Preservação da fertilidade com congelamento de tecido ovariano (PTO)

Este estudo será realizado no Centre Hospitalier Universitaire Ste-Justine O tecido ovariano coletado será apenas para uso próprio da paciente.

Os indivíduos serão submetidos à remoção cirúrgica de seu tecido ovariano, e as seguintes categorias serão convidadas a participar:

1. As pacientes optaram por remover um ou ambos os ovários para o tratamento ou prevenção da doença.
2. Pacientes que optaram por cirurgia para remover todo ou parte de um ou ambos os ovários por razões médicas, onde a criopreservação das porções remanescentes limitadas do córtex ovariano normal é a única opção para preservação da fertilidade no momento (exceto o córtex ovariano do ovário que contém a massa não será criopreservada).
3. Participantes que optaram por remover um ou parte de um ovário, exclusivamente para fins de preservação da fertilidade, porque não são doces para usar tecnologias padrão de preservação da fertilidade.

Se o sujeito optar por participar e consentir, ela será avaliada para determinar sua elegibilidade. O sujeito também terá um soro AMH coletado para a avaliação da reserva ovariana, e também o teste de doenças infecciosas também será realizado de acordo com as diretrizes da Health Canada.

A ooforectomia será realizada por via laparoscópica sob anestesia geral. Em pacientes nos quais é clinicamente inseguro ou inviável concluir a cirurgia por laparoscopia, o paciente e/ou responsável legal pode optar por prosseguir com uma abordagem de minilaparotomia ou laparotomia ou pode optar por interromper o procedimento e retirar-se do estudo em naquela época. Esta decisão será discutida com o paciente e o responsável legal durante o processo de consentimento e documentada antes da cirurgia. O risco do procedimento e os atrasos no tratamento serão discutidos com a equipe de tratamento primário, a fim de fornecer uma melhor avaliação do bem-estar do paciente. Este procedimento é realizado apenas para fins de preservação da fertilidade, mas pode ser potencialmente coordenado com outro procedimento, como a colocação de uma linha central para futura quimioterapia. Caso o sujeito esteja sendo submetido a uma intervenção cirúrgica por outras indicações, as ooforectomias poderão ser coordenadas ao mesmo tempo.

Uma amostra de tecido será avaliada por patologia para avaliação histológica de rotina. Se o patologista encontrar evidências de neoplasia na amostra de tecido ovariano. Todo o tecido poderia ser enviado para a patologia para um exame mais detalhado. Nesse caso, não haverá tecido disponível para o sujeito usar para preservação da fertilidade.

Criopreservação:

Preparação de tecido ovariano:

1. O tecido ovariano será transportado da sala de cirurgia do CHU Sainte-Justine para o laboratório de embriologia do departamento REI em um HTF modificado suplementado com 10% de suplemento de soro substituto (9922 SSS; Irvine Scientifc, Santa Ana, CA, EUA) e depositado em um traço aquecido a 37 °C.
2. O córtex ovariano será separado da medula e cortado em faixas de tecido (0,5-1 x 0,5-1cm, 1-2 mm)
3. Lavagem de tecidos com TCM 199 (Life technologies, Foster City, CA, EUA) suplementado com 20% (v/v) SSS (milieu WS) e depois expostos a três diferentes soluções de vitrificação à temperatura ambiente.

Vitrificação:

1. Equilíbrio do tecido ovariano em TCM199 com 10% (v/v) de etileno glicol (EG, Wako Pure Chemical Industries, Tóquio, Japão) e 20% (v/v) SSS por 5 minutos.
2. Equilíbrio do tecido ovariano em TCM199 com 20% (v/v) EG e 20% (v/v) SSS por 5 minutos.
3. Equilíbrio do tecido ovariano em TCM199 com 35% (v/v) EG, 5% (p/v) polivinilpirrolidona (sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EUA) e sacarose 0,5 mol/l (Wako Pure Chemical Industries) por 5 minutos.
4. As bandas de tecido ovariano serão instaladas em "Cryosupport" (BD Bioscience, San Jose, CA, EUA) antes da imersão em nitrogênio líquido.
5. As bandas de tecido ovariano serão armazenadas em um frasco criogênico a -196°C.

O biobanco de tecido ovariano está localizado no laboratório de embriologia do departamento de REI do CHU Ste-Justine

Triagem de doenças infecciosas:

De acordo com as diretrizes da Health Canada, os pacientes serão rastreados para (VIH, VDRL, HBsAg, anti-hepatite C, HTLV).

Estudo e coleta de dados de segurança:

Os eventos adversos após uma ooforectomia eletiva serão identificados de acordo com os critérios da Health Canada (www.hc-sc.gc.ca/ahc-asc/media/advisories-avis/reaction-eng.php#Drugs).

Coleção de dados :

1. Data de preservação da fertilidade

   1. Tipo de intervenção
   2. Era
   3. Idade no diagnóstico
   4. Idade da menarca
2. Diagnóstico
3. Resultado: remissão, recaída ou morte
4. história ginecológica
5. Desfechos obstétricos e neonatais
6. Regime de tratamento associado a alto risco de esterilidade
7. Opções em relação ao uso de tecido armazenado criopreservado para restauração da fertilidade Resultado da preservação da fertilidade

Riscos:

Os riscos potenciais da laparoscopia, laparotomia e ooforectomia incluem lesão do intestino, bexiga e vasos sanguíneos com necessidade de reparo subsequente. A chance do sujeito necessitar de internação por complicação(ões) é de cerca de 1%. Além do risco cirúrgico, também existem riscos inerentes à anestesia geral. A chance do sujeito morrer de anestesia é inferior a 1 em 10.000. O risco de lesão com laparotomia é moderado. O sujeito, responsável legal e/ou pai(s) será solicitado a assinar o formulário de consentimento padrão para laparoscopia e/ou laparotomia e ooforectomia após os riscos e benefícios terem sido discutidos. A equipe de anestesiologia também solicitará ao sujeito, responsável(is) legal(is) e/ou pai(s) que assinem um formulário de consentimento de anestesia após os riscos e benefícios terem sido discutidos.

Existe o risco de que o ovário a ser criopreservado possa ser acometido por câncer, desqualificando o sujeito para o congelamento de tecido ovariano. Embora sejam tomados cuidados, podem ocorrer danos ao tecido ovariano removido durante qualquer parte do processo de criopreservação, transporte ou armazenamento. Os efeitos da criopreservação e armazenamento de longo prazo em tecidos ovarianos humanos não são conhecidos e podem ocorrer danos aos tecidos; neste caso, uma gravidez futura pode não ocorrer. O(s) defeito(s) congênito(s) e/ou dano genético a qualquer criança que possa nascer após o procedimento de criopreservação de tecido ovariano também são desconhecidos. No entanto, milhares de crianças nasceram em todo o mundo a partir de embriões e óvulos congelados e não houve relato de aumento do risco de defeitos congênitos nessas crianças.

Benefícios:

A participação da paciente no protocolo do estudo pode fornecer a ela um meio de restaurar sua fertilidade e função hormonal reprodutiva. No entanto, existe uma possibilidade significativa de que não haja benefício direto devido à não utilização do tecido ovariano, ou que o tecido ovariano não resulte em nenhum parto vivo.

Custos: Todas as despesas relacionadas a este procedimento serão cobertas pela "Régie s'Assurance du Québec". O armazenamento de tecidos também é coberto por um período de cinco anos.