A PM2.5 és a Ferroptosis közötti társulás

Háttér: Annak ellenére, hogy a légszennyezés (PM2.5) központi idegrendszerre gyakorolt ​​hatásának pontos mechanizmusa még mindig vita tárgyát képezi, egyre több bizonyíték áll rendelkezésre arra vonatkozóan, hogy a levegőszennyezés (PM2.5) kognitív hanyatlást okoz. Köztudott, hogy a levegőszennyezés (PM2.5) mikroglia és kognitív hanyatlás által proinflammatorikus citokinek felszabadulását okozza. A TNF-α kulcsszerepet játszik a kognitív funkciókban, és korábbi kutatásaink azt mutatták, hogy az Nrf2 döntő szerepet játszik a rohamok által kiváltott kognitív funkciókban (NCT05269901). Azonban még nem vizsgálták, hogy a PM2.5-indukált TNF-α tovább váltja-e ki a Nrf2-függő ferroptózist a kognitív hanyatlás elősegítése érdekében. Ennek a kísérleti klinikai vizsgálatnak az a célja, hogy feltárja a lehetséges összefüggést a PM2.5 expozíció és a TNF-α szint változása és az Nrf2-függő ferroptózis útvonal között.

Mód:

1. A kutatók először a GSE60767 génexpresszióját elemzik a GEO adatbázisból (www.ncbi.nlm.nih.gov/geo) a GPL6947 platform segítségével
2. A nyomozók a korábbi PM2,5-rekordok alapján 30 embert és két városból (Jangcsou és Xucsou) PM2.5-expozíciónak megfelelő korosztályú személyt vettek fel a légszennyezés szabályozási és légszennyezési csoportjaként;
3. Rögzítette a PM2,5 szintet két városban 5 naponta 2022.12. és 2023.2. (tél) között, hogy összehasonlítsa a különbséget;
4. TNF-α ELISA KIT-et használtunk a proinflammatorikus citokinek összehasonlítására két csoportban
5. 4HNE (4-Hydroxynonenal) ELISA KIT-et használtunk a lipidreaktív oxigénfajták szintjének összehasonlítására két csoportban.
6. Kvantitatív reverz transzkripciós PCR-t (Polymerase Chain Reaction) alkalmaztunk az Nrf2-függő ferroptózis útvonal (Nrf2, SLC7A11, GPX4) ribonukleinsav (mRNS) expressziójának összehasonlítására. Részletes Methods protokoll.

1. PM2.5 szintű forrás: a PM2.5 szinteket a Kínai Népköztársaság Ökológiai és Környezetvédelmi Minisztériumának adatai (air.cnemc.cn:18007) rögzítették. 2. A beiratkozott résztvevők kritériumai a következők voltak: Bevétel: több mint 3 éve ebben a városban él; korábban nem volt kitéve semmilyen kémiai szennyezésnek; Kizárás: jelentős változások a biomarkerekben (TNF-α, Nrf2, SLC7A11, GPX4) az elején; Neurológiai rendellenességek; endokrin betegségek; rák 3. Mintavétel: A vizsgálat elején és végén a beiratkozott résztvevő a kórházba érkezik, hogy perifériás vért gyűjtsön (Norther Jiangsu, illetve Xuzhou központ), és a vérmintákat EDTA-ba (etilén-diamin-tetraecetsav) gyűjtik. acid) vacutainer csövek, majd leukocitákra és plazmára osztva a további kísérletekhez 4. TNF-α ELISA KIT: A plazma TNF-α koncentrációit kompetitív ELISA módszerrel detektáltuk 5. 4HNE（4-Hydroxynonenal ）ELISA KIT : Plazma 4HNE koncentrációkat detektáltunk kompetitív ELISA módszerrel 6. primer szekvencia: h-GPX4 előre: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 fordított: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 előre: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTAC1h-Reverse : 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 előre 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 hátrafelé 5'- CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH előre: 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3 GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'