Voiko kudoksesta/verestä löytyvä e-kadheriini olla arvokasta tunnistamaan ja seurattaessa potilaita, joilla on protonipumpun estäjän (PPI) jälkeinen närästys

Närästyksen oire oli kerran luotettava gastroesofageaalisen refluksitaudin (GERD) indikaattori, ja siksi potilaat reagoisivat ennustettavasti hapon estoon. Post-protonipumpun estäjien (PPI) maailmassa kumpikaan näistä väitteistä ei pidä paikkaansa, koska monilla potilailla, joilla on närästystä, on oireita, joita välittävät mekanismeja, jotka eivät liity ruokatorven luminaaliseen happamuuteen, esim. toiminnallinen sairaus, sisäelinten yliherkkyys tai ruokatorven venytysreseptorien aktivaatio. Näin ollen nämä henkilöt eivät reagoi PPI:ihin[1–3]. Koska PPI-responsiiviset ja PPI-resistentit potilaat, joilla on närästystä, eivät ole erotettavissa historiasta, on vaikea määrittää, mitkä PPI-responsiiviset henkilöt voivat reagoida suurempiin PPI-annoksiin. Lisäksi kun koehenkilöt reagoivat PPI-hoitoon, oirevaste ei välttämättä korreloi leesion paranemisen kanssa, mikä tekee systeemisen paranemisen merkkiaineen erittäin toivottavan. Leesion paraneminen on erityisen ongelmallista, koska histopatologinen vaurio, joka korreloi parhaiten närästyksen kanssa, on laajentuneiden solujen välisten tilojen (DIS) esiintyminen ruokatorven epiteelissä, jota ei voida havaita tavallisella endoskopialla, ja se on luotettavimmin osoitettavissa transmissioelektronimikroskoopilla[4- 7]. Näin ollen olisi toivottavaa saada objektiivinen merkkiaine happovälitteisestä ruokatorven epiteelin vauriosta, joka voisi tunnistaa ne, joilla on PPI-responsiivinen närästys, ja määrittää hapon vaurioitun epiteelin paranemisen ei-invasiivisesti.

DIS ruokatorven epiteelissä on todettu gastroesofageaalisen refluksitaudin (GERD) varhaiseksi histopatologiseksi piirteeksi. Tämä elektronimikroskooppinen leesio esiintyy sekä erosiivisissa että syövyttämättömissä GERD:n muodoissa ja johtuu happovauriosta solujen välisessä liitoskompleksissa, joka säätelee solujen välistä läpäisevyyttä ruokatorven epiteelin sisällä[8]. Lisäksi tiedetään, että hoito PPI-lääkkeillä johtaa DIS:n ja närästyksen häviämiseen potilailla, joilla on sekä erosiivinen että ei-eroosiotyyppinen GERD[9]. E-kadheriini on proteiini, joka muodostaa zonula adherensin (ZA) solujen välisen tarttumissillan[10]; ja ZA:lla on olennainen rooli solujen välisen tiiviin liitoksen eheyden ylläpitämisessä siten, että e-kadheriinin silloittavien molekyylien välisen adheesion menetys johtaa estetoiminnan menettämiseen ja lisääntyneeseen solunulkoisen läpäisevyyden lisääntymiseen [11,12]. Siksi olosuhteissa, joissa ruokatorven ontelossa on hapan refluksaatti, "vuotava" liitoseste edistää vetyionien liiallista pääsyä solujen väliseen tilaan ja siten happamoitumista, mikä puolestaan ​​laukaisee närästystä aktivoimalla happoherkkiä hermosoluja limakalvo[13].

Äskettäin laboratorioni on havainnut, että (kanin) ruokatorven epiteelin ei-eroosioisessa happovauriossa esiintyvä DIS liittyy Western blot -tutkimuksissa e-kadheriinin solujen välisen osan pilkkoutumiseen ja että tämä pilkkoutuminen tapahtuu endogeenisen proteolyyttisen prosessin happoaktivoimalla ( julkaisemattomat havainnot). Lisäksi tämä sama ilmiö Western blot -tutkimuksissa toistuu GERD-potilaiden ruokatorvessa, eli ruokatorven epiteelin endoskooppiset biopsiat paljastavat e-kadheriinin pilkkoutumisen potilailla, joilla on sekä erosiivinen että ei-eroosiomainen GERD-muoto, mutta sitä ei ole läsnä ruokatorven epiteelissä. terveistä koehenkilöistä tai koehenkilöistä, joilla ei ole ruokatorven sairauden merkkejä tai oireita[14] – katso liitteenä olevan julisteesityksen kuva 4. Erityisesti e-kadheriinin pilkkominen GERD-potilailla jättää jälkeensä ruokatorven epiteelin sisällä molekyylin sytoplasmisen "C-terminaalisen fragmentin (CTF)", ja tämä CTF havaitaan helposti Western blot -menetelmällä. Mielenkiintoista on, että CTF:n koko on yhdenmukainen, kuten kanimallissa, endogeenisen matriisin metalloproteaasin aiheuttaman e-kadheriinin pilkkoutumisen kanssa. Huomionarvoista on myös se, että e-kadheriinin toinen pilkkoutunut solunulkoinen komponentti on "N-terminaalinen fragmentti (NTF)" ja tämä fragmentti imeytyy verenkiertoon, mikä johtaa korkeampiin e-kadheriinin NTF-pitoisuuksiin seerumissa kuin terveillä henkilöillä, mikä on havaittavissa kaupallinen ELISA-määritys[14] – katso liitteenä olevan julisteesityksen kuva 6. Koska endoskooppisten biopsioiden Western blot -testissä saadut CTF-arvot ja ELISA-testillä e-kadheriinin kohonneet NTF-arvot seerumissa heijastavat hapon vaurioitunutta ruokatorven epiteeliä, tämä viittaa houkuttelevaan mahdollisuuteen tehdä herkkä, minimaalisesti invasiivinen (seerumi) testi ruokatorven limakalvovaurioiden varalta. GERD-aihe. Oletamme, että jommankumman e-kadheriinin pilkkoutuneen fragmentin määrittäminen (seerumi tai kudospohjainen) voi tehdä eron niiden potilaiden välillä, joilla on happovälitteistä närästystä ja jotka ovat todennäköisesti PPI-responsiivisia, ja potilaiden välillä, joiden närästysoireet eivät ole hapon välittämiä ja niin edelleen. ovat PPI-tulenkestäviä.

Hypoteesi testataan määrittämällä e-kadheriinin CTF:ien olemassaolo tai puuttuminen ruokatorven biopsiassa ja mittaamalla e-kadheriinin NTF:ien taso närästystä sairastavien endoskopia-negatiivisten potilaiden seerumissa ja korreloimalla löydökset potilaan (närästys) kanssa. Kapidex 30 mg 4 viikon ajan. Kapidexin tehokkaan närästyksen hallinnan tai sen puutteen perusteella potilaat luokitellaan PPI-responsiivisiksi tai PPI-resistentiksi taudeiksi, ja nämä luokitukset korreloivat CTF:ien esiintymisen tai puuttumisen kanssa hoitoa edeltävässä biopsiassa ja hoitoa edeltäneiden e- kadheriini. Lisäksi 4 viikon Kapidex-hoidon jälkeen kaikilta hoidetuilta potilailta otetaan toistetut seeruminäytteet NTF:ien varalta, jotta voidaan määrittää paranemisen merkkinä, onko NTF:ien seerumitaso hoidon jälkeen merkittävästi alhaisempi kuin NTF:ien seerumitaso ennen hoitoa potilailla, joilla on PPI-responsiivinen närästys, mutta ei niillä, joilla on PPI-resistentti närästys.

Tämän tutkimuksen tulosten odotetaan osoittavan, että potilailla, joilla on PPI-responsiivinen närästys, on lähtötilanteessa e-kadheriinin CTF-arvot kudoksessa ja korkeammat e-kadheriinin NTF-tasot seerumissa, ja että nämä tasot laskevat onnistuneen PPI-hoidon jälkeen. Sitä vastoin, koska PPI-resistenttien potilaiden oireet eivät ole happovälitteisiä, näillä koehenkilöillä odotetaan olevan CTF:n puuttuminen kudoksesta ja NTF-tasot seerumissa alhaisemmat lähtötilanteessa verrattuna PPI-responsiivisiin potilaisiin, ja nämä tasot pysyvät muuttumattomina sen jälkeen. PPI-hoito. Näin ollen tällaiset havainnot vahvistaisivat e-kadheriinin pilkkoutuneiden fragmenttien havaitsemisen kudoksesta ja verestä hyödyllisinä taudin biomarkkereina, jotka voivat tunnistaa ne, joilla on närästys ja jotka reagoivat tavallisiin Kapidex-annoksiin. Tulosten odotetaan myös osoittavan, että potilailla, joilla on PPI-responsiivinen närästys, mutta ei potilailla, joilla on PPI-resistentti närästys, NTF-taso on laskenut merkittävästi seerumin hoidon jälkeen ja että tämän alhaisemman NTF-tason odotetaan laskevan säätimien valikoima. Näin ollen tällaiset havainnot osoittaisivat, että seerumin NTF:ien havaitseminen ennen hoitoa ja sen jälkeen voi olla hyödyllinen (mikroskooppisen) leesion paranemisen biomarkkerina potilailla, joilla on PPI-responsiivinen närästys. Tällaiset havainnot voivat auttaa valitsemaan alaryhmiä, jotka sopivat intensiivisempään (suurempi annos) tai pitkäaikaiseen PPI-hoitoon.