Wykrywanie nieprawidłowych populacji komórek oddechowych u pacjentów przesiewowych w kierunku raka płuc za pomocą testu płuc CyPath

Istnieje wielu beneficjentów Departamentu Obrony (DoD) zapisanych do różnych programów badań przesiewowych w kierunku raka płuc w całym DoD. Jest to prospektywne badanie obserwacyjne cytologii plwociny z wykorzystaniem cytometrii przepływowej do analizy próbek plwociny pobranych od pacjentów poddawanych corocznym badaniom przesiewowym w kierunku raka płuc. Głównym celem tego badania jest analiza profili komórkowych próbek plwociny pobranych za pomocą urządzenia wspomagającego drogi oddechowe Acapella® u pacjentów z podwyższonym ryzykiem raka płuc. Populacją docelową są pacjenci wysokiego ryzyka zachorowania na raka płuca, w wieku 50-80 lat, ze znaczną historią palenia.

Próbka plwociny zostanie pobrana przez pacjenta w ciągu trzech dni w domu przy użyciu urządzenia wspomagającego drogi oddechowe Acapella® (Smiths Medical). Urządzenie Acapella jest nieinwazyjnym urządzeniem służącym do wspomagania odkrztuszania śluzu w drogach oddechowych u pacjentów z rozstrzeniami oskrzeli i innymi podobnymi zaburzeniami. Zostaną zapisani uczestnicy płci męskiej i żeńskiej, którzy są w czynnej służbie wojskowej i którzy są w grupie wysokiego ryzyka raka płuc i przechodzą coroczną tomografię komputerową klatki piersiowej z niską dawką (LDCT) w celu oceny nowych guzków. Osoby z grupy wysokiego ryzyka zachorowania na raka płuc to osoby w wieku 50-80 lat, które paliły równowartość jednej paczki papierosów dziennie przez 30 lat lub więcej i które nie rzuciły palenia w ciągu ostatnich 15 lat. Pacjenci zostaną wybrani na podstawie obecności lub braku nowych wyników tomografii komputerowej; połowa kohorty nie będzie miała nowych zmian w tomografii komputerowej, a druga połowa kohorty będzie miała nowe zmiany w tomografii komputerowej sugerujące możliwą złośliwość.

Uczestnicy, którzy podpiszą świadomą zgodę i spełnią kryteria włączenia/wyłączenia, zostaną włączeni do badania. Próbka plwociny zostanie pobrana przez uczestnika w domu przez okres trzech (3) dni (1 próbka dziennie) przy użyciu urządzenia wspomagającego drogi oddechowe Acapella© zgodnie z instrukcją urządzenia. Pacjenci zbiorą 3 próbki plwociny do jednego pojemnika do pobierania i zwrócą pojemnik do miejsca pobrania w Klinice Płuc Centrum Medycznego Brooke Army w ciągu 2 tygodni po zakończeniu zaplanowanej LDCT. Uczestnicy będą używać Acapella®, aby rozluźnić śluz i pomóc w pobraniu próbki plwociny. Koordynator badania poinstruuje uczestnika podczas Wizyty 1 w zakresie korzystania z Acapella® zgodnie z instrukcją obsługi urządzenia. Po użyciu acapella® uczestnik zostanie poinstruowany, aby odczekał pięć minut na zebranie się śluzu w tylnej części gardła, a następnie zaczął kaszleć w celu wydalenia plwociny. Następnie uczestnik zostanie poinstruowany, aby pluł plwociną bez drapania gardła przez kaszel do pojemnika do pobierania próbek. Uczestnicy powinni otrzymać kubek do zbiórki, urządzenie Acapella® oraz instrukcję zabrania do domu. Uczestnicy powinni pobrać wszystkie trzy próbki do pojedynczego pojemnika w ciągu trzech dni w domu. Po trzecim pobraniu plwociny w domu za pomocą Acapella®, uczestnik zwróci połączoną próbkę plwociny w jednym pojemniku do pobierania do miejsca pobrania.

Po otrzymaniu przez miejsce pobrania próbki plwociny zostaną schłodzone i wysłane tego samego dnia, jeśli to możliwe, z zimnym opakowaniem do laboratorium bioAffinity (BA) w celu przetworzenia przy użyciu testu CyPath Lung Assay. Akwizycja danych na temat komórek w próbkach plwociny zostanie przeprowadzona przez badaczy BA przy użyciu cytometru przepływowego Navios w Precision Pathology Services (PPS).

Próbki plwociny zostaną pobrane do sterylnego pojemnika do pobierania bez środków konserwujących i będą przechowywane w lodówce (2-8 °C) do czasu wysyłki. Pacjenci będą przechowywać próbki w lodówce do czasu dostarczenia ich do kliniki pulmonologicznej. Próbki będą przechowywane w lodówce w klinice pulmonologicznej do czasu wysyłki. W laboratoriach BA próbka zostanie przetworzona, wyznakowana przeciwciałami i barwnikami w celu identyfikacji populacji komórek, a następnie dane zostaną zebrane i przeanalizowane za pomocą cytometrii przepływowej. Przetwarzanie próbek będzie przeprowadzane pod kapturem ochronnym. Przygotowanie próbki plwociny do analizy cytometrii przepływowej polega na chemicznej dysocjacji plwociny w celu wytworzenia próbki zawiesiny pojedynczych komórek, która jest znakowana fluorescencyjnie znakowanymi przeciwciałami, które rozróżniają populacje leukocytów, takie jak granulocyty, makrofagi pęcherzykowe oraz limfocyty T i B. Przeciwciała wybarwiają również specyficznie niezapalne typy komórek, takie jak komórki nabłonka płaskiego w plwocinie. Próbka plwociny jest znakowana fluorescencyjną porfiryną mezo-tetra-(4-karboksyfenylo) (TCPP), która preferencyjnie wiąże się z komórkami nowotworowymi i komórkami nowotworowymi w plwocinie. Barwienie żywotności służy do wyeliminowania z analizy martwych komórek, w tym zanieczyszczających komórek nabłonka płaskiego (komórek policzkowych). Strategia bramkowania wyklucza również dublety i pozostałości z analizy. Obecność makrofagów pęcherzykowych potwierdza, że ​​próbka pochodzi z dróg oddechowych.

Próbki pobrane przez miejsce pobrania nie będą oznaczone identyfikatorami podmiotu innymi niż jednoznacznie przypisane numery uczestników badania. Osoba odpowiedzialna za dostęp do próbek nie będzie tą samą osobą, która przeprowadza którykolwiek z testów. W rezultacie badacze BA będą zaślepieni co do tożsamości uczestników.

Naukowcy nie znający tożsamości uczestnika przeprowadzą eksperymenty porównujące cechy próbek. Wyniki tych badań nie będą udostępniane usługodawcom w celu diagnozowania nowotworów złośliwych u uczestników ani wykorzystywane w późniejszych decyzjach dotyczących leczenia.

Jeśli pobranie próbki jest niewystarczające, pacjent otrzyma jeden dodatkowy zestaw do pobrania próbki plwociny.

Dla każdego pacjenta zostaną zebrane następujące dane kliniczne.

1. Dane demograficzne (wiek, płeć, wzrost, waga)
2. Historia medyczna i chirurgiczna obejmująca choroby płuc.
3. Stosowanie leków
4. Historia palenia
5. Wyniki z ostatniej niskodawkowej tomografii komputerowej (LDCT) pod kątem obecności/braku nowych wyników.