Modulación de la microbiota intestinal de deportistas profesionales con suplementación de chucrut (KOMS)

Material, participantes, metodología y plan de investigación El tema de la investigación serán las intervenciones con chucrut para modular la microbiota intestinal como simbiótico como sustancia cuyo efecto ha sido establecido en investigaciones científicas previas en humanos, y que, debido a la baja incidencia de efectos secundarios, se han evaluado como generalmente seguros. La intervención se referirá al uso de chucrut. Durante 10 días, los sujetos consumirán aproximadamente 250 g de chucrut (Brassica oleracea v. capitata) al día. El material de investigación es una donación de la empresa Eko Bio Zrnje, Vrbovec, Croacia. Se trata de repollo encurtido rallado producido por fermentación en una solución salina (NaCl) en la que se detuvo la fermentación mediante pasteurización y se envasó en tarros de vidrio de 500 g. La composición nutricional y microbiológica fue analizada por los laboratorios de la Facultad de Alimentos y Biotecnología, así como mediante el método de cultivo de laboratorio se confirmó la presencia de bacterias productoras de ácido láctico (4,82·103 (±2,31) unidades formadoras de colonias/mL) con Probiótico potencial por lo que este producto puede considerarse un simbiótico. Además, el chucrut se analizó utilizando métodos de suero de cabra normal de estado epiléptico generalizado no convulsivo de secuenciación de estrella guía natural de ácido ribonucleico ribosómico 16s para detectar la presencia de material genético de bacterias en su interior. En cuanto a la pasteurización, no será necesario transportar y almacenar el chucrut según el principio de la cadena de frío. Los resultados de la intervención en cuanto a la modulación de la microbiota intestinal se compararán con los de la investigación anterior en la que el tema de investigación fue la modulación de la microbiota intestinal por la fibra soluble NUTRIOSE en deportistas profesionales. NUTRIOSE son maltodextrina resistente, es decir, fibras solubles no viscosas obtenidas del trigo y del maíz (Roquette Freres, Lestrem, Francia) con acción prebiótica demostrada.

encuestados Para los fines de la investigación, se formará una cohorte con un mínimo de nueve encuestados: atletas profesionales. La muestra de encuestados se determinó por las condiciones técnicas, logísticas y financieras de la investigación, y se basa en que la comparación con cohortes de 9 sujetos de un estudio anterior (NCT05726435) que fueron expuestos a la intervención con prebióticos y controlados con placebo con El objetivo es la modulación de la microbiota intestinal de deportistas profesionales. El reclutamiento de encuestados se llevará a cabo en cooperación con socios de investigación (HOO) y del entorno social del investigador mediante un cuestionario en línea.

Metodología

Métodos de trabajo: métodos dietéticos, métodos antropométricos y toma y análisis de muestras de sangre venosa y heces. La muestra de variables consta de: una muestra de heces para secuenciar la microbiota intestinal, una muestra de sangre venosa para su procesamiento en laboratorio, medidas para la evaluación de características morfológicas (altura corporal, masa corporal, porcentaje de tejido graso y tejido muscular calculado mediante el analizador de composición corporal - bioimpedancia TANITA). Se utilizarán métodos dietéticos para controlar la ingesta de todos los nutrientes antes y durante la intervención así como durante la fase de seguimiento. Del método saldrá un diario de alimentación (de siete y diez días). Todos los datos dietéticos recopilados se procesarán a través del atlas Capnutr de alimentos y comidas preparadas de la región de los Balcanes (Glibetić et al., 2018).

Plan de investigación La investigación fue diseñada como un estudio de cohorte prospectivo. La investigación se llevará a cabo de conformidad con las normas de la Declaración de Helsinki y de acuerdo con la aprobación del Comité de Ética de la Facultad de Medicina de la Universidad de Zagreb de fecha 27.3.2023. La investigación se llevará a cabo en dos fases: en la primera fase, los sujetos recibirán un suplemento de chucrut durante diez días, y en la segunda fase de un mes se controlará la microbiota intestinal sin intentar modular la microbiota intestinal ("lavado -afuera"). En cooperación con HOO y socios académicos y comerciales, se invitará a los atletas profesionales a completar el formulario virtual "Los atletas y el microbioma intestinal", es decir, un cuestionario sobre el conocimiento de los atletas sobre el microbioma intestinal. El procesamiento de datos identificará candidatos potenciales para la Investigación. Los candidatos serán contactados por teléfono, informados sobre la investigación y evaluados en una breve conversación sobre los criterios dentro y fuera. Los candidatos que cumplan con los criterios serán incluidos en la cohorte. Después del establecimiento de la cohorte, se harán los arreglos logísticos y se planificará el plan de estudio. El estudio se dividirá en tres fases: antes, durante y después de la intervención. Primero, se informará a los sujetos sobre el plan de estudio (tiempo, número de visitas, logística) para el cual se obtuvo el consentimiento informado. En la fase previa a la intervención se realizará una reunión en la que nuevamente se explicará el plan y curso del estudio, se definirán los plazos y se distribuirá el equipo para la toma de la muestra y se enviarán los formularios proporcionados (Excel, Microsoft Office, EE. UU.). En la continuación de la primera fase, los encuestados registrarán la ingesta diaria de alimentos, la duración y la intensidad de la actividad física, así como el tiempo de sueño. Asimismo, cuestionarios sobre la cuestión de la calidad de la dieta (DQQ), cuestionario sobre conocimientos sobre nutrición y cuestionario de cronotipo. El día anterior al inicio de la intervención, los sujetos proporcionarán una muestra de heces y sangre, para luego completar la ingesta diaria aceptable. Durante la intervención los encuestados están en comunicación continua con el equipo de investigadores. En un formulario especialmente previsto, registran el cumplimiento de la intervención (datos sobre el tiempo de ingesta de repollo, por ejemplo) y los posibles efectos secundarios (cambios en las heces, flatulencias, gases), así como el tipo de heces según la escala de Bristol. . Durante la intervención, los sujetos continúan llevando un diario de dieta, ejercicio y sueño. Después de la intervención, se vuelve a tomar una muestra de sangre y una muestra de la primera silla después de la intervención, siguiendo el mismo principio que antes de la intervención. Asimismo, los encuestados llenarán nuevamente la ADI. En la segunda fase los sujetos de investigación permanecen en comunicación con los investigadores, y dos meses después de la última muestra de heces se vuelve a tomar una muestra de heces del sujeto y se realiza nuevamente el análisis de la microbiota intestinal. Durante el procesamiento de datos, los resultados de esta investigación se compararán con los resultados de la investigación anterior, la cual a diferencia de esta investigación utilizó prebióticos y no simbióticos en la intervención. Investigación previa registrada en ClinicalTrials.gov El registro bajo el número NCT05726435 fue diseñado como un estudio de intervención aleatorizado controlado con placebo. Los encuestados, atletas profesionales, durante las 4 semanas, un grupo recibió prebióticos, fibras NUTRIOSE o un placebo en una cantidad de 20 g divididos en dos dosis de 10 g cada una. Se realizaron análisis de la microbiota intestinal en varias ocasiones durante la intervención descrita. Los resultados de esta investigación se compararán específicamente con los resultados del análisis de la microbiota intestinal en dos momentos: después de 2 semanas de la intervención y 8 semanas desde el inicio de la intervención, cuando los sujetos estuvieron 4 semanas sin prebióticos ni placebo después de la intervención misma.

Métodos de procesamiento de datos:

Las diferencias entre variables categóricas se probarán mediante la prueba de chi-cuadrado. Se examinarán las diferencias entre variables no categóricas, según la distribución y el número de grupos, prueba t pareada, así como prueba U de Kruskal-Wallis y Mann-Whitney y luego prueba de Bonferoni para análisis post hoc.

Para examinar posibles correlaciones se utilizará el cálculo de los coeficientes de correlación de Pearson entre parámetros de estado nutricional, composición corporal y dieta. Los cuestionarios se validarán calculando el coeficiente alfa de Cronbach para cada uno de sus ítems y mediante un análisis exploratorio de un factor, y la consistencia interna se determinará calculando los coeficientes de correlación de Pearson entre los ítems individuales del cuestionario. Las proporciones relativas de categorías taxonómicas individuales se utilizarán para calcular el índice de diversidad de Shannon-Wiener para comparar la diversidad entre el grupo de muestras antes y después de la intervención. El análisis de conglomerados se realizará utilizando el programa BioNumerics (Applied Maths, Bélgica) basado en los patrones de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción de Haemophilus haemolyticus I y MSPi T. Los valores de p inferiores a 0,05 se considerarán estadísticamente significativos. Para el procesamiento de los datos estadísticos se realizará mediante el programa SPSS 19.0 (IBM, Chicago, EE.UU.).