Påvisning av unormale respiratoriske cellepopulasjoner hos lungekreftscreeningspasienter ved bruk av CyPath Lung Assay

Det er mange mottakere av forsvarsdepartementet (DoD) registrert i de forskjellige lungekreftscreeningsprogrammene over hele DoD. Dette er en prospektiv observasjonsstudie av sputumcytologi ved bruk av flowcytometri for å analysere sputumprøver samlet fra pasienter som gjennomgår årlig lungekreftscreening. Hovedmålet med denne studien er å analysere celleprofilene til sputumprøver samlet inn ved hjelp av Acapella® luftveisassistent hos pasienter med høyere risiko for lungekreft. Målpopulasjonen er høyrisikopasienter for å utvikle lungekreft i alderen 50-80 år med en betydelig røykehistorie.

En sputumprøve vil bli samlet av pasienten over en tre-dagers periode hjemme ved hjelp av Acapella® luftveisassistent (Smiths Medical). Acapella-apparatet er et ikke-invasivt luftveismotstandsapparat for å hjelpe med hoste for å fjerne slim i luftveiene hos pasienter med bronkiektasi og andre lignende lidelser. Mannlige og kvinnelige deltakere som er i det aktive militæret og som har høy risiko for lungekreft og som gjennomgår en årlig lavdose CT (LDCT) av brystet for å vurdere nye knuter, vil bli registrert. Personer med høy risiko for lungekreft inkluderer deltakere som er 50-80 år gamle, har røykt tilsvarende en pakke sigaretter om dagen i 30 år eller mer, og som ikke har sluttet å røyke de siste 15 årene. Pasienter vil bli valgt på tilstedeværelse eller fravær av nye CT-funn; halvparten av kohorten vil ikke ha nye CT-funn og den andre halvparten av kohorten vil ha nye endringer på CT som tyder på mulig malignitet.

Deltakere som signerer et informert samtykke og tilfredsstiller inkluderings-/eksklusjonskriteriene vil bli registrert i forskningsstudien. Oppspyttprøven vil bli samlet inn av deltakeren hjemme i løpet av en tre (3) dagers periode (1 prøve/dag) ved å bruke Acapella© luftveisassistanse i samsvar med enhetens instruksjoner. Forsøkspersonene vil slå sammen sine 3 sputumprøver i én oppsamlingsbeger og returnere koppen til innsamlingsstedet ved Brooke Army Medical Center Pulmonary Clinic innen 2 uker etter at de har fullført sin planlagte LDCT. Deltakerne vil bruke Acapella® for å løsne slimet og hjelpe til med innsamlingen av sputumprøven. Studiekoordinatoren vil instruere deltakeren ved besøk 1 i bruken av Acapella® i samsvar med utstyrsinstruksjonene. Etter bruk av acapella® vil deltakeren bli bedt om å vente fem minutter til slim samler seg bak i halsen og deretter begynne å huffe hoste for å drive ut oppspytt. Deltakeren vil deretter bli bedt om å spytte oppspytt uten å skrape halsen ved å hoste inn i prøvetakingskoppen. Deltakerne bør motta en samlekopp, Acapella®-enheten og instruksjoner med hjem. Deltakerne bør samle alle tre prøvene i den enkle samlebegeret over tre dager hjemme. Etter den tredje sputumsamlingen hjemme ved bruk av Acapella®, vil deltakeren returnere den kombinerte sputumprøven i en samlebeger til innsamlingsstedet.

Ved mottak av oppsamlingsstedet vil sputumprøver bli avkjølt og sendt samme dag, hvis mulig, med en kald pakke til bioAffinity (BA) laboratoriet for behandling ved bruk av CyPath Lung Assay. Innsamling av data om celler i sputumprøvene vil bli gjort av BA-forskere ved bruk av Navios flowcytometer ved Precision Pathology Services (PPS).

Sputumprøver vil bli samlet i en steril oppsamlingsbeger uten konserveringsmiddel og oppbevares i kjøleskap (2-8 °C) frem til forsendelse. Pasienter vil oppbevare prøvene sine nedkjølt til de leveres til lungeklinikken. Prøver vil bli oppbevart nedkjølt i lungeklinikken frem til forsendelse. Ved BA-laboratoriene vil prøven bli behandlet, merket med antistoffer og fargestoffer for å identifisere cellepopulasjoner, og deretter vil data innhentes og analyseres ved hjelp av flowcytometri. Prøvebehandling vil bli utført under en sikkerhetshette. Sputumprøveforberedelse for flowcytometrianalyse består av kjemisk dissosiasjon av sputum for å produsere en enkelt cellesuspensjonsprøve som er merket med fluorescerende merkede antistoffer som skiller leukocyttpopulasjoner som granulocytter, alveolære makrofager og T- og B-lymfocytter. Antistoffer farger også spesifikt ikke-inflammatoriske celletyper som plateepitelceller i sputum. Sputumprøven er merket med det fluorescerende porfyrin meso-tetra-(4-carboxyphenyl) (TCPP) som fortrinnsvis binder seg til kreftceller og kreftrelaterte celler i sputum. En levedyktighetsflekk brukes til å eliminere døde celler fra analysen, inkludert kontaminerende plateepitelceller (kinnceller). Gatestrategien ekskluderer også dubletter og rusk fra analyse. Tilstedeværelsen av alveolære makrofager bekrefter at prøven er fra luftveiene.

Prøver som samles inn av innsamlingsstedet vil ikke merkes med annet emneidentifikasjon enn unikt tildelte studiedeltakernummer. Personen som er ansvarlig for å få tilgang til prøvene vil ikke være den samme personen som utfører noen av analysene. Følgelig vil BA-forskere bli blendet når det gjelder identiteten til deltakerne.

Forskere som er blindet for deltakerens identitet vil utføre eksperimentene som sammenligner egenskapene til prøvene. Funn fra denne forskningen vil ikke bli gitt til leverandører for å diagnostisere malignitet hos deltakere eller brukt i påfølgende behandlingsbeslutninger.

Hvis prøvetakingen er utilstrekkelig, vil pasientene få et enkelt ekstra samlingssett for å sende inn sputumprøven på nytt.

Følgende kliniske data vil bli samlet inn for hver pasient.

1. Demografi (alder, kjønn, høyde, vekt)
2. Medisinsk og kirurgisk historie for å inkludere lungesykdommer.
3. Medisinbruk
4. Røykehistorie
5. Resultater fra siste lavdose-CT (LDCT) for tilstedeværelse/fravær av nye funn.