Autologe voksne stamceller til patienter med type 1-diabetes og en vellykket nyretransplantation

Ø-transplantation som en potentiel behandling af diabetes er blevet undersøgt grundigt i løbet af de sidste 10 år. En sådan tilgang vil dog altid være begrænset, primært fordi det er vanskeligt at opnå tilstrækkeligt store antal oprensede øer fra døde donorer. Et alternativ til organ- eller vævstransplantation er at bruge en fornyelig kilde til celler. Voksne stamceller er klonogene celler, der er i stand til både selvfornyelse og multilineage differentiering. Disse celler har potentialet til at formere sig og differentiere til enhver type celle og til at blive genetisk modificeret in vitro, hvilket giver celler, som kan isoleres og bruges til transplantation.

Nylige undersøgelser har givet veldefinerede differentieringsprotokoller, som kan bruges til at lede stamceller ind i specifikke cellelinjer som neuroner, kardiomyocytter og insulin-udskillende celler. Desuden har disse afledte celler været nyttige i forskellige dyremodeller. I denne henseende genopretter insulinudskillende celler afledt af R1 museembryonale stamceller blodsukkerkoncentrationerne til normale, når de transplanteres til streptozotocin-inducerede diabetiske dyr. Vores gruppe har isolerede stamceller (Cluster Designated (CD) 34 positive undersæt af stamceller), der er i stand til at differentiere til flere vævstyper ex vivo. Under definerede forhold, i kultur, producerer omkring 40 procent af cellerne insulin og reducerer blodsukkerniveauet i streptozotocin-inducerede mus.

Klinisk har vi udført et fase I forsøg med stamcelleadministration til patienter med leverinsufficiens. Proceduren var veltolereret uden specifikke bivirkninger og med vedvarende tegn på klinisk fordel. Disse resultater understøtter denne protokol til anvendelse af voksenstamcelleterapi i behandlingen af ​​diabetes.

For at evaluere potentielle kliniske anvendelser for disse nylige fremskridt har vi designet et prospektivt fase I klinisk studie af det udvidede afkom af en voksen CD34 positiv undergruppe (InsulinCytes) injiceret direkte i kroppen og halen af ​​bugspytkirtlen hos deltagerne via selektiv kateterisering af miltpulsåren. Studiegruppen består af patienter med kompliceret diabetes mellitus type I plus nyretransplantation med det formål at afklare, om dette giver klinisk udbytte som behandlingsmodel for diabetes.

Granulocytkolonistimulerende faktor (G-CSF) vil blive administreret til egnede patienter for at mobilisere deres hæmatopoietiske stamceller (HSC'er) fra knoglemarven ind i det perifere kredsløb. Disse blodceller vil blive indsamlet fra hver patient ved leukaferese. CD34-positive stamceller vil derefter blive isoleret ved immunselektion og introduceret i en Nunc-cellefabrik, hvor undergruppen af ​​CD34-positive stamceller får lov til at binde sig til plastikbakkerne på cellefabrikken i 2 timer ved 37 grader C i 5 procent kuldioxid . Efter denne periode vil de ikke-tilknyttede CD34-positive celler blive vasket fra systemet, og afkommet af de vedhæftede celler udskilt i supernatantmediet ekspanderet i nærvær af vækstmedium suppleret med vækstfaktorer. Efter 6 dages ekspansion vil stamcellerne blive differentieret til insulin- og c-peptidproteinudskillende celler i løbet af de næste 14 dage ved tilsætning af specificerede reagenser/vækstfaktorer og fortsat inkubation ved 37 grader C i 5 procent kuldioxid i i overensstemmelse med principperne for Good Manufacturing Practice (GMP). Som et valgfrit trin kan cellerne mærkes med jernoxid for at muliggøre sporing af cellerne ved Magnetic Resonance Imaging (MRI) scanning, før de infunderes i patienten.

En igangværende instituterfaring med leversvigtpatienter, som er blevet infunderet med udifferentierede stamceller, har vist, at en administreret dosis på op til 2 x 10 log 9 celler var veltolereret. Den foreslåede undersøgelsesgruppe vil bestå af 10 type I- eller Type 2-diabetespatienter, som har haft en vellykket tidligere nyretransplantation.

Det primære formål med undersøgelsen er at vurdere sikkerheden og tolerancen af ​​stamcelleinfusion i bugspytkirtlen og derefter at vurdere virkningen af ​​denne nye modalitet i behandlingen af ​​diabetes.