Konzentrationen entzündungsfördernder und entzündungshemmender Zytokine und Metallopeptidasen im Serum während der Behandlung von Schmerzen, die durch eine Vorwölbung der Bandscheibe in der Lendenwirbelsäule verursacht werden

Der Standort der Forschung ist das Institut für Schmerztherapie an der Klinik für Anästhesiologie, Reanimatologie und Intensivmedizin, Klinisches Krankenhauszentrum Osijek, dann das Labor für translationale Medizin der Fakultät für Zahnmedizin und Gesundheit Osijek. Die Forschung ist als nicht randomisiertes, kontrolliertes Experiment konzipiert und die Dauer der Forschung hängt von der verfügbaren Anzahl an Patienten ab, die die Einschlusskriterien für die genannte Forschung erfüllen. Unter Berücksichtigung des erwarteten Zustroms von Patienten beträgt die geplante Dauer 18 Monate .

Alle Patienten erhalten eine schriftliche Einverständniserklärung und das Verfahren wird mündlich erklärt. Nach Unterzeichnung der Einverständniserklärung werden die Patienten in zwei Gruppen eingeteilt. Eine Patientengruppe wird über einen transforaminalen Zugang einer epiduralen Verabreichung von Steroiden und Lokalanästhetika unterzogen, und die andere Patientengruppe wird einer konservativen Schmerzbehandlungsmethode unterzogen. Alle Fächer werden am Institut für Schmerztherapie der KBC Osijek ausgewählt. Nachfolgend sind die Kriterien für den Einschluss und Ausschluss von Patienten in dieser Studie aufgeführt.

Bei der Einsichtnahme in die medizinische Dokumentation werden alle ethischen und moralischen Rechte der Befragten respektiert, mit besonderem Bezug auf die personenbezogenen Daten der Befragten, die anonym bleiben. Die Probanden werden im Klinischen Krankenhauszentrum Osijek – Klinik für Anästhesiologie, Reanimation und Intensivpflege am Institut für Schmerztherapie – gesammelt. Patienten, die die Kriterien für die Aufnahme in die Studie erfüllen, werden zur Teilnahme aufgefordert und anhand des Informationsformulars für die Probanden mündlich und schriftlich aufgeklärt. Nach Unterzeichnung der Einverständniserklärung werden die Patienten zum Schutz ihrer Daten und Identität verschlüsselt.

Am angegebenen Tag werden sie gebeten, einen Fragebogen auszufüllen (ODI, PSQI, SF-36, MCGill short, HAQ, PainDETECT), dann eine Blutentnahme und eine physiotherapeutische Beurteilung zu ermöglichen – Mobilitätsbereich (Goniometrie), Zirkularitätsmessungen, und Time-up-and-go-Tests. Sit-up-Test, Adams-Vorwärtsbeugetest, Lasegue-Test, Test zum Gehen auf den Zehen, Test zum Gehen auf der Ferse und Test des Zehen-Boden-Abstands. Die oben genannten physiotherapeutischen Tests werden bei der Standardbeurteilung von Patienten eingesetzt.

Die Patienten werden gebeten, bei der Nachuntersuchung, am Ende der Therapie und bei der nächsten Nachuntersuchung nach 3 Monaten einen Fragebogen auszufüllen.

Die Erst- und Kontrolluntersuchungen werden von einem kompetenten Facharzt durchgeführt. Die Blutentnahme erfolgt entsprechend der Kontrolle im Klinischen Krankenhauszentrum Osijek, wenn die Kontrolle nicht geplant ist, und zu Forschungszwecken wird sie im Medizinischen Zentrum Mursa durchgeführt. Anhand der Laborbefunde werden Leukozyten, C-reaktives Protein (CRP) sowie das Differentialblutbild (DKS) und die Zytokinspiegel gemessen.

Blutproben zur Analyse werden in Reagenzgläsern mit roten Deckeln gesammelt, die bis zur Zentrifugation im Labor für Translationale Medizin der Fakultät für Zahnmedizin und Gesundheit Osijek bei +4 gelagert werden. Die Probe wird bei 1000 rcf/10 Min. zentrifugiert und dann wird das Serum in separate sterile Reagenzgläser aliquotiert und bis zur Laboranalyse im Kühlschrank bei -80 °C gelagert. Für die multikomplexe quantitative Analyse von entzündungshemmenden Zytokinen, Interferon Gamma, Tumornekrosefaktor Alpha, Chemokinliganden und Matrixmetalloproteinasen werden maßgeschneiderte ProcartaPlex Multiplex-Tests (eBioscience, Affymetrix) verwendet, deren Prinzip auf Perlen zur Proteinquantifizierung nach dem Prinzip der basiert Sedwich ELISA-Test unter Verwendung von Luminex® xMAP® (Multi-Analyt-Profiling). Das gesamte Protokoll wird gemäß den eBioscience-Anweisungen des Herstellers durchgeführt. Die Platte wird im Luminex® xMAP®-Gerät gelesen. Der Gehalt der getesteten Analyten wird mit der Software ProcartaPlex Analyst v1.0 bestimmt. eBioscience, Affymetrix).

Um die angemessene Anzahl der Befragten zu berechnen, werden statistische Methoden wie folgt angewendet: - Um einen mittleren Effekt (f = 0,25) in der Differenz kontinuierlicher Variablen zwischen drei Messungen in zwei Gruppen von Probanden zu beobachten, beträgt die erforderliche Gesamtstichprobengröße mindestens 44 Probanden – um einen mittleren Effekt (d = 0,5) in der Differenz kontinuierlicher Variablen zwischen zwei Probandengruppen mit einem Signifikanzniveau von 0,05 und einer Potenz von 0,80 zu beobachten, beträgt die erforderliche Mindeststichprobengröße 128 Probanden. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Mindeststichprobengröße in der Untersuchung 128 Befragte beträgt (G*Power, 3.1.2).

Numerische Daten werden durch das arithmetische Mittel und die Standardabweichung und bei Verteilungen, die keiner Normalverteilung folgen, durch den Median und den Interquartilbereich beschrieben. Unterschiede zwischen zwei unabhängigen Gruppen normalverteilter numerischer Daten werden mit dem Student-T-Test getestet. Falls die Variablen keiner Normalverteilung folgen, wird ein nichtparametrisches Analogon (Man-Whitney-U-Test) verwendet. Die statistische Analyse wird mit dem Programm Statistica 10.0 (StatSoft, Tulsa, OK, USA) mit einem ausgewählten Signifikanzniveau von α = 0,05 durchgeführt.