A E-caderina encontrada no tecido/sangue pode ser valiosa na identificação e monitoramento de pacientes com azia responsiva ao inibidor da bomba pós-próton (IBP)

O sintoma de azia já foi um indicador confiável de doença do refluxo gastroesofágico (DRGE) e, como tal, os pacientes responderiam previsivelmente à inibição ácida. No mundo pós-inibidor da bomba de prótons (IBP), nenhuma dessas afirmações é verdadeira, uma vez que muitos pacientes que apresentam azia apresentam sintomas mediados por mecanismos não relacionados à acidez luminal esofágica, por ex. doença funcional, hipersensibilidade visceral ou ativação de receptores de estiramento esofágico. Consequentemente, esses indivíduos não respondem aos IBPs [1-3]. Como os pacientes responsivos e refratários a IBP com azia são indistinguíveis pela história, é difícil determinar quais indivíduos não responsivos a IBP podem responder a doses mais altas de um IBP. Além disso, quando os indivíduos respondem à terapia com IBP, a resposta dos sintomas pode não se correlacionar com a cicatrização da lesão, tornando um marcador sistêmico de cicatrização altamente desejável. A cicatrização da lesão é particularmente problemática, uma vez que a lesão histopatológica que melhor se correlaciona com a azia é a presença de espaços intercelulares dilatados (DIS) no epitélio esofágico, que não podem ser detectados com endoscopia padrão e são demonstrados de maneira mais confiável pela microscopia eletrônica de transmissão [4- 7]. Consequentemente, seria desejável ter um marcador objetivo de lesão mediada por ácido no epitélio esofágico que pudesse identificar aqueles com azia responsiva a IBP e determinar a cicatrização do epitélio danificado por ácido de forma não invasiva.

DIS no epitélio esofágico foi estabelecida como uma característica histopatológica precoce da doença do refluxo gastroesofágico (DRGE). Esta lesão microscópica eletrônica está presente nas formas erosiva e não erosiva da DRGE e resulta de dano ácido ao complexo juncional intercelular que controla a permeabilidade paracelular dentro do epitélio esofágico [8]. Além disso, sabe-se que o tratamento com IBPs resulta na resolução do DIS junto com a azia em pacientes com tipos erosivos e não erosivos de DRGE [9]. A E-caderina é uma proteína que forma a ponte adesiva intercelular da zônula aderente (ZA)[10]; e o ZA desempenha um papel integral na manutenção da integridade da junção apertada entre as células, de modo que a perda de adesão entre as moléculas de ligação da e-caderina resulta na perda da função de barreira e aumento da permeabilidade paracelular [11,12]. Portanto, sob condições em que um refluxo ácido está presente no lúmen esofágico, uma barreira juncional "vazada" promove a entrada excessiva de íons de hidrogênio e, portanto, a acidificação do espaço intercelular, o que, por sua vez, desencadeia azia pela ativação de neurônios sensíveis ao ácido dentro do esôfago. mucosa[13].

Recentemente, meu laboratório descobriu que DIS em dano ácido não erosivo ao epitélio esofágico (coelho) está associado em Western blots com clivagem da porção intercelular da e-caderina e que essa clivagem ocorre por ativação ácida de um processo proteolítico endógeno ( observações inéditas). Além disso, esse mesmo fenômeno em Western blots é replicado no esôfago humano de pacientes com DRGE, ou seja, biópsias endoscópicas do epitélio esofágico revelam clivagem da e-caderina naqueles com formas erosivas e não erosivas de DRGE, mas não estão presentes no epitélio esofágico de indivíduos saudáveis ​​ou indivíduos sem sinais ou sintomas de doença esofágica[14] - veja a Fig. 4 da apresentação do pôster em anexo. Especificamente, a clivagem da e-caderina em pacientes com DRGE deixa para trás no epitélio esofágico um 'fragmento C-terminal (CTF)' citoplasmático da molécula e este CTF é facilmente detectado no Western blot. Curiosamente, o tamanho do CTF é consistente, como no modelo do coelho, com a clivagem da e-caderina por uma metaloprotease de matriz endógena. Também digno de nota é que o outro componente extracelular clivado da e-caderina é um 'fragmento N-terminal (NTF)' e este fragmento é absorvido na corrente sanguínea, resultando em níveis séricos mais elevados de NTFs de e-caderina do que indivíduos saudáveis ​​como detectável usando um ensaio ELISA comercial [14] - ver Fig. 6 da apresentação do pôster em anexo. Uma vez que CTFs em Western blot de biópsias endoscópicas e NTFs elevados de e-caderina por ELISA no soro são um reflexo do epitélio esofágico danificado por ácido, isso sugere a possibilidade tentadora de um teste sensível e minimamente invasivo (soro) para danos na mucosa esofágica no assunto DRGE. Nossa hipótese é que a determinação de qualquer um dos fragmentos clivados de e-caderina (sérico ou baseado em tecido) pode discriminar entre pacientes com azia mediada por ácido que provavelmente respondem a IBP e aqueles cujos sintomas de azia não são mediados por ácido e, portanto, são refratários a IBP.

A hipótese será testada determinando a presença ou ausência de CTFs de e-caderina na biópsia esofágica e medindo o nível de NTFs de e-caderina no soro de pacientes com endoscopia negativa com azia e correlacionando os achados com os do paciente (azia) resposta a Kapidex 30 mg durante 4 semanas. Com base no controle efetivo da azia com Kapidex ou na falta dele, os pacientes serão classificados como tendo doença responsiva a IBP ou refratária a IBP, respectivamente, e essas classificações correlacionadas com a presença ou ausência de CTFs na biópsia pré-tratamento e nível sérico pré-tratamento de NTFs de e- caderina. Além disso, após 4 semanas de Kapidex, amostras de soro repetidas para NTFs são obtidas de todos os pacientes tratados para determinar, como um marcador de cura, se o nível sérico de NTFs pós-tratamento é significativamente menor do que o nível sérico pré-tratamento de NTFs naqueles que tiveram Azia responsiva a IBP, mas não naqueles que têm azia refratária a IBP.

Espera-se que os resultados deste estudo mostrem que os pacientes com azia responsiva a IBP têm CTFs de e-caderina no tecido e níveis mais altos de NTFs de e-caderina no soro na linha de base, e que esses níveis diminuem após a terapia bem-sucedida com IBP. Em contraste, como os sintomas em indivíduos refratários a IBP não são mediados por ácido, espera-se que esses indivíduos não tenham CTFs nos tecidos e tenham níveis mais baixos de NTFs no soro na linha de base em comparação com pacientes responsivos a IBP, e esses níveis permanecerão inalterados após Terapia com IBP. Consequentemente, tais descobertas estabeleceriam a detecção de fragmentos clivados de e-caderina no tecido e no sangue como biomarcadores úteis de doenças que podem identificar aqueles com azia que respondem a doses padrão de Kapidex. Espera-se também que os resultados mostrem que os pacientes com azia responsiva a IBP, mas não aqueles com azia refratária a IBP, têm um declínio significativo no nível de NTFs no pós-tratamento sérico e que esse nível mais baixo de NTFs deve cair dentro a gama de controles. Consequentemente, tais descobertas estabeleceriam que a detecção de NTFs séricos antes e após o tratamento pode ser útil como um biomarcador de cicatrização (microscópica) de lesões naqueles com azia responsiva a IBP. Tais descobertas podem ajudar a selecionar subgrupos apropriados para terapia mais intensiva (dose mais alta) ou de longo prazo com IBP.