Модуляция кишечной микробиоты профессиональных спортсменов с помощью добавок квашеной капусты (KOMS)

Материал, участники, методология и план исследования. Предметом исследования будут воздействия квашеной капусты для модуляции микробиоты кишечника как синбиотика, как вещества, действие которого было установлено в предыдущих научных исследованиях на человеке и которое из-за низкой заболеваемости побочные эффекты были оценены как в целом безопасные. Вмешательство будет касаться использования квашеной капусты. В течение 10 дней испытуемые ежедневно потребляли примерно 250 г квашеной капусты (Brassica oleracea v. capitata). Материал исследования предоставлен компанией Eko Bio Zrnje, Врбовец, Хорватия. Это тертый маринованный капуста, произведенная путем ферментации в солевом растворе (NaCl), в котором брожение остановлено пастеризацией, и расфасована в стеклянные банки по 500 г. Пищевой и микробиологический состав проверен в лабораториях факультета пищевых продуктов и биотехнологии, а также культурально-лабораторным подходом подтверждено наличие бактерий, продуцирующих молочную кислоту (4,82·103 (±2,31) колониеобразующих единиц/мл) с потенциальный пробиотик, благодаря чему данный продукт можно считать синбиотиком. Кроме того, квашеную капусту анализировали с использованием методов секвенирования 16s рибосомальной рибонуклеиновой кислоты естественной направляющей звезды нового поколения для бессудорожного генерализованного эпилептического статуса нормальной сыворотки коз на наличие в ней генетического материала бактерий. Что касается пастеризации, то квашеную капусту не придется транспортировать и хранить по принципу холодовой цепи. Результаты вмешательства в отношении модуляции кишечной микробиоты будут сравниваться с результатами предыдущего исследования, предметом которого была модуляция кишечной микробиоты с помощью растворимой клетчатки НУТРИОЗА у профессиональных спортсменов. NUTRIOSE – это устойчивые к мальтодекстрину, то есть невязкие растворимые волокна, полученные из пшеницы и кукурузы (Roquette Freres, Лестрем, Франция) с доказанным пребиотическим действием.

респонденты. Для целей исследования будет сформирована когорта минимум из девяти респондентов – профессиональных спортсменов. Выборка респондентов была определена техническими, логистическими и финансовыми условиями исследования и основана на том факте, что сравнение с когортами из 9 субъектов из предыдущего исследования (NCT05726435), которые подверглись воздействию пребиотиков и контролировались плацебо с целевая модуляция микробиоты кишечника профессиональных спортсменов. Набор респондентов будет осуществляться в сотрудничестве с партнерами по исследованию (HOO) и из социального окружения исследователя с помощью онлайн-анкеты.

Методология

Методы работы: диетические методы, антропометрические методы, сбор и анализ образцов венозной крови и кала. Выборка переменных состоит из: образца кала для секвенирования кишечной микробиоты, образца венозной крови для лабораторной обработки, показателей для оценки морфологических характеристик (рост, масса тела, процентное содержание жировой и мышечной ткани, рассчитанных по методу анализатор состава тела – биоимпеданс TANITA). Диетические методы будут использоваться для контроля потребления всех питательных веществ до и во время вмешательства, а также на этапе последующего наблюдения. Из методики будет дневник питания (семидневный и десятидневный). Все собранные данные о питании будут обработаны с помощью атласа продуктов питания и готовых блюд Capnutr из Балканского региона (Glibetić et al., 2018).

План исследования Исследование было задумано как проспективное когортное исследование. Исследование будет проводиться в соответствии с положениями Хельсинкской декларации и в соответствии с одобрением Комитета по этике медицинского факультета Загребского университета от 27.3.2023. Исследование будет проводиться в два этапа: на первом этапе испытуемые будут получать квашеную капусту в течение десяти дней, а на втором этапе в течение одного месяца будут контролироваться кишечная микробиота без попыток модулировать кишечную микробиоту («промывать -вне"). В сотрудничестве с HOO и академическими и деловыми партнерами профессиональным спортсменам будет предложено заполнить виртуальную форму «Спортсмены и кишечный микробиом», то есть анкету о знаниях спортсменов о кишечном микробиоме. Обработка данных позволит выявить потенциальных кандидатов для исследования. С кандидатами свяжутся по телефону, проинформируют об исследовании и дадут оценку в короткой беседе относительно включенных и выключенных критериев. Кандидаты, соответствующие критериям, будут включены в когорту. После создания когорты будут приняты логистические меры и составлен план исследования. Исследование будет разделено на три этапа: до, во время и после вмешательства. Сначала субъекты будут проинформированы о плане исследования (время, количество посещений, логистика), на который было получено информированное согласие. На этапе перед вмешательством будет проведена встреча, на которой еще раз объяснят план и ход исследования, определят сроки, раздадут оборудование для взятия пробы и отправят предоставленные формы (Excel, Microsoft Office, США). В продолжение первого этапа респонденты будут фиксировать ежедневное потребление пищи, продолжительность и интенсивность физической активности, а также время сна. Аналогично, анкеты по вопросу качества питания (DQQ), анкета по знаниям о питании и анкета хронотипа. За день до начала вмешательства субъекты сдают анализы кала и крови, а затем определяют допустимую суточную норму. Во время вмешательства респонденты постоянно общаются с командой исследователей. В специально предоставленной форме фиксируют приверженность вмешательству (данные о времени приема капусты, например) и возможные побочные эффекты (изменения стула, метеоризм, метеоризм), а также тип стула по Бристольской шкале. . Во время вмешательства субъекты продолжают вести дневник диеты, физических упражнений и сна. После вмешательства сдают кровь повторно и пробу первого стула после вмешательства, по тому же принципу, что и до вмешательства. Аналогично, респонденты снова заполнят ADI. На втором этапе исследования субъекты продолжают поддерживать связь с исследователями, и через два месяца после последнего образца стула у субъекта снова берут образец стула и снова проводят анализ кишечной микробиоты. Во время обработки данных результаты этого исследования будут сравниваться с результатами предыдущего исследования, которое отличается от того, что в этом исследовании использовались пребиотики, а не синбиотики. Предыдущие исследования зарегистрированы на сайте ClinicalTrials.gov. Регистр под номером NCT05726435 был разработан как рандомизированное плацебо-контролируемое интервенционное исследование. Респонденты, профессиональные спортсмены, в течение 4 недель одна группа получала либо пребиотики, НУТРИОЗНЫЕ волокна, либо плацебо в количестве 20 г, разделенных на две дозы по 10 г каждая. Анализ кишечной микробиоты проводился несколько раз в ходе описываемого вмешательства. Результаты этого исследования будут сравниваться конкретно с результатами анализа кишечной микробиоты в двух временных точках: через 2 недели вмешательства и через 8 недель от начала вмешательства, когда субъекты находились в течение 4 недель без пребиотиков или плацебо после само вмешательство.

Методы обработки данных:

Различия между категориальными переменными будут проверяться с помощью теста хи-квадрат. Будут изучены различия между некатегорическими переменными в зависимости от распределения и количества групп, парного t-критерия, а также U-критерия Крускала-Уоллиса и Манна-Уитни, а затем критерия Бонферони для апостериорного анализа.

Для изучения возможных корреляций будет использован расчет коэффициентов корреляции Пирсона между параметрами нутритивного статуса, состава тела и диеты. Анкеты будут проверены путем расчета коэффициента альфа Кронбаха для каждого из их пунктов и посредством исследовательского однофакторного анализа, а внутренняя согласованность будет определена путем расчета коэффициентов корреляции Пирсона между отдельными пунктами анкеты. Относительные доли отдельных таксономических категорий будут использоваться для расчета индекса разнообразия Шеннона-Винера, чтобы сравнить разнообразие между группой образцов до и после вмешательства. Кластерный анализ будет проводиться с использованием программы BioNumerics (Applied Maths, Бельгия) на основе моделей полиморфизма длин рестрикционной эндонуклеазы I Haemophilus haemolyticus и MSPi. Значения P ниже 0,05 будут считаться статистически значимыми. Для статистической обработки данных будет использоваться программа SPSS 19.0 (IBM, Чикаго, США).