Rilevamento di popolazioni di cellule respiratorie anomale nei pazienti sottoposti a screening per carcinoma polmonare mediante il test CyPath Lung

Ci sono numerosi beneficiari del Dipartimento della Difesa (DoD) iscritti ai vari programmi di screening del cancro del polmone in tutto il DoD. Questo è uno studio osservazionale prospettico sulla citologia dell'espettorato che utilizza la citometria a flusso per analizzare i campioni di espettorato raccolti da pazienti sottoposti a screening annuale del cancro del polmone. L'obiettivo principale di questo studio è analizzare i profili cellulari dei campioni di espettorato raccolti con l'assistenza del dispositivo di assistenza delle vie aeree Acapella® in pazienti a più alto rischio di cancro ai polmoni. La popolazione target è costituita da pazienti ad alto rischio di sviluppare il cancro ai polmoni, di età compresa tra 50 e 80 anni con una significativa storia di fumo.

Un campione di espettorato verrà raccolto dal paziente per un periodo di tre giorni a casa utilizzando il dispositivo di assistenza delle vie aeree Acapella® (Smiths Medical). Il dispositivo Acapella è un dispositivo di resistenza delle vie aeree non invasivo per assistere con la tosse per liberare le mucose delle vie aeree nei pazienti con bronchiectasie e altri disturbi simili. Verranno arruolati partecipanti di sesso maschile e femminile che sono nell'esercito attivo e che sono ad alto rischio di cancro ai polmoni e sottoposti a TC annuale a basso dosaggio (LDCT) del torace per valutare nuovi noduli. Gli individui ad alto rischio di cancro ai polmoni includono partecipanti di età compresa tra 50 e 80 anni, che hanno fumato l'equivalente di un pacchetto di sigarette al giorno per 30 anni o più e che non hanno smesso di fumare negli ultimi 15 anni. I pazienti saranno selezionati in base alla presenza o assenza di nuovi reperti TC; metà della coorte non avrà nuovi reperti TC e l'altra metà della coorte presenterà nuovi cambiamenti alla TC suggestivi di possibile malignità.

I partecipanti che firmano un consenso informato e soddisfano i criteri di inclusione/esclusione verranno arruolati nello studio di ricerca. Il campione di espettorato verrà raccolto dal partecipante a casa per un periodo di tre (3) giorni (1 campione/giorno) utilizzando il dispositivo di assistenza delle vie aeree Acapella© secondo le istruzioni del dispositivo. I soggetti riuniranno i loro 3 campioni di espettorato in una tazza di raccolta e restituiranno la tazza al sito di raccolta presso la Brooke Army Medical Center Pulmonary Clinic entro 2 settimane dopo aver completato il loro LDCT programmato. I partecipanti useranno l'Acapella® per sciogliere il muco e aiutare nella raccolta del campione di espettorato. Il coordinatore dello studio istruirà il partecipante alla Visita 1 sull'uso di Acapella® secondo le istruzioni del dispositivo. Dopo l'uso dell'acapella®, al partecipante verrà chiesto di attendere cinque minuti affinché il muco si raccolga nella parte posteriore della gola e quindi iniziare a sbuffare la tosse per espellere l'espettorato. Il partecipante verrà quindi istruito a sputare espettorato senza grattarsi la gola tossendo nella tazza di raccolta del campione. I partecipanti dovrebbero ricevere una tazza di raccolta, il dispositivo Acapella® e le istruzioni da portare a casa. I partecipanti devono raccogliere tutti e tre i campioni nella singola tazza di raccolta per tre giorni a casa. Dopo la terza raccolta di espettorato a casa utilizzando l'Acapella®, il partecipante restituirà il campione di espettorato combinato in una tazza di raccolta al sito di raccolta.

Al momento della ricezione da parte del sito di raccolta, i campioni di espettorato verranno refrigerati e spediti lo stesso giorno, se possibile, con un impacco freddo al laboratorio di bioAffinity (BA) per l'elaborazione utilizzando il CyPath Lung Assay. L'acquisizione dei dati sulle cellule nei campioni di espettorato sarà effettuata dai ricercatori BA utilizzando il citometro a flusso Navios presso i Precision Pathology Services (PPS).

I campioni di espettorato saranno raccolti in una tazza di raccolta sterile senza conservanti e conservati in frigorifero (2-8 °C) fino alla spedizione. I pazienti manterranno i loro campioni refrigerati fino alla consegna alla clinica polmonare. I campioni saranno conservati refrigerati nella clinica polmonare fino alla spedizione. Presso i laboratori BA, il campione sarà processato, marcato con anticorpi e coloranti per identificare le popolazioni cellulari, e successivamente i dati saranno acquisiti e analizzati mediante citometria a flusso. L'elaborazione del campione sarà eseguita sotto una cappa di sicurezza. La preparazione del campione di espettorato per l'analisi della citometria a flusso consiste nella dissociazione chimica dell'espettorato per produrre un campione di sospensione a singola cellula etichettato con anticorpi marcati in modo fluorescente che distingue le popolazioni di leucociti come granulociti, macrofagi alveolari e linfociti T e B. Gli anticorpi inoltre colorano in modo specifico i tipi di cellule non infiammatorie come le cellule epiteliali squamose nell'espettorato. Il campione di espettorato è etichettato con la porfirina fluorescente meso-tetra-(4-carbossifenil) (TCPP) che si lega preferenzialmente alle cellule tumorali e alle cellule tumorali nell'espettorato. Una macchia di vitalità viene utilizzata per eliminare le cellule morte dall'analisi, comprese le cellule epiteliali squamose contaminanti (cellule della guancia). La strategia di gating esclude anche doppietti e detriti dall'analisi. La presenza di macrofagi alveolari conferma che il campione proviene dalle vie aeree.

I campioni raccolti dal sito di raccolta non saranno etichettati con l'identificazione del soggetto diversa dai numeri dei partecipanti allo studio assegnati in modo univoco. L'individuo responsabile dell'accesso ai campioni non sarà la stessa persona che esegue nessuno dei test. Di conseguenza, i ricercatori BA saranno ciechi sull'identità dei partecipanti.

I ricercatori all'oscuro dell'identità del partecipante eseguiranno gli esperimenti che confrontano le caratteristiche dei campioni. I risultati di questa ricerca non saranno forniti ai fornitori per diagnosticare la malignità nei partecipanti o utilizzati nelle successive decisioni terapeutiche.

Se la raccolta del campione è inadeguata, ai pazienti verrà fornito un unico kit di raccolta aggiuntivo per inviare nuovamente il campione di espettorato.

Per ogni paziente verranno raccolti i seguenti dati clinici.

1. Dati demografici (età, sesso, altezza, peso)
2. Anamnesi medica e chirurgica per includere malattie polmonari.
3. Uso di farmaci
4. Storia del fumo
5. Risultati della più recente TC a basso dosaggio (LDCT) per la presenza/assenza di nuove scoperte.