Påvisning af unormale respiratoriske cellepopulationer i lungekræftscreeningspatienter ved hjælp af CyPath Lung Assay

Der er adskillige modtagere af forsvarsministeriet (DoD) tilmeldt de forskellige lungekræftscreeningsprogrammer på tværs af DoD. Dette er en prospektiv observationsundersøgelse af sputumcytologi ved hjælp af flowcytometri til at analysere sputumprøver indsamlet fra patienter, der gennemgår årlig lungekræftscreening. Det primære formål med denne undersøgelse er at analysere de cellulære profiler af sputumprøver indsamlet ved hjælp af Acapella®-luftvejsassistenten hos patienter med højere risiko for lungekræft. Målgruppen er højrisikopatienter for at udvikle lungekræft i alderen 50-80 år med en betydelig rygehistorie.

En opspytprøve vil blive indsamlet af patienten over en tre-dages periode derhjemme ved hjælp af Acapella® luftvejsassistent (Smiths Medical). Acapella-apparatet er et ikke-invasivt luftvejsmodstandsapparat, der hjælper med hoste for at rense luftvejsslimhinden hos patienter med bronkiektasi og andre lignende lidelser. Mandlige og kvindelige deltagere, som er i det aktive militær, og som har høj risiko for lungekræft og gennemgår en årlig lavdosis CT (LDCT) af brystet for at vurdere for nye knuder, vil blive tilmeldt. Personer med høj risiko for lungekræft omfatter deltagere, der er 50-80 år gamle, har røget, hvad der svarer til en pakke cigaretter om dagen i 30 år eller mere, og som ikke er holdt op med at ryge i de sidste 15 år. Patienter vil blive udvalgt ud fra tilstedeværelsen eller fraværet af nye CT-fund; halvdelen af ​​kohorten vil ikke have nye CT-fund, og den anden halvdel af kohorten vil have nye ændringer på CT, der tyder på mulig malignitet.

Deltagere, der underskriver et informeret samtykke og opfylder inklusions-/eksklusionskriterierne, vil blive tilmeldt forskningsstudiet. Sputumprøven vil blive indsamlet af deltageren derhjemme over en periode på tre (3) dage (1 prøve/dag) ved hjælp af Acapella© luftvejsassistenten i overensstemmelse med enhedens instruktioner. Forsøgspersonerne samler deres 3 sputumprøver i en opsamlingskop og returnerer koppen til indsamlingsstedet på Brooke Army Medical Center Pulmonary Clinic inden for 2 uger efter at have afsluttet deres planlagte LDCT. Deltagerne vil bruge Acapella® til at løsne deres slim og hjælpe med opsamlingen af ​​sputumprøven. Studiekoordinatoren vil instruere deltageren ved besøg 1 i brugen af ​​Acapella® i overensstemmelse med enhedens instruktioner. Efter brug af acapella® vil deltageren blive instrueret i at vente fem minutter på, at slim samler sig bagerst i halsen og derefter begynde at huffe hoste for at uddrive opspyt. Deltageren vil derefter blive instrueret i at spytte opspyt uden at skrabe halsen ved at hoste i prøveopsamlingskoppen. Deltagerne skal modtage en opsamlingskop, Acapella®-enheden og instruktioner med hjem. Deltagerne bør samle alle tre prøver i den enkelte indsamlingsbæger over tre dage derhjemme. Efter den tredje sputumopsamling derhjemme ved brug af Acapella®, vil deltageren returnere den kombinerede sputumprøve i én opsamlingsbæger til opsamlingsstedet.

Ved modtagelse på indsamlingsstedet vil sputumprøver blive nedkølet og sendt samme dag, hvis det er muligt, med en kold pakke til bioAffinity (BA) laboratoriet til behandling ved hjælp af CyPath Lung Assay. Indsamling af data om celler i sputumprøverne vil blive udført af BA-forskere ved hjælp af Navios flowcytometer hos Precision Pathology Services (PPS).

Sputumprøver vil blive opsamlet i en steril opsamlingskop uden konserveringsmiddel og opbevaret på køl (2-8 °C) indtil forsendelse. Patienterne vil opbevare deres prøver på køl, indtil de leveres til lungeklinikken. Prøver vil blive opbevaret på køl i lungeklinikken indtil forsendelse. På BA-laboratorierne vil prøven blive behandlet, mærket med antistoffer og farvestoffer for at identificere cellepopulationer, og derefter vil data blive indsamlet og analyseret ved flowcytometri. Prøvebehandling vil blive udført under en sikkerhedshætte. Forberedelse af sputumprøve til flowcytometrianalyse består af kemisk dissociation af sputum for at producere en enkelt cellesuspensionsprøve, der er mærket med fluorescensmærkede antistoffer, der adskiller leukocytpopulationer såsom granulocytter, alveolære makrofager og T- og B-lymfocytter. Antistoffer farver også specifikt ikke-inflammatoriske celletyper såsom pladeepitelceller i sputum. Sputumprøven er mærket med det fluorescerende porphyrin meso-tetra-(4-carboxyphenyl) (TCPP), der fortrinsvis binder til kræftceller og kræftrelaterede celler i sputum. En levedygtighedsfarvning bruges til at fjerne døde celler fra analysen, herunder kontaminerende pladeepitelceller (kindceller). Gatestrategien udelukker også dubletter og snavs fra analyse. Tilstedeværelsen af ​​alveolære makrofager bekræfter, at prøven er fra luftvejene.

Prøver indsamlet af indsamlingsstedet vil ikke blive mærket med emneidentifikation ud over unikt tildelte forsøgsdeltagernumre. Den person, der er ansvarlig for at tiltræde prøverne, vil ikke være den samme person, der udfører nogen af ​​analyserne. Derfor vil BA-forskere blive blindet med hensyn til deltagernes identitet.

Forskere, der er blindet for deltagerens identitet, vil udføre de eksperimenter, der sammenligner prøvernes egenskaber. Resultater fra denne forskning vil ikke blive givet til udbydere til at diagnosticere malignitet hos deltagere eller brugt i efterfølgende behandlingsbeslutninger.

Hvis prøveindsamlingen er utilstrækkelig, vil patienterne få et enkelt ekstra samlingssæt til at genindsende sputumprøven.

Følgende kliniske data vil blive indsamlet for hver patient.

1. Demografi (alder, køn, højde, vægt)
2. Medicinsk og kirurgisk historie omfatter lungesygdomme.
3. Medicinbrug
4. Rygehistorie
5. Resultater fra den seneste lavdosis-CT (LDCT) for tilstedeværelse/fravær af nye fund.