Preservazione della fertilità con congelamento del tessuto ovarico (PTO)

il suo studio sarà condotto presso il Centre Hospitalier Universitaire Ste-Justine Il tessuto ovarico raccolto sarà solo per uso personale dei pazienti.

I soggetti saranno sottoposti a rimozione chirurgica del loro tessuto ovarico e saranno invitate a partecipare le seguenti categorie:

1. I pazienti hanno scelto di rimuovere una o entrambe le ovaie per il trattamento o la prevenzione della malattia.
2. Pazienti che hanno scelto di sottoporsi a un intervento chirurgico per rimuovere in tutto o in parte una o entrambe le ovaie per ragioni mediche in cui la crioconservazione delle restanti porzioni limitate della normale corteccia ovarica è l'unica opzione per la conservazione della fertilità al momento (eccetto quella corteccia ovarica dall'ovaio che contiene la massa non sarà crioconservata).
3. Partecipanti che hanno scelto di rimuovere una o parte di un'ovaia, esclusivamente ai fini della conservazione della fertilità perché non sono caramelle per utilizzare le tecnologie standard di conservazione della fertilità.

Se il soggetto sceglie di partecipare e acconsente, verrà valutata per determinare la sua idoneità. Il soggetto avrà anche un siero AMH prelevato per la valutazione della riserva ovarica e verranno eseguiti anche test per le malattie infettive secondo le linee guida di Health Canada.

L'ooforectomia verrà eseguita per via laparoscopica in anestesia generale. Nei pazienti in cui non è sicuro dal punto di vista medico o non è fattibile completare l'intervento laparoscopico, il paziente e/o il tutore legale possono scegliere di procedere con un approccio mini-laparotomico o laparotomico o possono scegliere di interrompere la procedura e ritirarsi dallo studio a quella volta. Questa decisione sarà discussa con il paziente e il tutore legale durante il processo di consenso e documentata prima dell'intervento. Il rischio procedurale e i ritardi del trattamento saranno discussi con il team di trattamento primario al fine di fornire una migliore valutazione del benessere dei pazienti. Questa procedura viene eseguita solo a scopo di conservazione della fertilità, ma può potenzialmente essere coordinata con un'altra procedura come il posizionamento di una linea centrale per la futura chemioterapia. Nel caso in cui il soggetto sia sottoposto ad intervento chirurgico per altre indicazioni, le ovariectomie potrebbero essere coordinate contemporaneamente.

Un campione di tessuto sarà valutato dalla patologia per la valutazione istologica di routine. Se il patologo trova segni di neoplasia nel campione di tessuto ovarico. Tutto il tessuto potrebbe essere inviato in patologia per un esame più approfondito. In questo caso, non ci sarà tessuto disponibile per il soggetto da utilizzare per la conservazione della fertilità.

Crioconservazione :

Preparazione del tessuto ovarico:

1. Il tessuto ovarico verrà trasportato dalla sala operatoria del CHU Sainte-Justine al laboratorio di Embriologia presso il dipartimento REI in un HTF modificato integrato con sostituto del siero supplementare al 10% (9922 SSS; Irvine Scientifc, Santa Ana, CA, USA) e deposto in un tratto riscaldato a 37 °C.
2. La corteccia ovarica sarà separata dal midollo e tagliata in bande di tessuto (0,5-1 x 0,5-1 cm, 1-2 mm)
3. Lavaggio dei tessuti con TCM 199 (tecnologie Life, Foster City, CA, USA) integrato con 20% (v/v) SSS (milieu WS) e quindi esposto a tre diverse soluzioni di vetrificazione a temperatura ambiente.

Vetrificazione:

1. Equilibrio del tessuto ovarico in TCM199 con 10% (v/v) di glicole etilenico (EG, Wako Pure Chemical Industries, Tokyo, Giappone) e 20% (v/v) SSS per 5 minuti.
2. Equilibrio del tessuto ovarico in TCM199 con 20% (v/v) EG e 20% (v/v) SSS per 5 minuti.
3. Equilibrio del tessuto ovarico in TCM199 con 35% (v/v) EG, 5% (p/v) polivinilpirrolidone (sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) e 0,5 mol/l saccarosio (Wako Pure Chemical Industries) per 5 minuti.
4. Le bande di tessuto ovarico verranno installate su "Cryosupport" (BD Bioscience, San Jose, CA, USA) prima dell'immersione in azoto liquido.
5. Le bande di tessuto ovarico saranno conservate in una criofiala a -196°C.

La biobanca del tessuto ovarico si trova presso il laboratorio di embriologia nel dipartimento REI del CHU Ste-Justine

Screening delle malattie infettive:

Secondo le linee guida di Health Canada, i pazienti saranno sottoposti a screening per (VIH, VDRL, HBsAg, anti epatite C, HTLV).

Studio e raccolta dati sulla sicurezza:

Gli eventi avversi dopo una ovariectomia elettiva saranno identificati secondo i criteri Health Canada (www.hc-sc.gc.ca/ahc-asc/media/advisories-avis/reaction-eng.php#Drugs).

Raccolta dati :

1. Data di conservazione della fertilità

   1. Tipo di intervento
   2. Età
   3. Età alla diagnosi
   4. Età al menarca
2. Diagnosi
3. Risultato: remissione, ricaduta o morte
4. Storia ginecologica
5. Esiti ostetrici e neonatali
6. Regime di trattamento associato ad alto rischio di sterilità
7. Scelte riguardanti l'uso di tessuti immagazzinati criopreservati per il ripristino della fertilità Esito della conservazione della fertilità

Rischi:

I potenziali rischi di laparoscopia, laparotomia e ovariectomia includono lesioni all'intestino, alla vescica e ai vasi sanguigni con necessità di successiva riparazione. La possibilità che il soggetto richieda il ricovero per complicanze è di circa l'1%. Oltre al rischio chirurgico, ci sono anche i rischi intrinseci dell'anestesia generale. La possibilità del soggetto di morire per anestesia è inferiore a 1 su 10.000. Il rischio di lesioni con la laparotomia è moderato. Al soggetto, al tutore legale e/o ai genitori verrà chiesto di firmare il modulo di consenso standard per laparoscopia e/o laparotomia e ovariectomia dopo che sono stati discussi i rischi e i benefici. Il team di anestesisti chiederà inoltre al soggetto, al/ai tutore/i legale/i e/o al/ai genitore/i di firmare un modulo di consenso all'anestesia dopo aver discusso dei rischi e dei benefici.

C'è il rischio che l'ovaio da crioconservare possa essere affetto da cancro, escludendo il soggetto dal congelamento del tessuto ovarico. Sebbene si presti attenzione, durante qualsiasi parte del processo di crioconservazione, spedizione o conservazione possono verificarsi danni al tessuto ovarico rimosso. Gli effetti della crioconservazione e della conservazione a lungo termine sui tessuti ovarici umani non sono noti e possono verificarsi possibili danni ai tessuti; in questo caso potrebbe non verificarsi una futura gravidanza. Sono inoltre sconosciuti i difetti congeniti e/o il danno genetico di qualsiasi bambino che possa nascere a seguito della procedura di crioconservazione del tessuto ovarico. Tuttavia, migliaia di bambini in tutto il mondo sono nati da embrioni e ovuli congelati e non è stato segnalato un aumento del rischio di difetti alla nascita in questi bambini.

Benefici:

La partecipazione della paziente al protocollo dello studio può fornirle un mezzo per ripristinare la sua fertilità e la sua funzione ormonale riproduttiva. Tuttavia, tuttavia, esiste una possibilità significativa che non ci possa essere alcun beneficio diretto a causa del mancato utilizzo del tessuto ovarico, o che il tessuto ovarico non possa provocare alcun parto vivo.

Costi: Tutte le spese relative a questa procedura saranno coperte dalla "Régie s'Assurance du Québec". Anche la conservazione dei tessuti è coperta per un periodo di cinque anni.