista tästä lähteestä.

Protokolla: Tämä protokolla on kehitetty ja mukautettu aiemmin julkaistujen menetelmien perusteella.40-42 Valitsemme kiviä muodostavia potilaita sekä alkalilisää saavia että ei. Alkalisää käyttäjiä pyydetään lopettamaan käyttö kahdeksi viikoksi ennen tutkimuspäivää. Kaikille potilaille pidetään viikkoa ennen tutkimuspäivää kaikki C-vitamiini, monivitamiinit, kalsiumlisät ja diureetit. Diureettien ja emäksisten lisäravinteiden käyttö keskustellaan potilaan ensisijaisen nefrologin tai perusterveydenhuollon lääkärin kanssa, jotta voidaan keskustella turvallisuudesta näiden lääkkeiden keskeyttämisessä tutkimusjakson ajaksi. Päivää ennen tutkimuspäivää osallistujat täyttävät 24 tunnin virtsankeruu- ja ruokailutiheyskyselyn kotona. Opintopäivänä osallistujat otetaan CRC:hen paastotilassa. Perustason (aika 0) virtsa- ja verinäytteet kerätään ja pituus ja paino mitataan. Osallistuja kuluttaa 360 mg (4 mmol) oraalista natriumoksalaattia liuotettuna 250 ml:aan tislattua vettä. Tämä oksalaattipitoisuus valittiin aiempien tutkimusten perusteella, jotka tukevat tätä tasoa riittävänä virtsan oksalaattisignaalin havaitsemiseen.43 Tämä oksalaattipitoisuus on turvallinen potilaille ja alle tyypillisen pinaattiannoksen (>700mg/100g). Toistuva ajoitettu virtsa (1 tunnin välein) ja verinäytteitä (2 tunnin välein) otetaan 6 tunnin ajan oraalisen oksalaattilatauksen jälkeen. Verinäytteet ovat noin 8 ml verta per otto (yhteensä 4 verenottoa). Osallistujat saavat vähän oksalaattia ja sitraattia sisältävän tutkimusaamiaisen, mutta he eivät käytä muuta ruokaa ennen tutkimuksen päättymistä. Vedenotto sallitaan ad lib.

Virtsan ja seerumin mittaukset: 24 tunnin ja ajoitetut virtsankeräykset suoritetaan. Saat ohjeet 24 tunnin kotivirtsankeräystä varten. Virtsa kerätään öljyn alle, jotta kaikki happo-emäs-parametrit voidaan mitata, mukaan lukien hiilidioksidin kokonaismäärä (CO2). Virtsasta määritetään oksalaatti ja sitraatti sekä muut munuaiskivien riskitekijät, mukaan lukien virtsan tilavuus, kalsium, pH, virtsahappo, natrium, kalium, kloridi, magnesium, fosfori, urea, sulfaatti, ammonium ja kreatiniini. Kalsiumoksalaatin, kalsiumfosfaatin ja virtsahapon ylikylläisyys lasketaan EQUIL2:lla (tietokoneohjelma, jota käytetään arvioimaan munuaiskivien riskiä). Nämä lisämääritykset tarjoavat tietoa tulevaa tutkimusta varten. Seerumin natrium-, kalium-, kloridi-, bikarbonaatti-, kalsium-, fosfori-, magnesium-, kreatiniini- ja ultrasuodatettava (UF) kalsium-, sitraatti- ja oksalaattipitoisuudet mitataan. Kaikki virtsan ja seerumin mittaukset tehdään UCM Kidney Stone Laboratoryssa paitsi UF-oksalaatti, joka mitataan Alabama-Birminghamin yliopistossa (UAB). Seerumi ja virtsa pakastetaan -80 °C:seen ja varastoidaan mahdollisia myöhempiä määrityksiä varten.

Kliinisten muuttujien kokoelma: Kliiniset muuttujat sisältävät iän, sukupuolen, pituuden, painon, painoindeksin, krooniset sairaudet ja lääkkeet. Kliiniset muuttujat kerätään sähköisestä sairauskertomuksesta ja tarkistetaan haastattelussa minä tai tutkimusavustaja.

Tilastollinen analyysi: Muutos virtsan oksalaatissa, virtsasitraatissa ja sitraatin ja oksalaatin fraktioerityksessä lähtötasosta (aika 0) 2, 4 ja 6 tunnin aikapisteisiin lasketaan jokaiselle osallistujalle. Kuvaavia tilastoja ja t-testejä käytetään osoittamaan muutos virtsan sitraatissa ja sitraatin fraktionaalinen erittyminen oksalaatin muutoksen myötä kullakin ajanjaksolla kaikkien osallistujien osalta sekä kiven muodostavien ja ei-kiven muodostajien välillä. Virtsan oksalaatin ja sitraatin tasot sekä sitraatin ja oksalaatin fraktioeritykset esitetään graafisesti ajan kuluessa. Pitkittäisiä menetelmiä käytetään regressiomallinnukseen virtsan sitraatin ja virtsan oksalaatin assosiaatiosta kaikille potilaille ja kerrostetaan kivenmuodostajien statuksen mukaan. Monimuuttuja-analyysissä huomioon otettavat muuttujat sisältävät kliiniset (sukupuoli, painoindeksi) ja virtsan (GI-anioni) muuttujat.