Gyulladáscsökkentő pulmonális terápia cisztás fibrózisban (CF) betegek amitriptilinnel és placebóval (APA-IIb)

A cisztás fibrózist (CF), a leggyakoribb autoszomális recesszív betegséget, legalábbis a nyugati országokban, a cisztás fibrózis transzmembrán konduktancia szabályozó molekulájának (CFTR) mutációi okozzák, és Európában körülbelül 40 000 beteget érint. A legtöbb, ha nem az összes CF-betegben krónikus tüdőfertőzés alakul ki Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa). Jelenleg nem ismert, hogy a CF-betegek miért nagyon érzékenyek a P. aeruginosa fertőzésekre, és ami a legfontosabb, a cisztás fibrózis gyógyító kezelése nem áll rendelkezésre.

Vizsgálataink új patofiziológiai koncepciót adtak a cisztás fibrózisra. A kutatók kimutatták, hogy a ceramid döntő szerepet játszik a cisztás fibrózis kialakulásában és a Cftr-hiányos egerek nagy érzékenységében a P. aeruginosa fertőzéssel szemben (1,2). Biokémiai technikák, fluoreszcens mikroszkóp és tömegspektrometria segítségével a kutatók azt találták, hogy a ceramid felhalmozódik a különböző Cftr-hiányos egértörzsek tüdejében, mielőtt bármilyen fertőzés bekövetkezne, különösen a nagy és kis hörgők hámsejtjeiben és az alveoláris makrofágokban. A ceramid felhalmozódását a Cftr-hiányos hámsejtekben a szekréciós lizoszómák és a Cftr-hiányos sejtek pre-lizoszómáiban a pH 4,5-ről 6,0-ra történő emelkedése közvetítheti. A pH változása körülbelül 90%-kal csökkenti a ceramidot fogyasztó savas ceramidáz aktivitását, és csak 35%-kal csökkenti a ceramidot felszabadító savas szfingomielináz aktivitását. E két enzim aktivitásának egyensúlyhiánya, amelynek következtében a savas szfingomielináz relatív túlzott aktivitása ceramidot termel, a ceramid felhalmozódását eredményezheti. A savas szfingomielináz részleges gátlása, akár genetikailag, akár farmakológiailag, visszaállítja a ceramid-koncentrációkat a normál szint közelébe a Cftr-hiányos egerek tüdejében. A savas szfingomielináz genetikai gátlását úgy érték el, hogy Cftr-hiányos egereket kereszteztek savas szfingomielináz-hiányos egerekkel, így Cftr-hiányos és savas szfingomielinázra heterozigóta egereket hoztak létre (Cftr-/-/Smpd1+/- egerek). A savas szfingomielináz aktivitása ezeknek az egereknek a tüdejében körülbelül 50%-kal alacsonyabb volt, mint a vad típusú egerek tüdejében. A savas szfingomielináz farmakológiai gátlását Cftr-hiányos egerek funkcionális savas szfingomielináz inhibitor amitriptilinnel való kezelésével érték el (1,2). A megnövekedett ceramidkoncentráció a Cftr-hiányos egerek hörgőhámsejtjeiben e sejtek pusztulását, DNS-lerakódást a hörgőkben, krónikus tüdőgyulladást, valamint a Cftr-hiányos egerek nagy érzékenységét a P. aeruginosa okozta tüdőfertőzésekre váltotta ki. A ceramid koncentrációk genetikai úton történő normalizálása normalizálta ezeket a változásokat, és a savas szfingomielináz farmakológiai gátlása megakadályozta ezeket a változásokat. Ceramid felhalmozódást figyeltek meg CF-betegek csillós orrhámsejtjeiben, makrofágjaiban és tüdőtranszplantációs anyagaiban is (1-4). Ez a megállapítás arra utal, hogy az egéren végzett vizsgálataink eredményei a cisztás fibrózisban szenvedő emberekre is vonatkoznak. Ezután a kutatók a savas szfingomielináz funkcionális inhibitoraiból álló panelt alkalmazták, és Cftr-hiányos egereket kezeltek amitriptilin, trimipramin, dezipramin, klórprotixén, fluoxetin, amlodipin vagy szertralin inhalálásával, amelyek mindegyike a savas szfingomielináz funkcionális inhibitora. Ez az inhaláció csökkentette a savas szfingomielináz aktivitását specifikusan a tüdőben, és normalizálta a tüdő ceramid koncentrációját, a gyulladást és a fertőzésekre való hajlamot (2). C. Ward és munkatársai legújabb eredményei megerősítették a ceramid felhalmozódását CF-betegek tüdőmintáiban (5).

Klinikai adatok:

1. Kísérleti vizsgálat – A Cftr-hiányos egerek amitriptilin által közvetített védelmére alapozva a kutatók egy kis klinikai keresztezett vizsgálatot kezdeményeztek 4 cisztás fibrózisos beteggel, akiket amitriptilinnel, illetve placebóval kezeltek. Az eredmények klinikailag releváns tüdőfunkció-növekedést mutattak ki (FEV1-ként meghatározva) minden cisztás fibrózisban szenvedő betegnél 2 hetes amitriptilin kezelés után.
2. IIa fázis - A kísérleti vizsgálat pozitív adatai arra ösztönöztek bennünket, hogy 18 beteg bevonásával kezdjük meg a IIa fázis keresztezési vizsgálatát, és vizsgáljuk meg az amitriptilin cisztás fibrózisra gyakorolt ​​jótékony hatását nagyobb betegpopulációban a biztonságosság, a hatásmechanizmusok biokémiai bizonyítása érdekében. valamint az amitriptilin dózis meghatározására (25 mg/nap, 50 mg/nap, 75 mg/nap). Az amitriptilin jól tolerálható volt a betegcsoportban, és a 28 napos kúra végén nem észleltek SAE-t. A 80 nemkívánatos esemény közül 35 a gyógyszeres kezeléssel volt kapcsolatban, vagy esetleg kapcsolatban volt. Az amitriptilin két jól ismert mellékhatása, azaz a xerostomia és a fáradtság szignifikánsan különbözött a placebo és a három amitriptilin kezelési csoport között, de többnyire átmenetiek voltak. A FEV1-et a protokollonkénti elemzésben 13, 7, 8 és 8 elérhető betegciklusban elemezték, akik placebót, 25 mg, 50 mg vagy 75 mg amitriptilint/nap kaptak. 14 napos kezelés után a FEV1 elsődleges végpont szignifikánsan javult a 25 mg/nap amitriptilin csoportban a placebóhoz képest (FEV1: +5,0% a placebo-csoporthoz képest; p = 0,048). Nem figyeltek meg szignifikáns változást a tüdőfunkcióban, amikor a betegek 50 mg és 75 mg amitriptilint kaptak (6).
3. IIb fázis – A IIa fázisú vizsgálat pozitív adatainak értékelése érdekében a kutatók 2009-ben egy IIb fázisú vizsgálatot kezdeményeztek párhuzamos csoportos tervezéssel.