Sammenhæng mellem PM2.5 og Ferroptosis

Baggrund: På trods af den nøjagtige mekanisme for virkningerne af luftforurening (PM2.5) på centralnervesystemet er stadig under debat, er der stigende beviser for, at luftforurening (PM2.5) vil forårsage kognitiv tilbagegang. Det er velkendt, at luftforurening (PM2.5) vil forårsage frigivelse af proinflammatoriske cytokiner ved mikroglia og kognitiv tilbagegang. TNF-α spiller en nøglerolle i kognitiv funktion, og vores tidligere forskning indikerede, at Nrf2 spiller en afgørende rolle i anfaldsinduceret kognitiv funktion (NCT05269901). Hvorvidt PM2.5-induceret TNF-α yderligere vil udløse Nrf2-afhængig ferroptose for at lette kognitiv tilbagegang er stadig uudforsket. Dette kliniske pilotforsøg har til formål at opdage den mulige sammenhæng mellem PM2.5-eksponeringer og ændringerne i TNF-α-niveau og Nrf2-afhængig ferroptose-vej.

Metoder:

1. Efterforskerne analyserer først genekspressionen af ​​GSE60767 fra GEO-databasen (www.ncbi.nlm.nih.gov/geo) ved hjælp af GPL6947-platformen
2. Efterforskerne indskrev 30 personer og aldersmatchede PM2.5-eksponeringer fra to byer (Yangzhou og Xuzhou) som kontrol- og luftforureningsgruppe baseret på tidligere PM2.5-registreringer;
3. Registrerede PM2.5-niveauet i to byer hver 5. dag mellem 2022.12 og 2023.2 (vinter) for at sammenligne forskellen;
4. TNF-α ELISA KIT blev brugt til at sammenligne de proinflammatoriske cytokiner i to grupper
5. 4HNE (4-Hydroxynonenal)ELISA KIT blev brugt til at sammenligne niveauet af lipidereaktive oxygenarter i to grupper
6. Kvantitativ revers transkriptions-PCR (Polymerase Chain Reaction) blev brugt til at sammenligne messenger-ribonukleinsyre (mRNA)-ekspression af den Nrf2-afhængige ferroptose-vej (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Protokol for detaljerede metoder

1. Kilde på PM2.5-niveau: PM2.5-niveauerne blev registreret via data fra ministeriet for økologi og miljø i Folkerepublikken Kina (air.cnemc.cn:18007) 2. Kriterierne for tilmeldte deltagere var som følger: Inklusion: bor i denne by i mere end 3 år; ingen udsættelse for nogen kemiforurening før; Eksklusion: signifikante ændringer i biomarkører (TNF-α, Nrf2, SLC7A11, GPX4) i begyndelsen; neurologiske lidelser; endokrine sygdomme; cancer 3. Prøveindsamling: Ved begyndelsen og slutningen af ​​denne undersøgelse vil den indskrevne deltager komme til hospitalet for at indsamle perifert blod (henholdsvis Northern Jiangsu og Xuzhou center), og blodprøverne vil blive opsamlet i EDTA (ethyleneDiamine tetraeddikemiddel). syre) vacutainerrør og derefter opdelt i leukocytter og plasma til yderligere eksperimenter 4. TNF-α ELISA KIT: Plasma TNF-α koncentrationer blev påvist ved den kompetitive ELISA metode 5. 4HNE (4-Hydroxynonenal) ELISA KIT: Plasma 4HNE koncentrationer blev påvist ved den kompetitive ELISA-metode 6. primersekvens: h-GPX4 fremad: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 omvendt: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 fremad: 5'-TCTCCAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC : 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 frem 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 baglæns 5'- CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH fremad: 5'-GGAGCGAGATCCTCTCCAAAAT-3' baglæns h-GAPD GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'