Detecção de Populações de Células Respiratórias Anormais em Pacientes de Triagem de Câncer de Pulmão Usando o Ensaio CyPath Lung

Existem inúmeros beneficiários do Departamento de Defesa (DoD) inscritos nos vários programas de triagem de câncer de pulmão em todo o DoD. Este é um estudo observacional prospectivo de citologia de escarro usando citometria de fluxo para analisar amostras de escarro coletadas de pacientes submetidos a rastreamento anual de câncer de pulmão. O objetivo principal deste estudo é analisar os perfis celulares de amostras de escarro coletadas com o auxílio do dispositivo de assistência às vias aéreas Acapella® em pacientes com maior risco de câncer de pulmão. A população-alvo são pacientes de alto risco para desenvolver câncer de pulmão, com idade entre 50 e 80 anos e histórico significativo de tabagismo.

Uma amostra de escarro será coletada pelo paciente durante um período de três dias em casa, usando o dispositivo de assistência às vias aéreas Acapella® (Smiths Medical). O dispositivo Acapella é um dispositivo não invasivo de resistência das vias aéreas para auxiliar na tosse para limpar a mucosa das vias aéreas em pacientes com bronquiectasia e outros distúrbios semelhantes. Serão inscritos participantes masculinos e femininos que estão no exército ativo e que estão em alto risco de câncer de pulmão e submetidos a uma TC anual de baixa dose (LDCT) do tórax para avaliar novos nódulos. Indivíduos com alto risco de câncer de pulmão incluem participantes com 50 a 80 anos de idade, que fumaram o equivalente a um maço de cigarros por dia por 30 anos ou mais e que não pararam de fumar nos últimos 15 anos. Os pacientes serão selecionados na presença ou ausência de novos achados tomográficos; metade da coorte não terá novos achados na TC e a outra metade terá novas alterações na TC sugestivas de possível malignidade.

Os participantes que assinarem um consentimento informado e satisfizerem os critérios de inclusão/exclusão serão incluídos no estudo de pesquisa. A amostra de escarro será coletada pelo participante em casa durante um período de três (3) dias (1 amostra/dia) usando o dispositivo Acapella© de assistência às vias aéreas de acordo com as instruções do dispositivo. Os indivíduos reunirão suas 3 amostras de escarro em um copo de coleta e devolverão o copo ao local de coleta na Clínica Pulmonar do Brooke Army Medical Center dentro de 2 semanas após a conclusão do LDCT agendado. Os participantes usarão o Acapella® para soltar o muco e auxiliar na coleta da amostra de escarro. O coordenador do estudo instruirá o participante na Visita 1 no uso do Acapella® de acordo com as instruções do dispositivo. Após o uso da acapella®, o participante será instruído a aguardar cinco minutos para que o muco se acumule no fundo da garganta e, a partir daí, comece a tossir para expelir o escarro. O participante será então instruído a cuspir escarro sem raspar a garganta tossindo no copo de coleta de amostra. Os participantes devem receber um copo coletor, o aparelho Acapella® e instruções para levar para casa. Os participantes devem coletar todas as três amostras em um único copo de coleta durante três dias em casa. Após a terceira coleta de escarro em casa com o Acapella®, o participante devolverá a amostra de escarro combinada em um copo coletor ao local de coleta.

Após o recebimento no local de coleta, as amostras de escarro serão refrigeradas e enviadas no mesmo dia, se possível, com uma embalagem fria para o laboratório bioAffinity (BA) para processamento usando o CyPath Lung Assay. A aquisição de dados de células nas amostras de escarro será feita por pesquisadores BA usando o citômetro de fluxo Navios no Precision Pathology Services (PPS).

As amostras de escarro serão coletadas em um copo coletor estéril sem conservante e mantidas refrigeradas (2-8 °C) até o envio. Os pacientes manterão seus espécimes refrigerados até serem entregues na Clínica Pulmonar. As amostras serão mantidas refrigeradas na Clínica Pulmonar até o envio. Nos laboratórios da BA, a amostra será processada, marcada com anticorpos e corantes para identificação de populações celulares, e a partir daí os dados serão adquiridos e analisados ​​por citometria de fluxo. O processamento da amostra será realizado sob um capuz de segurança. A preparação da amostra de escarro para análise por citometria de fluxo consiste na dissociação química do escarro para produzir uma única amostra de suspensão de células marcada com anticorpos fluorescentes que distinguem populações de leucócitos, como granulócitos, macrófagos alveolares e linfócitos T e B. Os anticorpos também coram especificamente tipos de células não inflamatórias, como células epiteliais escamosas no escarro. A amostra de escarro é marcada com a porfirina fluorescente meso-tetra-(4-carboxifenil) (TCPP) que se liga preferencialmente a células cancerígenas e células relacionadas ao câncer no escarro. Uma coloração de viabilidade é usada para eliminar células mortas da análise, incluindo células epiteliais escamosas contaminantes (células da bochecha). A estratégia de gating também exclui dubletos e detritos da análise. A presença de macrófagos alveolares confirma que a amostra é das vias aéreas.

Os espécimes coletados pelo local de coleta não serão rotulados com identificação do sujeito além dos números de participante do estudo atribuídos de forma exclusiva. O responsável pelo acesso às amostras não será a mesma pessoa que realizará qualquer um dos ensaios. Consequentemente, os pesquisadores da BA serão cegados quanto à identidade dos participantes.

Pesquisadores cegos para a identidade do participante realizarão os experimentos que comparam as características das amostras. Os resultados desta pesquisa não serão fornecidos aos provedores para diagnosticar malignidade nos participantes ou utilizados em decisões de tratamento subsequentes.

Se a coleta da amostra for inadequada, os pacientes receberão um único kit de coleta adicional para reenviar a amostra de escarro.

Os seguintes dados clínicos serão coletados para cada paciente.

1. Dados demográficos (idade, sexo, altura, peso)
2. História médica e cirúrgica para incluir doenças pulmonares.
3. Uso de medicamentos
4. Histórico de tabagismo
5. Resultados da TC de baixa dose mais recente (LDCT) para a presença/ausência de novos achados.