Pruebas serológicas previas a la endoscopia para la enfermedad celíaca; un enfoque novedoso utilizando pruebas rápidas de anticuerpos

La enfermedad celíaca es la afección intestinal inflamatoria crónica más común que encuentran los médicos. A nivel internacional la prevalencia estimada por cribado serológico en voluntarios sanos se sitúa entre el 0,5-1,0%. Históricamente, los pacientes con enfermedad celíaca del adulto se quejaban de síntomas que sugerían malabsorción, diarrea, pérdida de peso o anemia. Esta forma de presentación ahora se describe como la forma clásica (típica). La falta de reconocimiento de esta enfermedad puede deberse a la naturaleza insidiosa de su presentación. Las personas con enfermedad celíaca no diagnosticada pueden tener numerosas visitas al hospital antes del diagnóstico.

Aunque la presentación de pacientes con enfermedad celíaca puede ser variable, los marcadores serológicos han proporcionado un método económico y no invasivo mediante el cual los médicos de atención primaria y secundaria pueden reconocer inicialmente a los pacientes que pueden tener enfermedad celíaca. El objetivo de este estudio es evaluar la utilidad clínica de la prueba rápida basada en transglutaminasa en sangre total frente a las pruebas serológicas actuales y el patrón oro de la biopsia duodenal.

Métodos:

El diseño del estudio y el Grupo de participantes 1 fue un análisis retrospectivo multicéntrico de todos los pacientes con anemia que asistieron a una gastroscopia con biopsia duodenal en cuatro hospitales del Reino Unido (Addenbrooke's, Bradford, Hull y Whipps Cross) durante un período de 12 meses que va de 2012 a 2014. Se revisó la disponibilidad de serología celíaca previa a la gastroscopia.

El grupo 2 fue un estudio prospectivo que comparó las sensibilidades de Simtomax con la serología convencional en una cohorte con deficiencia de hierro. Reclutamos prospectivamente a 133 pacientes consecutivos (rango de edad: 18-89 años, mediana 53) con deficiencia de hierro con o sin anemia que asistieron a una única lista de endoscopia de investigación de enfermedad celíaca en el centro de referencia terciario Royal Hallamshire Hospital entre 2013 y 2015. Todos los pacientes reclutados fueron consentidos para el estudio antes de la gastroscopia. A los pacientes se les realizó simultáneamente la prueba en el punto de atención, Simtomax, serología celíaca convencional (IgA-TTG, IgA-EMA) y niveles de IgA total en la unidad de endoscopia. A todos los pacientes se les realizó una gastroscopia con biopsia duodenal cuadrantica de la segunda parte del duodeno y al menos una biopsia del bulbo duodenal. Los pacientes fueron excluidos del estudio si se sabía que tenían enfermedad celíaca o si seguían una dieta sin gluten. También se excluyeron los pacientes con coagulopatía, hemorragia digestiva activa o sospecha de carcinoma observados durante el examen. La información clínica de los pacientes estaba disponible para el endoscopista, sin embargo, el endoscopista desconocía los resultados de la prueba Simtomax.

El grupo 3 fue un análisis histológico retrospectivo de pacientes que asistieron a una clínica separada de anemia por deficiencia de hierro específica no celíaca en el Hospital General del Norte en 2013-2014. Revisamos su histología duodenal y las notas de casos hospitalarios para determinar el rendimiento de causas alternativas distintas de la enfermedad celíaca en el contexto de la anemia por deficiencia de hierro.

Prueba en el punto de atención, Simtomax:

Simtomax es una prueba de punto de atención para la enfermedad celíaca fabricada por Augurix Diagnostics, Suiza. Detecta anticuerpos IgA e IgG contra DGP, así como el nivel total de IgA. El ensayo se basa en inmunocromatografía de flujo lateral utilizando anticuerpos antihumanos de oro coloidal como detector de señal. Se requiere una muestra de 25 μl de sangre venosa capilar que se puede obtener mediante una simple técnica de pinchazo en el dedo. El ensayo también se puede realizar utilizando una muestra de plasma en ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) o heparina, así como una muestra de suero separada, aunque se requiere un volumen de muestra menor de 20 μl. Luego, la muestra de sangre se aplica al dispositivo de prueba, seguido de la aplicación de 5 gotas de la solución tampón provista. El resultado se puede leer después de 10 minutos. Los resultados positivos se indican mediante la presencia de una línea de prueba roja sólida para la positividad de IgA y/o IgG-DGP. Una segunda línea roja única indica la presencia de IgA. Una línea de control roja incorporada garantiza una prueba de funcionamiento correcto.

Serología:

La IgA total se midió en un nefelómetro Behring BN2. Los anticuerpos IgA-TTG se evaluaron utilizando kits de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (Aesku Diagnostics, Wendelsheim, Alemania). Un título de IgA-TTG de > 15 U/ml antes del 20/5/2014, un nuevo nivel de corte de >9 U/ml del 20/5 al 11/12/2014, y luego >7 U/ml del 12/ 12/2014 en adelante, se consideraron positivos según las recomendaciones del fabricante. IgA-EMA se detectó mediante inmunofluorescencia en secciones de esófago de primates (Binding Site, Birmingham, Reino Unido).

Biopsias e histología

En total, se tomaron al menos cinco biopsias del duodeno, incluida al menos una del bulbo duodenal, y cada biopsia se fijó en formalina en el momento de la gastroscopia. A continuación, el departamento de patología procesó, orientó e incrustó las muestras en cera de parafina. Las secciones estándar de 3 µm de espesor en tres niveles se tiñeron con hematoxilina y eosina y los histopatólogos gastrointestinales informaron de forma rutinaria sin conocimiento de los resultados de Simtomax. La atrofia de las vellosidades se clasificó según los criterios de Marsh modificados.

Diagnóstico de la enfermedad celíaca:

Se requirió la presencia de atrofia de las vellosidades (Marsh 3a-3c) en la histología con IgA-EMA o IgA-TTG positivo para el diagnóstico de enfermedad celíaca. En los casos de atrofia de vellosidades seronegativas, se realizó genotipado de antígeno leucocitario humano (HLA), con fenotipo HLA DQ2 o DQ8 negativo para descartar enfermedad celíaca. También se tuvo en cuenta la información de apoyo, como los antecedentes familiares y la respuesta a una dieta sin gluten.