Autologiset aikuisen kantasolut potilaille, joilla on tyypin 1 diabetes ja onnistunut munuaissiirto

Saaristonsiirtoa mahdollisena diabeteksen hoitona on tutkittu laajasti viimeisen 10 vuoden aikana. Tällainen lähestymistapa on kuitenkin aina rajoitettu pääasiassa siksi, että on vaikea saada riittävän suuria määriä puhdistettuja saarekkeita ruumiinluovuttajilta. Yksi vaihtoehto elin- tai kudossiirrolle on käyttää uusiutuvaa solulähdettä. Aikuisten kantasolut ovat klonogeenisiä soluja, jotka kykenevät sekä itseuudistukseen että monilinjaiseen erilaistumiseen. Näillä soluilla on potentiaalia lisääntyä ja erilaistua minkä tahansa tyyppisiksi soluiksi ja olla geneettisesti muunneltuja in vitro, mikä tarjoaa soluja, jotka voidaan eristää ja käyttää transplantaatioon.

Viimeaikaiset tutkimukset ovat antaneet hyvin määritellyt erilaistumisprotokollat, joita voidaan käyttää ohjaamaan kantasoluja tiettyihin solulinjoihin, kuten hermosoluihin, sydänlihassoluihin ja insuliinia erittäviin soluihin. Lisäksi nämä johdetut solut ovat olleet käyttökelpoisia erilaisissa eläinmalleissa. Tässä suhteessa R1-hiiren alkion kantasoluista peräisin olevat insuliinia erittävät solut palauttavat veren glukoosipitoisuudet normaaliksi, kun ne siirretään streptotsotosiinin aiheuttamiin diabeettisiin eläimiin. Ryhmällämme on eristettyjä kantasoluja (Cluster Designated (CD) 34-positiivinen kantasolujen osajoukko), jotka pystyvät erilaistumaan useiksi kudostyypeiksi ex vivo. Määritellyissä olosuhteissa viljelmässä noin 40 prosenttia soluista tuottaa insuliinia ja alentaa verensokeritasoja streptotsotosiinin aiheuttamissa hiirissä.

Kliinisesti olemme suorittaneet vaiheen I kokeen kantasolujen antamisesta potilaille, joilla on maksan vajaatoiminta. Toimenpide oli hyvin siedetty ilman erityisiä sivuvaikutuksia ja kliinisen hyödyn jatkuvia merkkejä. Nämä tulokset tukevat tätä protokollaa aikuisten kantasoluhoidon soveltamiseksi diabeteksen hoidossa.

Arvioidaksemme näiden viimeaikaisten edistysten mahdollisia kliinisiä sovelluksia olemme suunnitelleet prospektiivisen vaiheen I kliinisen tutkimuksen aikuisen CD34-positiivisen alajoukon (InsulinCytes) laajennetuista jälkeläisistä, jotka injektoidaan suoraan osallistujien haiman kehoon ja häntään selektiivisen katetroinnilla. pernan valtimo. Tutkimusryhmä koostuu potilaista, joilla on komplisoitunut tyypin I diabetes ja munuaisensiirto. Tarkoituksena on selvittää, onko tästä kliinistä hyötyä diabeteksen hoitomallina.

Granulosyyttipesäkkeitä stimuloivaa tekijää (G-CSF) annetaan sopiville potilaille heidän hematopoieettisten kantasolujensa (HSC) mobilisoimiseksi luuytimestä perifeeriseen verenkiertoon. Nämä verisolut kerätään jokaiselta potilaalta leukafereesin avulla. CD34-positiiviset kantasolut eristetään sitten immunoseleektiolla ja viedään Nunc-solutehtaaseen, jossa CD34-positiivisten kantasolujen osajoukon annetaan kiinnittyä solutehtaassa oleviin muovialustoihin 2 tunnin ajan 37 asteessa 5-prosenttisessa hiilidioksidissa. . Tämän ajanjakson jälkeen kiinnittymättömät CD34-positiiviset solut pestään järjestelmästä ja supernatanttiväliaineeseen erittyneiden kiinnittyneiden solujen jälkeläisiä laajennetaan kasvutekijöillä täydennetyn kasvualustan läsnä ollessa. Kuuden päivän laajennuksen päätyttyä kantasolut erilaistuvat insuliinia ja c-peptidiproteiinia erittäviksi soluiksi seuraavien 14 päivän aikana lisäämällä määrättyjä reagensseja/kasvutekijöitä ja jatkamalla inkubaatiota 37 asteessa 5 prosentin hiilidioksidissa. hyvän valmistustavan (GMP) periaatteiden mukaisesti. Valinnaisena vaiheena solut voidaan leimata rautaoksidilla, jotta solut voidaan jäljittää magneettikuvauksella (MRI), ennen kuin ne infusoidaan potilaaseen.

Instituutin jatkuva kokemus maksan vajaatoimintapotilaista, joille on infusoitu erilaistumattomia kantasoluja, on osoittanut, että annettu annos jopa 2 x 10 log 9 -solua oli hyvin siedetty. Ehdotettu tutkimusryhmä koostuu 10 tyypin I tai tyypin 2 diabeetikosta, joille on tehty onnistunut munuaisensiirto.

Tutkimuksen ensisijaisena tarkoituksena on arvioida kantasoluinfuusion turvallisuutta ja sietokykyä haimaan ja sitten arvioida tämän uuden menetelmän vaikutusta diabeteksen hoitoon.