Detección de poblaciones de células respiratorias anómalas en pacientes sometidos a cribado de cáncer de pulmón mediante el ensayo pulmonar CyPath

Hay numerosos beneficiarios del Departamento de Defensa (DoD) inscritos en los diversos programas de detección de cáncer de pulmón en todo el DoD. Este es un estudio observacional prospectivo de citología de esputo que utiliza citometría de flujo para analizar muestras de esputo recolectadas de pacientes que se someten a exámenes anuales de detección de cáncer de pulmón. El objetivo principal de este estudio es analizar los perfiles celulares de las muestras de esputo recolectadas con la ayuda del dispositivo de asistencia para las vías respiratorias Acapella® en pacientes con mayor riesgo de cáncer de pulmón. La población diana son pacientes de alto riesgo de desarrollar cáncer de pulmón, de 50 a 80 años de edad con antecedentes de tabaquismo significativo.

El paciente recolectará una muestra de esputo durante un período de tres días en el hogar utilizando el dispositivo de asistencia para las vías respiratorias Acapella® (Smiths Medical). El dispositivo Acapella es un dispositivo de resistencia de las vías respiratorias no invasivo que ayuda a toser para despejar la mucosidad de las vías respiratorias en pacientes con bronquiectasias y otros trastornos similares. Se inscribirán participantes masculinos y femeninos que estén en el ejército activo y que tengan un alto riesgo de cáncer de pulmón y que se sometan a una tomografía computarizada de tórax (LDCT) de dosis baja anual para evaluar si hay nuevos nódulos. Las personas con alto riesgo de cáncer de pulmón incluyen participantes que tienen entre 50 y 80 años, que han fumado el equivalente a un paquete de cigarrillos al día durante 30 años o más y que no han dejado de fumar en los últimos 15 años. Los pacientes serán seleccionados según la presencia o ausencia de nuevos hallazgos en la TC; la mitad de la cohorte no tendrá nuevos hallazgos en la TC y la otra mitad de la cohorte tendrá nuevos cambios en la TC que sugieran una posible malignidad.

Los participantes que firmen un consentimiento informado y cumplan con los criterios de inclusión/exclusión serán inscritos en el estudio de investigación. El participante recolectará la muestra de esputo en su casa durante un período de tres (3) días (1 muestra/día) utilizando el dispositivo de asistencia para las vías respiratorias Acapella© de acuerdo con las instrucciones del dispositivo. Los sujetos juntarán sus 3 muestras de esputo en un recipiente de recolección y devolverán el recipiente al sitio de recolección en la Clínica Pulmonar del Centro Médico Brooke Army dentro de las 2 semanas posteriores a completar su LDCT programada. Los participantes usarán Acapella® para aflojar la mucosidad y ayudar en la recolección de la muestra de esputo. El coordinador del estudio instruirá al participante en la Visita 1 sobre el uso de Acapella® de acuerdo con las instrucciones del dispositivo. Después del uso de acapella®, se indicará al participante que espere cinco minutos hasta que se acumule mucosidad en la parte posterior de la garganta y luego comience a resoplar para expulsar el esputo. Luego, se le indicará al participante que escupa esputo sin rasparse la garganta al toser en la copa de recolección de muestras. Los participantes deben recibir un vaso de recolección, el dispositivo Acapella® e instrucciones para llevar a casa. Los participantes deben recolectar las tres muestras en la taza de recolección única durante tres días en casa. Después de la tercera recolección de esputo en el hogar con Acapella®, el participante devolverá la muestra de esputo combinada en un recipiente de recolección al sitio de recolección.

Una vez recibidas en el sitio de recolección, las muestras de esputo se refrigerarán y se enviarán el mismo día, si es posible, con una compresa fría al laboratorio de bioAffinity (BA) para su procesamiento con el ensayo pulmonar CyPath. Los investigadores de BA realizarán la adquisición de datos sobre las células en las muestras de esputo utilizando el citómetro de flujo Navios en Precision Pathology Services (PPS).

Las muestras de esputo se recolectarán en una copa de recolección estéril sin conservantes y se mantendrán refrigeradas (2-8 °C) hasta el envío. Los pacientes mantendrán sus muestras refrigeradas hasta que sean enviadas a la Clínica Pulmonar. Las muestras se mantendrán refrigeradas en la Clínica Pulmonar hasta su envío. En los laboratorios de BA, la muestra se procesará, se marcará con anticuerpos y colorantes para identificar las poblaciones celulares y, posteriormente, se adquirirán y analizarán los datos mediante citometría de flujo. El procesamiento de muestras se realizará bajo una campana de seguridad. La preparación de muestras de esputo para el análisis de citometría de flujo consiste en la disociación química del esputo para producir una muestra de suspensión de una sola célula que se marca con anticuerpos marcados con fluorescencia que distinguen poblaciones de leucocitos como granulocitos, macrófagos alveolares y linfocitos T y B. Los anticuerpos también tiñen específicamente tipos de células no inflamatorias como las células epiteliales escamosas en el esputo. La muestra de esputo se marca con la porfirina fluorescente meso-tetra-(4-carboxifenil) (TCPP) que se une preferentemente a las células cancerosas y las células relacionadas con el cáncer en el esputo. Se utiliza una tinción de viabilidad para eliminar las células muertas del análisis, incluidas las células epiteliales escamosas contaminantes (células de la mejilla). La estrategia de selección también excluye los dobletes y los desechos del análisis. La presencia de macrófagos alveolares confirma que la muestra procede de las vías respiratorias.

Los especímenes recolectados por el sitio de recolección no se etiquetarán con la identificación del sujeto que no sea el número de participante del estudio asignado de manera única. La persona responsable de acceder a las muestras no será la misma persona que realice cualquiera de los ensayos. En consecuencia, los investigadores de BA no conocerán la identidad de los participantes.

Los investigadores que desconocen la identidad del participante realizarán los experimentos que comparan las características de las muestras. Los resultados de esta investigación no se entregarán a los proveedores para diagnosticar malignidad en los participantes ni se utilizarán en decisiones de tratamiento posteriores.

Si la recolección de la muestra es inadecuada, los pacientes recibirán un único kit de recolección adicional para volver a enviar la muestra de esputo.

Se recogerán los siguientes datos clínicos de cada paciente.

1. Datos demográficos (edad, sexo, altura, peso)
2. Antecedentes médicos y quirúrgicos que incluyan enfermedades pulmonares.
3. uso de medicamentos
4. Historial de tabaquismo
5. Resultados de la TC de dosis baja (LDCT) más reciente para la presencia/ausencia de nuevos hallazgos.