Ammattiurheilijoiden suoliston mikrobiston muokkaaminen hapankaali-ravintolisällä (KOMS)

Aineisto, osallistujat, metodologia ja tutkimussuunnitelma Tutkimuksen aiheena ovat interventiot hapankaalin kanssa suoliston mikrobiston moduloimiseksi synbioottisena aineena, jonka vaikutus on todettu aikaisemmissa ihmisissä tehdyissä tieteellisissä tutkimuksissa ja joka vähäisen esiintyvyyden vuoksi sivuvaikutuksia, on arvioitu yleisesti turvallisiksi. Interventio koskee hapankaalin käyttöä. 10 päivän aikana koehenkilöt kuluttavat noin 250 g hapankaalia (Brassica oleracea v. capitata) päivittäin. Tutkimusmateriaali on lahjoitus Eko Bio Zrnje -yritykseltä, Vrbovec, Kroatia. Se on suolaliuoksessa (NaCl) fermentoimalla valmistettua suolakurkkua, jossa käyminen pysäytettiin pastöroimalla ja pakattiin 500g lasipurkkeihin. Ravitsemuksellista ja mikrobiologista koostumusta testattiin elintarvike- ja biotekniikan tiedekunnan laboratorioissa, ja viljelylaboratoriomenetelmällä varmistettiin maitohappoa tuottavien bakteerien esiintyminen (4,82·103 (±2,31) pesäkettä muodostava yksikkö/ml) potentiaalinen probiootti, jonka vuoksi tätä tuotetta voidaan pitää synbioottina. Lisäksi hapankaali analysoitiin käyttämällä 16s ribosomaalista ribonukleiinihappoa, luonnollista opastähti seuraavan sukupolven sekvensointia ei-konvulsiivisilla generalized status epilepticus normaali vuohen seerumimenetelmillä siinä olevien bakteerien geneettisen materiaalin läsnäolon perusteella. Pastöroinnin osalta hapankaali ei ole välttämätön kylmäketjuperiaatteen mukainen kuljetus ja varastointi. Intervention tuloksia suoliston mikrobiotan moduloinnissa verrataan aikaisemman tutkimuksen tuloksiin, joissa tutkittavana oli suoliston mikrobiotan modulaatio liukoisella kuidulla NUTRIOSE ammattiurheilijoilla. NUTRIOSE ovat resistenttejä maltodekstriinejä, eli ei-viskoosisia liukenevia kuituja, jotka on saatu vehnästä ja maissista (Roquette Freres, Lestrem, Ranska), joilla on todistettu prebioottinen vaikutus.

vastaajat Tutkimusta varten muodostetaan kohortti, jossa on vähintään yhdeksän vastaajaa - ammattiurheilijoita. Vastaajien otos määritettiin tutkimuksen tekniset, logistiset ja taloudelliset olosuhteet, ja se perustuu siihen, että vertailu yhdeksän aiemman tutkimuksen (NCT05726435) kohorttiin, jotka olivat altistuneet prebioottien interventiolle ja joita kontrolloitiin lumelääkkeellä. tavoitteena moduloida ammattiurheilijoiden suoliston mikrobiota. Vastaajien rekrytointi toteutetaan yhteistyössä tutkimuskumppanien (HOO) kanssa ja tutkijan sosiaalisesta ympäristöstä verkkokyselyllä.

Metodologia

Työmenetelmät: dieteettiset menetelmät, antropometriset menetelmät sekä laskimoveri- ja ulostenäytteiden kerääminen ja analysointi. Muuttujien näyte koostuu: ulostenäytteestä suoliston mikrobiston sekvensointia varten, laskimoveren näytteestä laboratoriokäsittelyä varten, morfologisten ominaisuuksien (kehon pituus, paino, rasvakudoksen ja lihaskudoksen prosenttiosuus laskettuna) arvioimiseksi. kehon koostumuksen analysaattori - TANITA bioimpedanssi). Ruokavaliomenetelmillä valvotaan kaikkien ravintoaineiden saantia ennen interventiota ja sen aikana sekä seurantavaiheen aikana. Menetelmästä tulee ruokapäiväkirja (seitsemän päivän ja kymmenen päivän). Kaikki kerätyt ruokavaliotiedot käsitellään Balkanin alueen elintarvikkeiden ja valmisruokien Capnutr-atlasissa (Glibetić et al., 2018).

Tutkimussuunnitelma Tutkimus suunniteltiin prospektiiviseksi kohorttitutkimukseksi. Tutkimus suoritetaan Helsingin julistuksen määräysten mukaisesti ja Zagrebin yliopiston lääketieteellisen tiedekunnan eettisen komitean 27.3.2023 hyväksynnän mukaisesti. Tutkimus toteutetaan kahdessa vaiheessa: ensimmäisessä vaiheessa koehenkilöille täydennetään hapankaalia kymmenen päivän ajan ja toisessa kuukauden mittaisessa vaiheessa seurataan suolen mikrobiota ilman, että suoliston mikrobiotaa yritetään moduloida ("pesu". -ulos"). Yhteistyössä HOO:n sekä akateemisten ja liikekumppaneiden kanssa ammattiurheilijoita kutsutaan täyttämään virtuaalilomake "Urheilijat ja suoliston mikrobiomi", eli kyselylomake urheilijoiden tiedosta suolen mikrobiomista. Tietojen käsittelyssä tunnistetaan mahdolliset tutkimusehdokkaat. Hakijoihin ollaan yhteydessä puhelimitse, tiedotetaan tutkimuksesta ja arvioidaan lyhyessä keskustelussa kriteereistä päälle ja pois. Ehdokkaat, jotka täyttävät kriteerit, sisällytetään kohorttiin. Kohortin perustamisen jälkeen tehdään logistiset järjestelyt ja opintosuunnitelma. Tutkimus jaetaan kolmeen vaiheeseen: ennen interventiota, sen aikana ja sen jälkeen. Ensin koehenkilöille tiedotetaan opintosuunnitelmasta (aika, käyntien määrä, logistiikka), jolle tietoinen suostumus on saatu. Interventiota edeltävässä vaiheessa järjestetään kokous, jossa kerrotaan useammin tutkimuksen suunnitelmasta ja kulusta, määritellään määräajat ja jaetaan näytteenottovälineet ja lähetetään toimitetut lomakkeet (Excel, Microsoft Office, USA). Ensimmäisen vaiheen jatkossa vastaajat kirjaavat muistiin päivittäisen ravinnonsaannin, liikunnan keston ja intensiteetin sekä uniajan. Samoin kyselyt ruokavalion laadusta (DQQ), ravitsemustietoa koskeva kyselylomake ja kronotyyppikysely. Interventiota edeltävänä päivänä koehenkilöt antavat uloste- ja verinäytteitä ja täyttävät sitten hyväksyttävän päiväannoksen. Intervention aikana vastaajat ovat jatkuvassa yhteydessä tutkijatiimiin. Ne tallentavat erityisessä muodossa interventioon sitoutumisen (esimerkiksi kaalin syömisajan tiedot) ja mahdolliset sivuvaikutukset (muutokset ulosteessa, ilmavaivat, tuuli) sekä ulosteen tyypin Bristolin asteikon mukaan. . Intervention aikana koehenkilöt jatkavat ruokavalio-, liikunta- ja unipäiväkirjan pitämistä. Intervention jälkeen he antavat verinäytteen uudelleen ja näyte ensimmäisestä tuolii toimenpiteen jälkeen samalla periaatteella kuin ennen interventiota. Vastaajat täyttävät myös ADI:n uudelleen. Toisessa vaiheessa tutkittavat jatkavat kommunikointia tutkijoiden kanssa, ja kahden kuukauden kuluttua viimeisestä ulostenäytteestä otetaan uudelleen ulostenäyte tutkittavalta ja suoliston mikrobiston analyysi suoritetaan uudelleen. Aineiston käsittelyn aikana tämän tutkimuksen tuloksia verrataan aikaisemman tutkimuksen tuloksiin, mikä eroaa tästä tutkimuksesta, jossa interventiossa käytettiin prebiootteja eikä synbioottia. Aiempi tutkimus rekisteröity ClinicalTrials.gov-sivustolle rekisteri numerolla NCT05726435 suunniteltiin satunnaistetuksi lumekontrolloiduksi interventiotutkimukseksi. Vastaajat, ammattiurheilijat, saivat neljän viikon aikana joko prebiootteja, NUTRIOSE-kuituja tai lumelääkettä 20g jaettuna kahteen 10g:n annokseen. Suoliston mikrobiota analysoitiin useaan otteeseen kuvatun toimenpiteen aikana. Tämän tutkimuksen tuloksia verrataan erityisesti suoliston mikrobiotaanalyysin tuloksiin kahdessa ajankohtana: 2 viikon toimenpiteen jälkeen ja 8 viikon kuluttua interventiosta, jolloin koehenkilöt olivat 4 viikkoa ilman prebiootteja tai lumelääkettä. itse interventio.

Tietojenkäsittelymenetelmät:

Kategoristen muuttujien väliset erot testataan khin neliötestillä. Ei-kategoristen muuttujien välisiä eroja tarkastellaan jakautumisesta ja ryhmien lukumäärästä riippuen, parillinen t-testi sekä Kruskal-Wallisin ja Mann-Whitneyn U-testi ja sitten Bonferoni-testi post hoc -analyysiä varten.

Mahdollisten korrelaatioiden selvittämiseksi käytetään Pearson-korrelaatiokertoimien laskentaa ravitsemustilan parametrien, kehon koostumuksen ja ruokavalion välillä. Kyselylomakkeet validoidaan laskemalla Cronbach-alfa-kerroin jokaiselle niiden kohteelle ja tutkivalla yksitekijäanalyysillä, ja sisäinen johdonmukaisuus määritetään laskemalla Pearsonin korrelaatiokertoimet yksittäisten kohteiden kyselylomakkeen välillä. Yksittäisten taksonomisten luokkien suhteellisia osuuksia käytetään Shannon-Wienerin monimuotoisuusindeksin laskemiseen, jotta voidaan verrata näyteryhmän välistä monimuotoisuutta ennen ja jälkeen interventiota. Klusterianalyysi suoritetaan käyttämällä BioNumerics-ohjelmaa (Applied Maths, Belgia), joka perustuu Haemophilus haemolyticus -restriktioendonukleaasi I- ja MSPi T-restriktio-fragmenttien pituuden polymorfismiin. P-arvot alle 0,05 katsotaan tilastollisesti merkitseviksi. Tilastollista tietojenkäsittelyä varten käytetään SPSS 19.0 -ohjelmaa (IBM, Chicago, USA).