Evaluación de la alergenicidad potencial de nuevas variedades de trigo

La prevalencia de la alergia alimentaria está aumentando en la población pediátrica. Un diagnóstico de alergia alimentaria conlleva importantes implicaciones médicas, nutricionales y psicológicas tanto para los pacientes como para sus familias. Por lo tanto, hacer un diagnóstico preciso es fundamental. Sin embargo, el diagnóstico de alergia alimentaria sintomática sigue siendo un desafío para los alergólogos y otros médicos en ejercicio. La historia clínica del paciente sigue siendo un componente clave en el diagnóstico de alergia alimentaria. Las pruebas de punción cutánea y las pruebas de inmunoglobulina-e (IgE) específica para alimentos actúan como herramientas secundarias para ayudar en el proceso de evaluación, pero estas pruebas también sufren de una alta tasa de falsos positivos. Sin embargo, para niveles de IgE específicos por debajo de los límites para estos alimentos, pueden ser necesarios desafíos alimentarios orales supervisados ​​(OFC) para establecer el diagnóstico de alergia alimentaria sintomática, ya que la sensibilidad de estos valores es relativamente baja. Actualmente, la provocación alimentaria doble ciego controlada por placebo (DBPCFC) sigue siendo el estándar de oro para el diagnóstico de la alergia alimentaria. Los OFC tienen sus propios inconvenientes inherentes: no siempre están disponibles para todos los pacientes, consumen mucho tiempo y son potencialmente peligrosos debido a su riesgo de anafilaxia.

El trigo es uno de los ocho alimentos alergénicos que son responsables de aproximadamente el 90% de todas las alergias alimentarias. El trigo es menos alergénico que otros alimentos de este grupo y es menos probable que cause reacciones graves, multiorgánicas y potencialmente mortales. La alergia al trigo es más frecuente en niños que en adultos y se considera una alergia transitoria de la infancia/niñez. La alergia al trigo a menudo se supera en la primera infancia, en la mayoría de los casos entre los 3 y los 5 años, pero el 35% muestra una alergia persistente en la adolescencia. Si bien estudios previos que utilizaron anticuerpos IgE específicos de alimentos determinaron puntos de decisión de diagnóstico que indican una alta probabilidad de reactividad clínica para ciertos alimentos, a saber, leche, huevo, maní y pescado, los niveles de IgE específicos de trigo no parecen ser predictores útiles de reacciones adversas a alimentos. resultado del desafío, lo que permite la reducción de la necesidad de desafíos alimentarios. Además, las reacciones IgE positivas falsas al trigo y otros cereales se observan con frecuencia en pacientes alérgicos a la hierba debido a la reactividad cruzada insignificante entre las proteínas solubles en agua/sal. Por lo tanto, es importante la identificación de las proteínas de trigo asociadas con los síntomas del trigo.

Las gliadinas en particular se han implicado en la alergia al trigo, tanto en la alergia mediada por IgE como en la alergia celíaca no mediada por IgE. Se han encontrado anticuerpos IgE contra la ω-5-gliadina en niños con reacciones inmediatas al trigo ingerido, y los resultados publicados muestran que los niveles elevados de IgE contra la ω-5-gliadina se correlacionan con el resultado de las provocaciones alimentarias. En un estudio finlandés, todos los niños con anticuerpos IgE contra la ω-5-gliadina reaccionaron con síntomas inmediatos a los desafíos con trigo, mientras que todos los pacientes con resultados negativos o tardíos en la prueba de desafío no mostraron anticuerpos IgE detectables contra la ω-5-gliadina.15 En una cohorte japonesa, la presencia de anticuerpos IgE específicos de ω-5-gliadina elevados se asoció con síntomas inmediatos con provocaciones alimentarias de trigo y también en pacientes con antecedentes convincentes de alergia al trigo que no fueron provocadas debido al riesgo de anafilaxia. Además, los pacientes con reacciones graves tras el desafío tenían niveles significativamente más altos de anticuerpos IgE específicos de ω-5-gliadina en comparación con los niños con síntomas leves o moderados. En un estudio japonés multicéntrico, Ebisawa et al. mostró una relación significativa entre la probabilidad de alergia al trigo y la concentración de anticuerpos IgE específicos de ω-5-gliadina con un riesgo 2,6 veces mayor. En un estudio de sujetos mixtos alemanes y estadounidenses, los anticuerpos IgE específicos de ω-5-gliadina no se correlacionaron con los resultados de la provocación alimentaria en pacientes con sospecha de alergia. Sin embargo, el tamaño de la muestra en este estudio fue mucho más pequeño que en otros, y la población alemana incluyó más pacientes con alergia al trigo no mediada por IgE con síntomas tardíos, casi la mitad de la cohorte alemana. No obstante, los anticuerpos IgE específicos de ω-5-gliadina pueden diferir entre las poblaciones de Asia, Europa y los Estados Unidos debido a los hábitos dietéticos y la genética, y se justifican más estudios, especialmente en una cohorte más grande de los Estados Unidos.

Los cultivos alimentarios que se han desarrollado a través de la biotecnología agrícola para uso comercial se evalúan minuciosamente en cuanto a su seguridad. Uno de los elementos clave en la evaluación de la seguridad de un cultivo mejorado genéticamente es la evaluación de los posibles cambios en sus propiedades alergénicas. Las propiedades alergénicas del cultivo pueden alterarse potencialmente si se introduce un alérgeno conocido o una proteína que tiene un alto potencial para convertirse en alérgeno. Además, el nivel de expresión de los alérgenos endógenos podría verse alterado como resultado de la transformación e inserción del nuevo gen en el genoma de la planta.

Dado que el trigo es un cultivo alimentario alergénico conocido, las directrices internacionales exigen análisis para determinar si la introducción de los genes y la producción de proteínas recombinantes en el trigo causan un cambio no deseado en los niveles de proteínas alergénicas endógenas. Para abordar esta pregunta, los niveles de unión de IgE específica del trigo observados en las variedades de trigo derivadas de la biotecnología se comparan con el conjunto de valores de unión observados en las variedades de trigo de referencia que ya están en el mercado. Se ha demostrado que la determinación de los niveles de unión directa de IgE mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) es un método apropiado para realizar tales comparaciones, especialmente cuando el ensayo se valida y calibra antes de la producción de datos. Esta comparación es importante ya que permitirá determinar si existe heterogeneidad en pacientes alérgicos al trigo con alergia al trigo en términos de un desencadenante predominante. En última instancia, los cultivos pueden diseñarse para eliminar los componentes culpables si son predominantes.

En este estudio, se compararán los resultados de la provocación alimentaria y los ensayos ImmunoCAP IgE estándar con trigo con las pruebas de trigo CRD (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). Cuando se evalúa junto con la historia clínica, la reactividad de la prueba cutánea y los resultados de OFC, las respuestas a los componentes individuales pueden usarse para predecir la capacidad de respuesta a la provocación alimentaria. Con respecto a los niveles de IgE específica de trigo intacto, en dos estudios previos que los utilizaron, no se pudo determinar un límite de valor predictivo positivo verdadero del 95% para predecir la reactividad en OFC para el trigo, aunque se sugirió un desafío médico a un nivel de trigo estimado de 26 kU/L para determinar la posible reactividad.6,7 Sin embargo, estos estudios ahora tienen más de una década y son anteriores a los diagnósticos resueltos por componentes (CRD). La CRD para las proteínas principales ω-5-gliadina puede resultar más beneficiosa para determinar los niveles predictivos de IgE y los resultados OFC positivos para el trigo. Por lo tanto, además de determinar los patrones de los componentes del trigo que podrían predecir los resultados de OFC, los investigadores esperan determinar puntos de decisión predictivos del 95 % para cada uno de los componentes individuales y compararlos con los puntos de decisión estimados por el ensayo ImmunoCAP para el trigo.