Células madre adultas autólogas a pacientes con diabetes tipo 1 y trasplante renal exitoso

El trasplante de islotes como tratamiento potencial para la diabetes se ha investigado ampliamente durante los últimos 10 años. Tal enfoque, sin embargo, siempre estará limitado principalmente porque es difícil obtener un número suficientemente grande de islotes purificados de donantes cadavéricos. Una alternativa al trasplante de órganos o tejidos es utilizar una fuente renovable de células. Las células madre adultas son células clonogénicas capaces tanto de autorrenovación como de diferenciación multilinaje. Estas células tienen el potencial de proliferar y diferenciarse en cualquier tipo de célula y de modificarse genéticamente in vitro, proporcionando así células que pueden aislarse y utilizarse para trasplante.

Estudios recientes han brindado protocolos de diferenciación bien definidos, que pueden usarse para guiar a las células madre hacia linajes celulares específicos como neuronas, cardiomiocitos y células secretoras de insulina. Además, estas células derivadas han sido útiles en diferentes modelos animales. En este sentido, las células secretoras de insulina derivadas de células madre embrionarias de ratón R1 restablecen las concentraciones de glucosa en sangre a la normalidad cuando se trasplantan a animales diabéticos inducidos por estreptozotocina. Nuestro grupo ha aislado células madre (Cluster Designated (CD) 34 subconjunto positivo de células madre) que son capaces de diferenciarse en múltiples tipos de tejido ex vivo. En condiciones definidas, en cultivo, alrededor del 40 por ciento de las células producen insulina y reducen los niveles de azúcar en la sangre en ratones inducidos con estreptozotocina.

Clínicamente, hemos realizado un ensayo de fase I de administración de células madre a pacientes con insuficiencia hepática. El procedimiento fue bien tolerado sin efectos secundarios específicos y con signos sostenidos de beneficio clínico. Estos resultados respaldan este protocolo para la aplicación de la terapia con células madre adultas en el tratamiento de la diabetes.

Con el fin de evaluar las posibles aplicaciones clínicas de estos avances recientes, hemos diseñado un estudio clínico prospectivo de Fase I de la progenie ampliada de un subconjunto adulto CD34 positivo (InsulinCytes) inyectado directamente en el cuerpo y la cola del páncreas de los participantes mediante cateterismo selectivo de la arteria esplénica. El grupo de estudio está formado por pacientes con diabetes mellitus tipo I complicada más trasplante renal con el objetivo de comprobar si este confiere beneficio clínico como modelo de tratamiento de la diabetes.

El factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) se administrará a pacientes adecuados para movilizar sus células madre hematopoyéticas (HSC) desde la médula ósea hacia la circulación periférica. Estas células sanguíneas se recolectarán de cada paciente mediante leucaféresis. Luego, las células madre positivas para CD34 se aislarán mediante inmunoselección y se introducirán en una fábrica de células Nunc, donde se permitirá que el subconjunto de células madre positivas para CD34 se adhiera a las bandejas de plástico dentro de la fábrica de células durante 2 horas a 37 grados C en dióxido de carbono al 5 por ciento. . Después de este período, las células positivas para CD34 no adheridas se lavarán del sistema y la progenie de las células adheridas se secretará en el medio sobrenadante expandido en presencia de medio de crecimiento suplementado con factores de crecimiento. Al final de la expansión de 6 días, las células madre se diferenciarán en células excretoras de insulina y proteína c-péptido durante los próximos 14 días mediante la adición de reactivos/factores de crecimiento específicos y la incubación continua a 37 grados C en dióxido de carbono al 5 por ciento en de acuerdo con los principios de las Buenas Prácticas de Manufactura (GMP). Como paso opcional, las células se pueden etiquetar con óxido de hierro para permitir el seguimiento de las células mediante imágenes de resonancia magnética (IRM), antes de infundirlas al paciente.

Una experiencia continua del instituto con pacientes con insuficiencia hepática que recibieron una infusión de células madre indiferenciadas ha demostrado que se toleró bien una dosis administrada de hasta 2 x 10 log 9 células. El grupo de estudio propuesto constará de 10 pacientes diabéticos tipo I o tipo 2 que hayan tenido un trasplante de riñón anterior exitoso.

El objetivo principal del estudio es evaluar la seguridad y la tolerancia de la infusión de células madre en el páncreas y luego evaluar el impacto de esta nueva modalidad en el tratamiento de la diabetes.