Concentraciones de citoquinas y metalopeptidasas proinflamatorias y antiinflamatorias en el suero durante el tratamiento del dolor causado por el abultamiento del disco intervertebral en la columna lumbar

La ubicación de la investigación es el Instituto para el Manejo del Dolor de la Clínica de Anestesiología, Reanimatología y Cuidados Intensivos del Centro Hospitalario Clínico de Osijek y luego el Laboratorio de Medicina Traslacional de la Facultad de Medicina Dental y Salud de Osijek. La investigación está diseñada como un experimento controlado no aleatorio, y la duración de la investigación dependerá del número disponible de pacientes que cumplan con los criterios de inclusión para la investigación mencionada y, considerando la afluencia esperada de pacientes, la duración prevista es de 18 meses. .

Todos los pacientes recibirán un consentimiento informado por escrito y el procedimiento se explicará de forma oral. Luego de firmar el consentimiento informado, los pacientes se dividirán en dos grupos. Un grupo de pacientes se someterá a la administración epidural de esteroides y anestésico local mediante un abordaje transforaminal, y el otro grupo de pacientes se someterá a un método conservador de manejo del dolor. Todas las materias serán seleccionadas en el Instituto para el Manejo del Dolor de KBC Osijek. A continuación se detallan los criterios de inclusión y exclusión de pacientes en este estudio.

En la inspección de la documentación médica se respetarán todos los derechos éticos y morales de los encuestados, con especial referencia a los datos personales de los encuestados, que serán anónimos. Los sujetos serán recogidos en el Centro Hospitalario Clínico de Osijek - Clínica de Anestesiología, Reanimación y Cuidados Intensivos del Instituto para el Manejo del Dolor. A los pacientes que cumplan con los criterios de inclusión en la investigación se les pedirá que participen en la misma y se les explicará verbalmente y por escrito utilizando el formulario de información para los sujetos. Después de firmar el consentimiento informado, los pacientes serán encriptados para protección de datos e identidad.

El día especificado, se les pedirá que completen un cuestionario (ODI, PSQI, SF-36, MCGill short, HAQ, PainDETECT), luego se les permitirá tomar una muestra de sangre y una evaluación fisioterapéutica: rango de movilidad (goniometría), mediciones de circularidad, y Pruebas de tiempo y listo. Prueba de sentado, prueba de Adams Forward Bend, prueba de Lasegue, prueba de caminar sobre los dedos de los pies, prueba de caminar sobre el talón y prueba de distancia entre los dedos y el suelo. Las pruebas fisioterapéuticas anteriores se utilizan en la evaluación estándar de los pacientes.

Se pedirá a los pacientes que completen un cuestionario en el examen de seguimiento, al final de la terapia y en el siguiente examen de seguimiento, después de 3 meses.

El primer examen y el de control los realizará un médico especialista competente. La toma de muestras de sangre se realizará según control en el Centro Hospitalario Clínico de Osijek, si el control no está programado, y con fines de investigación se realizará en el Centro Médico Mursa. A partir de los resultados de laboratorio, se medirán los leucocitos, la proteína C reactiva (PCR) y el hemograma diferencial (DKS) y los niveles de citocinas.

Las muestras de sangre para análisis se recogerán en tubos de ensayo con tapón rojo, que se almacenarán a +4 hasta su centrifugación en el Laboratorio de Medicina Traslacional de la Facultad de Medicina Dental y Salud de Osijek. La muestra se centrifugará a 1000 rcf/10 min y luego se distribuirán alícuotas del suero en tubos de ensayo estériles separados y se almacenarán en un refrigerador a -80 °C hasta el análisis de laboratorio. Para el análisis cuantitativo multicomplejo de citocinas antiinflamatorias, interferón gamma, factor de necrosis tumoral alfa, ligando de quimiocina y metaloproteinasas de matriz se utilizarán pruebas personalizadas ProcartaPlex Multiplex (eBioscience, Affymetrix) cuyo principio se basa en perlas para la cuantificación de proteínas según el principio de la Prueba ELISA de Sedwich con el uso de Luminex® xMAP® (perfil de analitos múltiples) Todo el protocolo se llevará a cabo de acuerdo con las instrucciones de eBioscience del fabricante. La placa se leerá en el dispositivo Luminex® xMAP®. El nivel de los analitos probados se determinará utilizando el software ProcartaPlex Analyst v1.0. eBiociencia, Affymetrix).

Para calcular el número apropiado de encuestados, se aplicarán métodos estadísticos de la siguiente manera: - para observar un efecto medio (f = 0,25) en la diferencia de variables continuas entre tres mediciones en dos grupos de sujetos, el tamaño de muestra mínimo total requerido es 44 sujetos - para observar un efecto medio (d = 0,5) en la diferencia de variables continuas entre dos grupos de sujetos, con un nivel de significancia de 0,05 y una potencia de 0,80, el tamaño de muestra mínimo requerido es de 128 sujetos. En conclusión, el tamaño mínimo de muestra en la investigación es de 128 encuestados (G*Power, 3.1.2).

Los datos numéricos se describirán mediante la media aritmética y la desviación estándar, y en el caso de distribuciones que no sigan una distribución normal, mediante la mediana y el rango intercuartílico. Las diferencias entre dos grupos independientes de datos numéricos distribuidos normalmente se probarán mediante la prueba T de Student; en caso de que las variables no sigan una distribución normal, se utilizará un análogo no paramétrico (prueba U de Man-Whitney). El análisis estadístico se realizará con el programa Statistica 10.0 (StatSoft, Tulsa, OK, EE. UU.), con un nivel de significancia seleccionado de α=0,05.