Может ли E-кадгерин, обнаруженный в тканях/крови, быть ценным для выявления и наблюдения за пациентами с изжогой, реагирующей на введение ингибитора протонной помпы (ИПП)

Симптом изжоги когда-то был надежным индикатором гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (ГЭРБ), и поэтому такие пациенты предсказуемо реагировали на ингибирование кислоты. В мире постингибиторов протонной помпы (ИПП) ни одно из этих утверждений не является верным, поскольку у многих пациентов с изжогой симптомы опосредованы механизмами, не связанными с кислотностью просвета пищевода, т.е. функциональное заболевание, висцеральная гиперчувствительность или активация рецепторов растяжения пищевода. Следовательно, эти субъекты не реагируют на ИПП [1-3]. Поскольку чувствительные к ИПП и рефрактерные к ИПП пациенты с изжогой неразличимы по анамнезу, трудно определить, какие пациенты, не реагирующие на ИПП, могут реагировать на более высокие дозы ИПП. Кроме того, когда субъекты реагируют на терапию ИПП, симптоматическая реакция может не коррелировать с заживлением поражения, что делает весьма желательным системный маркер заживления. Заживление поражений является особенно проблематичным, поскольку гистопатологическое поражение, которое лучше всего коррелирует с изжогой, представляет собой наличие расширенных межклеточных пространств (DIS) в эпителии пищевода, которые не могут быть обнаружены с помощью стандартной эндоскопии и наиболее достоверно демонстрируются с помощью просвечивающей электронной микроскопии [4-4]. 7]. Следовательно, было бы желательно иметь объективный маркер опосредованного кислотой повреждения эпителия пищевода, который мог бы идентифицировать пациентов с изжогой, реагирующей на ИПП, и определять заживление поврежденного кислотой эпителия неинвазивно.

DIS в эпителии пищевода был установлен как ранний гистопатологический признак гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (ГЭРБ). Это электронно-микроскопическое поражение присутствует как при эрозивной, так и при неэрозивной формах ГЭРБ и возникает в результате повреждения кислотой межклеточного соединительного комплекса, который контролирует парацеллюлярную проницаемость эпителия пищевода [8]. Кроме того, известно, что лечение ИПП приводит к исчезновению ДИС наряду с изжогой у пациентов как с эрозивным, так и с неэрозивным типами ГЭРБ [9]. Е-кадгерин представляет собой белок, который образует межклеточный адгезивный мостик адгезивной зоны (ZA) [10]; ZA играет неотъемлемую роль в поддержании целостности плотных контактов между клетками, так что потеря адгезии между мостиковыми молекулами е-кадгерина приводит к потере барьерной функции и увеличению парацеллюлярной проницаемости [11,12]. Следовательно, в условиях, когда в просвете пищевода присутствует кислый рефлюксат, «дырявый» соединительный барьер способствует избыточному проникновению ионов водорода в межклеточное пространство и, таким образом, закислению межклеточного пространства, что, в свою очередь, вызывает изжогу за счет активации чувствительных к кислоте нейронов внутри пищевода. слизистая [13].

Недавно моя лаборатория обнаружила, что DIS при неэрозивном кислотном повреждении (кроличьего) эпителия пищевода связан на Вестерн-блоттинге с расщеплением межклеточной части е-кадгерина и что это расщепление происходит за счет активации кислотой эндогенного протеолитического процесса. неопубликованные наблюдения). Более того, то же самое явление на Вестерн-блотах повторяется в пищеводе человека у пациентов с ГЭРБ, т.е. эндоскопическая биопсия эпителия пищевода выявляет расщепление е-кадгерина как у пациентов с эрозивной, так и неэрозивной формами ГЭРБ, но не присутствует в эпителии пищевода. здоровых субъектов или субъектов без признаков или симптомов заболевания пищевода [14] — см. рис. 4 прилагаемого постера. В частности, расщепление е-кадгерина у пациентов с ГЭРБ оставляет внутри эпителия пищевода цитоплазматический «С-концевой фрагмент (CTF)» молекулы, и этот CTF легко обнаруживается с помощью вестерн-блоттинга. Интересно, что размер CTF согласуется, как и в кроличьей модели, с расщеплением е-кадгерина эндогенной матриксной металлопротеазой. Также следует отметить, что другим расщепленным внеклеточным компонентом е-кадгерина является «N-концевой фрагмент (NTF)», и этот фрагмент всасывается в кровоток, что приводит к более высоким уровням НТФ е-кадгерина в сыворотке, чем у здоровых людей, что можно обнаружить с помощью коммерческий анализ ELISA [14] - см. рис. 6 прилагаемой презентации. Поскольку CTF на Вестерн-блоттинге эндоскопических биопсий и повышенные NTF е-кадгерина по данным ELISA в сыворотке отражают поврежденный кислотой эпителий пищевода, это предполагает заманчивую возможность чувствительного, минимально инвазивного (сывороточного) теста на повреждение слизистой оболочки пищевода в Тема ГЭРБ. Мы предполагаем, что определение любого из расщепленных фрагментов е-кадгерина (в сыворотке или в тканях) может различать пациентов с изжогой, опосредованной кислотой, которые, вероятно, реагируют на ИПП, и тех, у кого симптомы изжоги не опосредованы кислотой и т. являются PPI-рефрактерными.

Гипотеза будет проверена путем определения наличия или отсутствия CTF е-кадгерина в биоптате пищевода и путем измерения уровня НТФ е-кадгерина в сыворотке эндоскопически-негативных пациентов с изжогой и сопоставления результатов с состоянием пациента (изжогой). ответ на Капидекс 30 мг в течение 4 недель. Основываясь на эффективном контроле изжоги капидексом или его отсутствии, пациенты будут классифицированы как имеющие ИПП-чувствительное или ИПП-рефрактерное заболевание, соответственно, и эти классификации коррелируют с наличием или отсутствием CTF в биопсии до лечения и уровнем NTF в сыворотке до лечения e- кадгерин. Кроме того, после 4 недель применения Капидекса у всех пролеченных пациентов берут повторные образцы сыворотки на НТФ, чтобы определить в качестве маркера заживления, является ли уровень НТФ в сыворотке после лечения значительно ниже, чем уровень НТФ в сыворотке до лечения у тех, у кого Изжога, реагирующая на ИПП, но не у пациентов с рефрактерной к ИПП изжогой.

Ожидается, что результаты этого исследования продемонстрируют, что пациенты с изжогой, реагирующей на ИПП, имеют CTF е-кадгерина в тканях и более высокие уровни НТФ е-кадгерина в сыворотке на исходном уровне, и что эти уровни снижаются после успешной терапии ИПП. Напротив, поскольку симптомы у пациентов, рефрактерных к ИПП, не опосредованы кислотой, ожидается, что у этих субъектов будет отсутствовать CTF в тканях и иметь более низкие уровни NTF в сыворотке на исходном уровне по сравнению с пациентами, чувствительными к ИПП, и эти уровни останутся неизменными после лечения. ИПП терапия. Следовательно, такие результаты позволят установить обнаружение расщепленных фрагментов е-кадгерина в тканях и крови в качестве полезных биомаркеров заболевания, которые могут идентифицировать людей с изжогой, которые реагируют на стандартные дозы капидекса. Ожидается, что результаты также покажут, что у пациентов с изжогой, реагирующей на ИПП, но не у пациентов с рефрактерной к ИПП изжогой, наблюдается значительное снижение уровня НТФ в сыворотке после лечения, и ожидается, что этот более низкий уровень НТФ будет находиться в пределах ассортимент элементов управления. Следовательно, такие результаты должны установить, что обнаружение NTF в сыворотке до и после лечения может быть полезным в качестве биомаркера (микроскопического) заживления поражений у пациентов с изжогой, реагирующей на ИПП. Такие результаты могут помочь выбрать подгруппы, подходящие для более интенсивной (более высокие дозы) или долгосрочной терапии ИПП.