Fruchtbarkeitserhaltung durch Einfrieren von Eierstockgewebe (PTO)

Diese Studie wird am Centre Hospitalier Universitaire Ste-Justine durchgeführt. Das gesammelte Eierstockgewebe ist nur für den eigenen Gebrauch der Patientin bestimmt.

Die Probanden werden einer chirurgischen Entfernung ihres Eierstockgewebes unterzogen, und die folgenden Kategorien werden zur Teilnahme eingeladen:

1. Patienten haben sich entschieden, einen oder beide Eierstöcke zur Behandlung oder Vorbeugung von Krankheiten entfernen zu lassen.
2. Patientinnen, die sich aus medizinischen Gründen für eine Operation entschieden haben, um einen oder beide Eierstöcke ganz oder teilweise zu entfernen, wobei die Kryokonservierung der verbleibenden begrenzten Teile der normalen Ovarialrinde die einzige Option für die Erhaltung der Fruchtbarkeit zu diesem Zeitpunkt ist (mit Ausnahme der Ovarialrinde aus dem Ovar, die enthält die Masse wird nicht kryokonserviert).
3. Teilnehmer, die sich dafür entschieden haben, einen oder einen Teil eines Eierstocks entfernen zu lassen, ausschließlich zum Zweck der Erhaltung der Fruchtbarkeit, weil sie keine Süßigkeiten sind, um Standardtechnologien zur Erhaltung der Fruchtbarkeit zu verwenden.

Wenn sich die Patientin für die Teilnahme entscheidet und zustimmt, wird sie bewertet, um ihre Eignung festzustellen. Der Patientin wird auch ein AMH-Serum zur Bewertung der Eierstockreserve entnommen, und es werden auch Tests auf Infektionskrankheiten gemäß den Richtlinien von Health Canada durchgeführt.

Die Ovarektomie wird laparoskopisch unter Vollnarkose durchgeführt. Bei Patienten, bei denen es medizinisch unsicher oder nicht durchführbar ist, die Operation laparoskopisch abzuschließen, können der Patient und/oder der Erziehungsberechtigte entscheiden, mit einer Mini-Laparotomie oder einem Laparotomie-Ansatz fortzufahren oder das Verfahren abzubrechen und von der Studie zurückzutreten diese Zeit. Diese Entscheidung wird während des Zustimmungsverfahrens mit dem Patienten und dem Erziehungsberechtigten besprochen und vor der Operation dokumentiert. Das Verfahrensrisiko und Behandlungsverzögerungen werden mit dem primären Behandlungsteam besprochen, um das Wohlbefinden der Patienten besser beurteilen zu können. Dieses Verfahren wird nur zum Zwecke der Fruchtbarkeitserhaltung durchgeführt, kann jedoch möglicherweise mit einem anderen Verfahren wie der Platzierung einer zentralen Linie für eine zukünftige Chemotherapie koordiniert werden. Für den Fall, dass sich das Subjekt einem chirurgischen Eingriff für andere Indikationen unterzieht, könnten die Ovarektomien gleichzeitig koordiniert werden.

Eine Gewebeprobe wird pathologisch für die routinemäßige histologische Untersuchung bewertet. Wenn der Pathologe in der Ovarialgewebeprobe Hinweise auf eine Neoplasie findet. Das gesamte Gewebe könnte zur genaueren Untersuchung in die Pathologie geschickt werden. In diesem Fall steht dem Patienten kein Gewebe zur Verfügung, das er zur Erhaltung der Fruchtbarkeit verwenden könnte.

Kryokonservierung:

Präparation von Eierstockgewebe:

1. Eierstockgewebe wird vom Operationssaal der CHU Sainte-Justine zum Embryologielabor der REI-Abteilung in einem modifizierten HTF, ergänzt mit 10 % Serumersatz (9922 SSS; Irvine Scientifc, Santa Ana, CA, USA) transportiert und deponiert in einem beheizten Trait bei 37 °C.
2. Die Eierstockrinde wird von der Medulla getrennt und in Gewebebänder (0,5-1 x 0,5-1 cm, 1-2 mm) geschnitten.
3. Gewebewäsche mit TCM 199 (Life Technologies, Foster City, CA, USA) ergänzt mit 20 % (v/v) SSS (Milieu WS) und anschließend drei verschiedenen Vitrifikationslösungen bei Raumtemperatur ausgesetzt.

Verglasung:

1. Äquilibrierung des Eierstockgewebes in TCM199 mit 10 % (v/v) Ethylenglycol (EG, Wako Pure Chemical Industries, Tokio, Japan) und 20 % (v/v) SSS für 5 Minuten.
2. Äquilibrierung des Eierstockgewebes in TCM199 mit 20 % (v/v) EG und 20 % (v/v) SSS für 5 Minuten.
3. Ovarialgewebe-Äquilibrierung in TCM199 mit 35 % (v/v) EG, 5 % (w/v) Polyvinylpyrrolidon (sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) und 0,5 mol/l Saccharose (Wako Pure Chemical Industries) für 5 Protokoll.
4. Eierstockgewebebänder werden vor dem Eintauchen in flüssigen Stickstoff auf "Cryosupport" (BD Bioscience, San Jose, CA, USA) installiert.
5. Bänder aus Eierstockgewebe werden in einem Kryo-Fläschchen bei -196 °C gelagert.

Die Biobank für Eierstockgewebe befindet sich im Embryologielabor der REI-Abteilung der CHU Ste-Justine

Screening auf Infektionskrankheiten:

Gemäß den Richtlinien von Health Canada werden die Patienten auf (VIH, VDRL, HBsAg, Anti-Hepatitis C, HTLV) untersucht.

Erhebung von Studien- und Sicherheitsdaten:

Unerwünschte Ereignisse nach einer elektiven Ovarektomie werden gemäß den Kriterien von Health Canada identifiziert (www.hc-sc.gc.ca/ahc-asc/media/advisories-avis/reaction-eng.php#Drugs).

Datensammlung :

1. Datum der Fruchtbarkeitserhaltung

   1. Interventionstyp
   2. Das Alter
   3. Alter bei Diagnose
   4. Alter bei menarche
2. Diagnose
3. Ergebnis: Remission, Rückfall oder Tod
4. Gynäkologische Geschichte
5. Geburtshilfe und neonatale Ergebnisse
6. Behandlungsschema mit hohem Sterilitätsrisiko verbunden
7. Entscheidungen bezüglich der Verwendung von kryokonserviertem gelagertem Gewebe zur Wiederherstellung der Fertilität Ergebnis der Erhaltung der Fertilität

Risiken:

Zu den potenziellen Risiken der Laparoskopie, Laparotomie und Ovarektomie gehören Verletzungen des Darms, der Blase und der Blutgefäße mit der Notwendigkeit einer anschließenden Reparatur. Die Wahrscheinlichkeit, dass das Subjekt wegen Komplikationen ins Krankenhaus eingeliefert werden muss, liegt bei etwa 1 %. Neben dem chirurgischen Risiko gibt es auch inhärente Risiken einer Vollnarkose. Die Wahrscheinlichkeit, an der Narkose zu sterben, liegt bei weniger als 1 zu 10.000. Das Verletzungsrisiko bei der Laparotomie ist moderat. Der Proband, der Erziehungsberechtigte und/oder die Eltern werden gebeten, die Standard-Einverständniserklärung für die Laparoskopie und/oder Laparotomie und Ovarektomie zu unterschreiben, nachdem die Risiken und Vorteile besprochen wurden. Der Proband, der/die Erziehungsberechtigte(n) und/oder Elternteil(e) werden auch vom Anästhesieteam gebeten, eine Einverständniserklärung für die Anästhesie zu unterzeichnen, nachdem Risiken und Nutzen besprochen wurden.

Es besteht das Risiko, dass der zu kryokonservierende Eierstock von Krebs befallen sein könnte, was die Patientin vom Einfrieren von Eierstockgewebe ausschließt. Trotz aller Sorgfalt kann das entnommene Ovarialgewebe während eines beliebigen Teils des Kryokonservierungs-, Versand- oder Lagerungsprozesses beschädigt werden. Die Auswirkungen der Kryokonservierung und Langzeitlagerung auf menschliches Ovarialgewebe sind nicht bekannt und es kann zu einer möglichen Schädigung des Gewebes kommen; in diesem Fall kann es zu keiner zukünftigen Schwangerschaft kommen. Die Geburtsfehler und/oder genetischen Schäden bei Kindern, die nach der Kryokonservierung von Eierstockgewebe geboren werden, sind ebenfalls unbekannt. Allerdings wurden weltweit Tausende von Kindern aus gefrorenen Embryonen und Eizellen geboren, und es gab keinen Bericht über ein erhöhtes Risiko für Geburtsfehler bei diesen Kindern.

Vorteile:

Die Teilnahme der Patientin am Studienprotokoll kann ihr ein Mittel zur Wiederherstellung ihrer Fruchtbarkeit und reproduktiven Hormonfunktion bieten. Es besteht jedoch eine signifikante Möglichkeit, dass es keinen direkten Nutzen gibt, weil das Eierstockgewebe nicht verwendet wird, oder dass das Eierstockgewebe nicht zu einer lebenden Brut führt.

Kosten: Alle Kosten im Zusammenhang mit diesem Verfahren werden von der "Régie s'Assurance du Québec" übernommen. Auch die Gewebelagerung ist für einen Zeitraum von fünf Jahren abgedeckt.