Avaliação da Alergenicidade Potencial de Novas Variedades de Trigo

A prevalência de alergia alimentar está aumentando na população pediátrica. Um diagnóstico de alergia alimentar traz implicações médicas, nutricionais e psicológicas significativas para os pacientes e suas famílias. Portanto, fazer um diagnóstico preciso é fundamental. No entanto, o diagnóstico de alergia alimentar sintomática continua a ser um desafio para os alergistas e outros médicos praticantes. A história clínica do paciente continua sendo um componente chave no diagnóstico de alergia alimentar. O teste cutâneo por picada e o teste de imunoglobulina-e (IgE) específico para alimentos atuam como ferramentas secundárias para auxiliar no processo de avaliação, mas esses testes também apresentam uma alta taxa de falsos positivos. No entanto, para níveis específicos de IgE abaixo dos limites para esses alimentos, testes de provocação oral supervisionada (OFCs) podem ser necessários para estabelecer o diagnóstico de alergia alimentar sintomática, pois a sensibilidade desses valores é relativamente baixa. Atualmente, o desafio alimentar duplo-cego controlado por placebo (DBPCFC) continua sendo o padrão-ouro para o diagnóstico de alergia alimentar. Os OFCs têm suas próprias desvantagens inerentes: nem sempre estão prontamente disponíveis para todos os pacientes, consomem muito tempo e são potencialmente perigosos devido ao risco de anafilaxia.

O trigo é um dos oito alimentos alergênicos responsáveis ​​por aproximadamente 90% de todas as alergias alimentares. O trigo é menos alergênico do que outros alimentos deste grupo e menos propenso a causar reações graves em vários órgãos e com risco de vida. A alergia ao trigo é mais prevalente em crianças do que em adultos e é considerada uma alergia transitória da infância. A alergia ao trigo geralmente é superada na primeira infância, na maioria dos casos aos 3-5 anos de idade, mas 35% apresentam uma alergia persistente na adolescência. Embora estudos anteriores usando anticorpos IgE específicos de alimentos tenham determinado pontos de decisão de diagnóstico que indicam uma alta probabilidade de reatividade clínica para certos alimentos, como leite, ovo, amendoim e peixe, os níveis de IgE específicos de trigo não parecem ser preditores úteis de alimentos resultado do desafio, permitindo a redução da necessidade de desafios alimentares. Além disso, reações de IgE falso-positivas ao trigo e outros cereais são frequentemente observadas em pacientes alérgicos a gramíneas devido à reatividade cruzada insignificante entre proteínas solúveis em água/sal. Portanto, a identificação das proteínas do trigo associadas aos sintomas do trigo é importante.

As gliadinas, em particular, têm sido implicadas na alergia ao trigo, tanto na alergia mediada por IgE quanto na alergia celíaca não mediada por IgE. Anticorpos IgE para ω-5-gliadina foram encontrados em crianças com reações imediatas ao trigo ingerido, e resultados publicados mostram que níveis aumentados de IgE para ω-5-gliadina se correlacionam com o resultado de desafios alimentares. Em um estudo finlandês, todas as crianças com anticorpos IgE para ω-5-gliadina reagiram com sintomas imediatos aos desafios de trigo, enquanto todos os pacientes com resultados de teste de desafio atrasados ​​ou negativos não mostraram anticorpos IgE detectáveis ​​para ω-5-gliadina.15 Em uma coorte japonesa, a presença de anticorpos IgE específicos de ω-5-gliadina elevados foi associada a sintomas imediatos com provocações alimentares com trigo e também em pacientes com uma forte história convincente de alergia ao trigo que não foram desafiados devido ao risco de anafilaxia. Além disso, os pacientes com reações graves ao desafio apresentaram níveis significativamente mais altos de anticorpos IgE específicos para ω-5-gliadina em comparação com crianças com sintomas leves ou moderados. Em um estudo japonês multicêntrico, Ebisawa et al. mostraram uma relação significativa entre a probabilidade de alergia ao trigo e a concentração de anticorpos IgE específicos de ω-5-gliadina com risco 2,6 vezes maior. Em um estudo misto de indivíduos alemães e americanos, os anticorpos IgE específicos de ω-5-gliadina não se correlacionaram com os resultados do desafio alimentar em pacientes com suspeita de alergia. No entanto, o tamanho da amostra neste estudo foi muito menor do que em outros, e a população alemã incluiu mais pacientes com alergia ao trigo não mediada por IgE com sintomas tardios, quase metade da coorte alemã. No entanto, os anticorpos IgE específicos de ω-5-gliadina podem diferir entre as populações na Ásia, Europa e Estados Unidos devido a hábitos alimentares e genética, e mais estudos são necessários, especialmente em uma coorte maior nos EUA.

As culturas alimentares que foram desenvolvidas por meio da biotecnologia agrícola para uso comercial são cuidadosamente avaliadas quanto à sua segurança. Um dos elementos-chave na avaliação de segurança de uma cultura geneticamente melhorada é uma avaliação de possíveis mudanças em suas propriedades alergênicas. As propriedades alergênicas da cultura podem ser potencialmente alteradas se for introduzido um alérgeno conhecido ou uma proteína com alto potencial para se tornar um alérgeno. Além disso, o nível de expressão de alérgenos endógenos pode ser alterado como resultado da transformação e inserção do novo gene no genoma da planta.

Como o trigo é uma cultura alimentar alergênica conhecida, as diretrizes internacionais exigem análises para determinar se a introdução dos genes e a produção das proteínas recombinantes no trigo causam uma alteração involuntária nos níveis de proteínas alergênicas endógenas. Para resolver esta questão, os níveis de ligação de IgE específica do trigo observados nas variedades de trigo derivadas da biotecnologia são comparados com o conjunto de valores de ligação observados nas variedades de trigo de referência que já estão no mercado. A determinação dos níveis de ligação direta de IgE usando um ensaio imunoenzimático (ELISA) mostrou ser um método apropriado para realizar tais comparações, especialmente quando o ensaio é validado e calibrado antes da produção de dados. Essa comparação é importante, pois permitirá determinar se há heterogeneidade em pacientes alérgicos ao trigo com alergia ao trigo em termos de um gatilho predominante. Em última análise, as culturas podem ser projetadas para eliminar os componentes culpados, se predominantes.

Os resultados do desafio alimentar e os ensaios ImmunoCAP IgE padrão para o trigo serão comparados aos testes de trigo CRD neste estudo (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). Quando avaliadas em conjunto com a história clínica, a reatividade ao teste cutâneo e os resultados da OFC, as respostas a componentes individuais podem ser usadas para prever a capacidade de resposta ao desafio alimentar. Com relação aos níveis intactos de IgE específica do trigo, em dois estudos anteriores usando-os, um corte de valor preditivo positivo de 95% para prever a reatividade no OFC não pôde ser determinado para o trigo, embora um desafio médico tenha sido sugerido em um nível de trigo estimado de 26 kU/L para determinar a possível reatividade.6,7 No entanto, esses estudos já têm mais de uma década e são pré-datados para diagnósticos resolvidos por componentes (CRD). CRD para proteínas principais ω-5-gliadina pode provar ser mais benéfico na determinação de níveis preditivos de IgE e resultados OFC positivos para trigo. Portanto, além de determinar os padrões dos componentes do trigo que podem prever os resultados da OFC, os investigadores esperam determinar 95% dos pontos de decisão preditivos para cada um dos componentes individuais e compará-los com os pontos de decisão estimados pelo ensaio ImmunoCAP para o trigo.