Endoskopiaa edeltävä serologinen testaus keliakian varalta; uusi lähestymistapa nopealla vasta-ainetestauksella

Keliakia on yleisin lääkärien kohtaama krooninen tulehduksellinen suolistosairaus. Kansainvälisesti serologisella seulonnalla arvioitu esiintyvyys terveillä vapaaehtoisilla on 0,5-1,0 %. Historiallisesti aikuisten keliakiapotilaat valittivat oireista, jotka viittaavat imeytymishäiriöön, ripuliin, laihtumiseen tai anemiaan. Tätä esitystapaa kuvataan nyt klassiseksi (tyypilliseksi) muotoksi. Tämän taudin tunnistamatta jättäminen voi johtua sen esillepanon salakavalasta luonteesta. Yksilöillä, joilla on diagnosoimaton keliakia, voi olla useita sairaalahoitoja ennen diagnoosia.

Vaikka keliakiaa sairastavien potilaiden esittely saattaa olla proteaanista, serologiset markkerit ovat tarjonneet halvan ja ei-invasiivisen menetelmän, jolla sekä perus- että toissijaisessa hoidossa kliinikot voivat aluksi tunnistaa potilaat, joilla saattaa olla keliakia. Tämän tutkimuksen tavoitteena on arvioida kokoveren transglutaminaasipohjaisen pikatestin kliinistä käyttökelpoisuutta nykyisiin serologisiin testeihin ja pohjukaissuolen biopsian kultastandardiin verrattuna.

Menetelmät:

Tutkimussuunnitelma ja osallistujaryhmä 1 oli monikeskus-retrospektiivinen analyysi kaikista anemiapotilaista, jotka osallistuivat gastroskopiaan ja pohjukaissuolen biopsiaan neljässä Yhdistyneen kuningaskunnan sairaalassa (Addenbrooke's, Bradford, Hull ja Whipps Cross) 12 kuukauden ajanjaksolla vuosina 2012–2014. Keliakiaserologian saatavuus ennen gastroskopiaa tarkistettiin.

Ryhmä 2 oli prospektiivinen tutkimus, jossa verrattiin Simtomaxin herkkyyttä tavanomaiseen serologiaan raudanpuutteellisessa kohortissa. Rekrytoimme 133 peräkkäistä potilasta (ikähaarukka: 18–89 vuotta, mediaani 53), joilla oli raudanpuute anemialla tai ilman anemiaa ja jotka osallistuivat yhdelle keliakiatutkimuksen endoskopialistalle kolmannen asteen lähetekeskuksen Royal Hallamshire Hospitaliin vuosina 2013–2015. Kaikki värvätyt potilaat hyväksyttiin tutkimukseen ennen gastroskopiaa. Potilaat suorittivat samanaikaisesti hoitopistetestin, Simtomaxin, tavanomaisen keliakiaserologian (IgA-TTG, IgA-EMA) ja kokonais-IgA-tason endoskopiayksikössä. Kaikille potilaille tehtiin sitten gastroskopia, jossa pohjukaissuolen toisesta osasta otettiin kvadranttinen pohjukaissuolen biopsia ja vähintään yksi pohjukaissuolen sipulibiopsia. Potilaat suljettiin pois tutkimuksesta, jos heillä tiedettiin sairastavan keliakiaa tai he olivat gluteenittomalla ruokavaliolla. Potilaat, joilla oli tutkimuksessa havaittu koagulopatia, aktiivinen maha-suolikanavan verenvuoto tai epäilty karsinooma, suljettiin myös pois. Potilaiden kliiniset tiedot olivat endoskooppilääkärin saatavilla, mutta endoskopisti oli sokeutunut Simtomax-testin tuloksiin.

Ryhmä 3 oli retrospektiivinen histologinen analyysi Pohjoisen yleissairaalan erillisellä ei-keliakiaspesifisellä raudanpuuteanemiaklinikalla vuosina 2013-2014 olevista potilaista. Kävimme läpi heidän pohjukaissuolen histologiansa ja sairaalatapausten muistiinpanot määrittääksemme muiden vaihtoehtoisten syiden kuin keliakian tuoton raudanpuuteanemian yhteydessä.

Hoitopistetesti, Simtomax:

Simtomax on sveitsiläisen Augurix Diagnosticsin valmistama keliakian hoitopistetesti. Se havaitsee sekä IgA- että IgG-vasta-aineet DGP:tä vastaan ​​sekä IgA:n kokonaistason. Määritys perustuu lateraalivirtaus-immunokromatografiaan, jossa käytetään kolloidisia kultaisia ​​antiihmisvasta-aineita signaalidetektorina. Tarvitaan 25 μl:n näyte kapillaarilaskimoverta, joka voidaan saada yksinkertaisella sormenpistotekniikalla. Määritys voidaan suorittaa myös käyttämällä plasmanäytettä joko etyleenidiamiinitetraetikkahapossa (EDTA) tai hepariinissa sekä erotettua seeruminäytettä, vaikka vaaditaankin pienempi näytetilavuus, 20 μl. Verinäyte laitetaan sitten testilaitteeseen, minkä jälkeen lisätään 5 tippaa mukana toimitettua puskuriliuosta. Tulos voidaan lukea 10 minuutin kuluttua. Positiiviset tulokset osoittavat kiinteän punaisen testiviivan läsnäolo IgA- ja/tai IgG-DGP-positiivisuudelle. Toinen yksittäinen punainen viiva osoittaa IgA:n läsnäolon. Sisäänrakennettu punainen ohjausviiva varmistaa oikein toimivan testin.

Serologia:

Kokonais-IgA mitattiin Behring BN2 -nefelometrillä. IgA-TTG-vasta-aineet arvioitiin käyttämällä entsyymi-immunosorbenttimäärityspakkauksia (Aesku Diagnostics, Wendelsheim, Saksa). IgA-TTG-titteri > 15 U/ml ennen 20.5.2014, uusi rajataso >9 U/ml 20.5.-11.12.2014 ja sen jälkeen >7 U/ml 12. 12/2014 eteenpäin katsottiin valmistajan ohjeiden mukaan positiivisiksi. IgA-EMA havaittiin immunofluoresenssilla kädellisten ruokatorven leikkeistä (Binding Site, Birmingham, UK).

Biopsiat ja histologia

Kaiken kaikkiaan pohjukaissuolesta otettiin vähintään viisi biopsiaa, mukaan lukien vähintään yksi pohjukaissuolen sipulista, ja jokainen biopsia kiinnitettiin formaliiniin gastroskopian aikana. Sitten patologian osasto käsitteli, suuntasi ja upotti näytteet parafiinivahaan. Normaalit 3 µm paksut leikkeet kolmella tasolla värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla, ja maha-suolikanavan histopatologit raportoivat rutiininomaisesti Simtomax-tuloksista tietämättä. Villous atrofia luokiteltiin modifioitujen Marsh-kriteerien mukaan.

Keliakian diagnoosi:

Keliakian diagnosoimiseksi vaadittiin villousatrofian (Marsh 3a-3c) esiintyminen histologiassa, jossa oli positiivinen IgA-EMA tai IgA-TTG. Seronegatiivisen villosatrofian tapauksissa suoritettiin ihmisen leukosyyttiantigeenin (HLA) genotyypitys ja negatiivista HLA DQ2- tai DQ8-fenotyyppiä käytettiin keliakian poissulkemiseksi. Myös tukitiedot, kuten sukuhistoria ja vastaus gluteenittomaan ruokavalioon, otettiin huomioon.